基于网络药理学分析加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑的机制

目的:借助网络药理学分析技术,探讨加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑的作用机制。方法:采用中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP),筛选加味归脾汤的主要化合物成分和药物靶基因;通过GeneCards和人类孟德尔遗传综合数据库(OMIM)建立失眠和焦虑的靶基因集;通过STRING 11.0软件分析交集基因之间的相互作用;采用Cytoscape_3.6.1软件分析和马修斯相关系数(MCC)算法筛选核心基因。基于网络分析结果,将48只SD雌性大鼠随机分配为空白组,模型组,右佐匹克隆片组(0.2 mg·kg-1·d-1),加味归脾汤低、中、高剂量组(0.31,1.25,5 g·kg-1·d-1)。采用氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射方法,建立失眠伴焦虑动物模型,并给予相应药物治疗7 d;然后进行自主活动实验观察大鼠活动的次数、时间和路程;实时荧光定量聚合酶链式反应检测大鼠海马组织中RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt1),丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3),丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)和白细胞介素-6(IL-6)mRNA表达。结果:从TCMSP数据库中共筛选出228个化合物活性成分;经与GeneCards和OMIM综合数据库比对,共获取181个疾病与药物的交集基因;STRING软件和MCC算法共获得MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6等9个关键基因。动物实验表明,与模型组比较,加味归脾汤高、中剂量组的活动次数、时间和路程显著减少(P0.01),海马组织中MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6 mRNA表达显著降低(P0.01),低剂量组差异无统计学意义。结论:加味归脾汤治疗阴火失眠伴焦虑作用机制,可能与对MAPK3,MAPK8,Akt1,IL-6基因的调节有关。     

左归丸含药血清调节Runx2激活ALP、OPN蛋白促进BMSCs增殖和分化的研究

目的 探讨左归丸（Zuoguiwan,ZGW）的补肾填精、益髓壮骨的作用,促进骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）的增殖和向成骨细胞方向分化。方法 制备ZGW含药血清,设置10% FBS DMEM组、成骨诱导液组、2.5%空白大鼠血清-成骨诱导液组、2.5% ZGW含药血清-成骨诱导液组。采用MTT法观察各组对BMSCs的增殖,使用碱性磷酸酶钙钴染色法检测BMSCs向成骨细胞方向的分化能力,碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）法检测细胞培养液中AKP的含量,Western blot检测BMSCs中Runt相关转录因子2（Runx2）、骨钙蛋白（osteocalcin,OPN）和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）蛋白的表达。结果 2.5% ZGW含药血清-成骨诱导液组能够促进BMSCs的快速增殖,较早地进入平台期,促进BMSCs中AKP的分泌,提高ALP含量,上调BMSCs细胞中Runx2、ALP和 OPN的蛋白表达水平。结论 ZGW抗骨质疏松的分子机制,可能与调节Runx2激活ALP、OPN蛋白表达,促进BMSCs增殖和向成骨细胞方向分化有关。     

中药及间充质干细胞调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化症的作用机制

背景：肌萎缩侧索硬化为一种进行性神经退行性疾病，常导致大脑和脊髓神经元死亡。肌萎缩侧索硬化发病机制极为复杂，难治率、死亡率高且目前其治疗药物仅有2种，因此开发新治疗方法以改善患者预后迫在眉睫。目的：综述中药及间充质干细胞调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化的作用机制。方法：以“traditional Chinese medicine,mesenchymal stem cells,ALS,immune response”为英文检索词，以“中药，间充质干细胞，肌萎缩侧索硬化，免疫反应”为中文检索词，检索万方、中国知网、PubMed及Web of Science数据库2010-2023年的相关文献，最终纳入69篇文献进行综述分析。结果与结论：(1)中药调控免疫反应治疗肌萎缩侧索硬化可总结为5个机制：主要包括冰片和黄芪甲苷等中药促进闭锁小带蛋白1、闭合蛋白5表达重建血液中枢神经系统屏障完整性；复方扶芳藤合剂调节自然杀伤细胞表面受体分子抑制其自身毒性；半枝莲和广藿香等作用补体系统因子抑制其异常激活；雷公藤和钩藤等介导细胞外信号调节激酶1/2衰减诱导型一氧化氮合酶产生而抑制小胶质细胞活化；左归丸、栝蒌根...     

