C57BL/6小鼠胆结石形成中固醇载体蛋白2的mRNA水平和胆固醇饱和指数增高

目的观察C57BL/6鼠胆囊结石形成过程中肝固醇载体蛋白2(SCP2)mRNA水平及胆囊胆汁中胆固醇饱和指数的变化。方法C57BL/6鼠20只,分为结石组和对照组。对照组喂普通饲料,结石组采用1%的胆固醇饮食4周;RT-PCR方法检测肝SCP2 mRNA水平的变化;全自动生化仪检测胆脂,并计算胆固醇饱和指数。结果胆囊结石组肝SCP2 mRNA水平显著升高,胆汁胆固醇饱和指数亦显著增加。结论肝SCP2的表达及胆汁CSI的增高呈正相关。     

胡椒碱抑制C57BL/6小鼠胆囊结石的形成

1材料与方法1·1动物模型C57BL/6小鼠30只,雄性,10周龄,由北京大学医学部实验动物中心提供。分笼饲养,控制光照12h(06∶00AM~18∶00PM),普通饲料饲养2w后,随机分为3组(每组各10只)。对照组:每日喂普通颗粒饲料,同时给予等量空白液灌胃;结石组:每日喂饲15%脂肪、1%胆固醇、0·5%胆酸饲料,同时给予等量空白液灌胃;胡椒碱组:每日喂饲15%脂肪、1%胆固醇、0·5%胆酸饲料,同时给予胡椒碱30mg/kg灌胃。实验前,动物禁食12h,3%戊巴比妥(35mg/kg body weight)麻醉,剖腹,结扎胆囊管,迅速取肝组织置液氮中冷冻,-80℃冰箱内保存备用。摘取胆囊,观察成…     

胡椒碱对C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响

目的观察胡椒碱对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响。方法C57BL/6小鼠30只,对照组10只,普通饮食;结石组10只,喂含1%的胆固醇饮食;用药组10只,喂含1%的胆固醇饮食和胡椒碱(30mg/kg体重)。4周后分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及化学方法检测肝组织Scp2mRNA水平和胆脂的变化,胆固醇饱和指数(CSI)用Carey表计算。结果结石组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶,胡椒碱组和对照组无结石和结晶形成,与结石组相比,胡椒碱组肝Scp2mRNA水平和胆囊胆汁CSI明显降低。结论胡椒碱在明显抑制实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的同时,显著降低肝Scp2mRNA水平和胆汁CSI,这是否与胡椒碱的防止结石形成有关有待进一步的研究。     

以问题为基础学习教学体系中案例库的建设与完善

案例是“以问题为基础学习”教学方法的材料和基础,是该教学方法能否实现其教学目标的关键。在北京大学基础医学院“新途径”教育教学改革中,就10个器官系统、3个重要方向构建了案例库,保障了基础医学院教学改革的顺利实施。     

胡椒碱抑制C57BL/6小鼠胆囊结石形成的研究

目的 观察胡椒碱对实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的影响.方法 将C57BL/6鼠30只,随机分为3组.对照组10只,普通饮食;结石组10只,喂含1%的胆固醇饮食;胡椒碱组10只,喂含1%的胆固醇饮食和胡椒碱(30 mg/kg体重).4周后,分别利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及化学方法检测肝组织固醇载体蛋白(Scp2)mRNA水平和胆酯的变化,胆固醇饱和指数用Carey表计算.结果 结石组9只出现胆囊结石,10只出现胆固醇结晶;胡椒碱组和对照组无结石和结晶形成,与结石组相比,胡椒碱组肝Scp2 mRNA水平和胆囊胆汁CSI明显降低.结论 胡椒碱在明显抑制实验性C57BL/6小鼠胆囊结石形成的同时,能显著降低肝Scp2 mRnNA水平和胆汁胆固醇饱和指数.     

大鼠谷氨酸受体2抗体制备及其与Caspase 3相互作用分析

目的克隆大鼠谷氨酸受体2(GluR2)基因片段,构建重组表达质粒,在原核系统诱导表达,制备多克隆抗体,分析GluR2与caspase3的相互作用。方法从大鼠脑组织提取总RNA,实时聚合酶链反应(RT-PCR)扩增GluR2基因抗原性较强的一段,定向克隆入表达载体pGEX-4T1,构建GST-GluR2融合蛋白表达质粒,转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达GluR2蛋白。用SDS-PAGE方法分离目的蛋白,免疫家兔,制备抗血清。用Western Blot方法鉴定抗体的特异性,用Co-IP实验分析GluR2和caspase3的相互作用。结果SDS-PAGE显示GST-GluR2融合蛋白诱导表达成功;Western Blot显示制备的多克隆抗体具有较高的特异性;Co-IP显示大鼠脑组织中GluR2和caspase3存在相互作用。结论成功获得兔抗鼠GluR2特异性抗血清;脑组织中GluR2和caspase3存在相互作用,为进一步研究神经毒作用导致GluR2下调的分子机制奠定基础。     

乙酰胆碱受体γ亚基基因-204/-50片段与鸡发育阶段骨骼肌核因子的相互作用

目的：分析鸡乙酰胆碱受体（ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ＡＣｈＲ）γ亚基基因与不同发育阶段鸡骨骼肌核因子的相互作用。方法：以ＡＣｈＲγ基因２０４／５０片段为探针，与孵化９～１８ｄ的鸡胚和出生后１ｄ、２周雏鸡骨骼肌核抽提物进行凝胶阻滞和Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析。结果：凝胶阻滞实验显示，９ｄ、１３ｄ鸡胚骨骼肌核抽提物与γ基因２０４／５０片段结合反应可形成明显的阻滞条带，１８ｄ后阻滞条带明显减弱。Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析显示，９～１８ｄ肌核抽提物中有２种核因子可识别、结合γ基因２０４／５０片段，相对分子质量分别为３００００和５３０００。采用２种实验方法在出生后的核抽提物中未检出ＤＮＡ结合活性。结论：ＡＣｈＲγ基因２０４／５０片段可被３００００和５３０００两种核因子识别，两因子在鸡胚发育的９～１８ｄ表达，出生后消失。它们可能对鸡ＡＣｈＲγ基因的转录激活起作用。