中药调控PI3K/Akt信号通路治疗脑缺血再灌注损伤的研究进展

脑缺血再灌注损伤（CIRI）是指脑缺血后梗死区脑组织血流和氧供恢复，引起缺血脑组织继发性损伤的一种复杂的瀑布级联反应过程。目前尽快溶栓，恢复脑组织供血仍是治疗脑卒中的唯一策略，但相当一部分患者再灌注后其症状较前会更加严重，使患者面临神经功能损伤甚至死亡等不良结局，严重影响患者的生活质量和生命安全，因此深入探索脑缺血再灌注损伤的作用机制与治疗策略具有重要的临床意义。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路响着细胞的增殖、生长和分化，作为经典的抗凋亡/促生殖的信号传导通路之一，是预防CIRI的关键级联信号通路，在线粒体障碍、细胞凋亡、细胞自噬、氧化应激和炎症反应等多种机制中处于核心位点，与CIRI的发生发展密切相关。传统中医药对于临床治疗脑卒中及其并发症已有上千年历史，近年来中医药防治CIRI的临床成效也得到大量研究结果的肯定，进一步阐明了中药单体、活性成分及其复方可凭借多靶点、多组分和多途径的生物学优势直接或间接调控PI3K/Akt信号通路，并对CIRI起到整体性保护作用。笔者通过分析近年来国内外中医药相关研究进展，对调控PI3K/Akt信号通路在CIRI中的防治作用及机制进行综述，以期为中医药临床防治CIRI的作用机制研究提供进一步的理论依据。     

中药延缓神经血管单元衰老治疗神经退行性疾病的研究进展

神经退行性疾病是一大类因神经元出现退行性病变而导致的疾病的统称,衰老是神经退行性疾病的主要风险因素。神经血管单元(neurovascular unit, NVU)是大脑最小的功能单位,能够调节脑血流供应并维持大脑稳态。NVU细胞的加速衰老直接损害NVU功能并且导致多种神经退行性疾病的发生。NVU细胞衰老内在机制十分复杂,涉及氧化应激损伤、蛋白稳态丧失、DNA损伤、线粒体功能障碍、免疫炎症反应及细胞自噬障碍等。近年研究发现,中药可通过多途径、多靶点抑制神经血管单元衰老,发挥脑保护作用。故该文通过梳理近年来中药调节相关蛋白、改善线粒体功能障碍、减轻DNA损伤、降低炎症反应、抗氧化应激、调节细胞自噬等抗衰老机制,以期为深入研究中药抑制NVU细胞衰老提供理论依据,为新药开发与临床应用提供参考。     

消渴浴足方治疗糖尿病周围神经病变临床研究

目的：评价消渴浴足方治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy, DPN)的临床疗效。方法将符合入选标准的100例DPN住院患者按随机数字表法分为2组各50例,对照组采用西医常规治疗,治疗组在此基础上配合消渴浴足方足浴。对2组治疗前后中医症状积分、DPN临床评分(多伦多积分)进行比较,评价临床疗效。结果治疗后,治疗组多伦多评分中,症状分[(1.50±0.94)分比(2.23±1.01)分,t＝-2.920]、反射分[(3.60±1.77)分比(4.27±1.72)分,t＝-1.980]、感觉分[(1.53±0.63)分比(2.10±0.84)分,t＝-2.950]均显著低于对照组(P＜0.05);治疗组中医证候主症积分[(1.77±1.17)分比(3.17±1.82)分,t＝-3.550]、次症积分[(2.23±1.59)分比(4.27±1.57)分,t＝-4.980]、舌苔脉象积分[(1.83±0.65)分比(2.47±0.51)分,t＝-4.220]均显著低于对照组(P＜0.01)。结论消渴浴足方可改善DPN患者的临床症状。     

疏肝健脾养心方对失眠模型小鼠食欲素A及其受体的干预作用

目的 探讨疏肝健脾养心方下调食欲素A（OXA）及食欲素受体1（OX1R）、食欲素受体2（OX2R）的表达对失眠模型小鼠的干预作用。方法 利用腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）建立失眠小鼠模型,50只BALB/c小鼠随机分为空白组、模型组、右佐匹克隆组（0.13 mg·kg^-1）、疏肝健脾养心方低、高剂量组（8.4、33.6 g·kg^-1）,并给予相应药物治疗14 d。监测小鼠体质量变化,分别进行Morris水迷宫、戊巴比妥钠协同睡眠实验;免疫组化（IHC）检测下丘脑OXA的表达;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测下丘脑、血清、脾脏组织中OXA、5-羟色胺（5-HT）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测下丘脑OXA及其受体OX1R、OX2R mRNA表达。结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量显著降低（P<0.01）,逃避潜伏期时间显著增加（P<0.01）,睡眠潜伏期显著增加（P<0.01）,睡眠持续时间显著减少（P<0.01）,下丘脑、血清、脾脏组织中OXA含量升高、5-HT含量明显降低（P<0.05）,下丘脑中OXA及其受体的mRNA含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较,疏肝健脾养心方低、高剂量组小鼠体质量明显升高（P<0.05,P<0.01）,逃避潜伏期时间明显减少（P<0.05）,睡眠潜伏期减少,睡眠持续时间显著增加（P<0.01）,下丘脑、血清、脾脏组织中OXA含量降低、5-HT含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,下丘脑中OXA及其受体的mRNA含量显著降低（P<0.01）。结论 疏肝健脾养心方具有镇静、催眠作用,对失眠症有一定的治疗作用,其机制与增加脑中5-HT的含量,抑制下丘脑中OXA及其受体的表达有关。     

中医药治疗癫痫的系统评价/Meta分析的再评价

目的:对中医药治疗癫痫进行系统评价或用Meta分析进行再评价,以期为治疗癫痫提供新思路、新方法.方法:计算机检索中国知网、万方数据、维普网、PubMed、Webof Science5大数据库,遴选中医药治疗癫痫的系统评价/Meta分析的文章,检索时限设定为从建库至2020年2月,文献筛选、资料提取工作由两位研究者独立进行,并采用AMSTAR量表、GRADE系统工具分别对纳入的研究进行方法学质量及证据质量评价.结果:研究共纳入15个系统评价/Meta分析,AMSTAR量表评分显示,1篇得分为4分,属低质量;其余分值均在5～8分之间,为中等质量;无9分及以上高质量研究.GRADE分级显示,所有指标均为极低级、低级、中极,中级质量指标主要体现在总有效率、显效率、不良反应、脑电图改善率方面.但因为目前高证据质量的研究不足,难以形成统一定论.结论:当前中医药治疗癫痫的系统评价/Meta分析方法学质量偏低,结局指标证据支持度不足,因此,仍需更多科学、合理的高质量研究,以期为中医药治疗癫痫的临床疗效提供高质量的证据支持.     

左归丸调节β2AR介导的RANKL/OPG信号通路改善去卵巢大鼠骨量和显微结构水平

目的:探讨左归丸治疗绝经后骨质疏松症的分子机制之一是通过对β_2-肾上腺素能受体(β_2AR)介导的核转录因子-κB受体激活因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路的调节。方法:通过去卵巢法建立骨质疏松模型,将40只雌性SPF级SD大鼠随机分为模型组、假手术组、雌二醇(50μg·kg~(-1)·d~(-1))组、左归丸低、高剂量(2. 3,4. 6 g·kg~(-1))组。采用酶联免疫吸附实验检测血清骨转换标志物;显微CT对右侧股骨远端骨密度水平和骨小梁微结构进行测量和分析;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胫骨和下丘脑组织中β_2AR,OPG,RANK mRNA和蛋白表达水平。结果:与模型组比较,左归丸可显著降低大鼠血清中Ⅰ型胶原交联羧基端肽(β-CTX)水平(P 0. 01),增加骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平(P 0. 01),减少卵巢摘除诱导引起的大鼠骨量丢失,改善股骨远端骨小梁显微结构水平。同时,左归丸高、低剂量组均能显著上调胫骨组织中OPG mRNA和蛋白表达(P 0. 01),下调下丘脑组织β_2AR mRNA和蛋白表达水平(P 0. 01),同时也能显著下调胫骨组织中RANKL mRNA和蛋白表达水平(P 0. 01)。结论:左归丸改善围绝经期综合症,增加骨量和改善骨小梁显微结构水平的分子机制可能与对β_2AR介导的RANKL/OPG信号通路的调节有关。     

左归丸防治骨质疏松症的动物模型和评价方法

左归丸是滋阴补肾、填精益髓的经典名方,体现了"阳中求阴"的配伍思路,是防治骨质疏松症(OP)的常用有效方剂之一。OP动物模型模拟了OP在人体的病理状态和发病机制,是OP防治和新药研发的重要手段。该文详细论述了左归丸防治OP的2大类常用动物模型和特点,即原发性OP动物模型,包括去卵巢法动物模型和自发性老年OP动物模型;继发性OP动物模型,包括糖皮质激素诱导性动物模型,环磷酰胺诱导性动物模型以及肾大部切除性动物模型。左归丸防治OP的效用评价,包括酶联免疫吸附测定实验检测骨吸收标记物和骨形成标记物含量,双能X射线检测骨密度,显微CT分析骨小梁数量、骨小梁分离度、骨小梁厚度、骨体积/组织体积比以及骨表面/体积比,以衡量骨微结构水平,苏木精-伊红染色法观察骨病理形态,生物力学实验测试骨最大载荷力等生物力学特性。OP动物模型的成功与否,以及左归丸的药效作用,必须与5种不同的客观评价方法结合起来进行综合衡量,才能为左归丸的基础和临床研究提供科学的参考依据。但OP动物模型有待进一步优化,以凸显左归丸治疗OP的中医病机和证候特征。