大鼠脑片的器官型培养及其中神经元的发育规律

目的:建立器官型脑片培养的方法,证明体外培养到一定时间神经元发育成熟,可在此基础上制作神经系统变性疾病模型.方法:取出生24 h内SD大鼠的额叶皮质作器官型培养.取培养7～14 d内每天的及培养第3周、4周和8周时的脑片,固定、脱水、切片后行Nissl和抗神经丝重链(NFH)免疫组化染色.同时用正常生长大鼠的脑片作对照,观察与培养脑片染色结果的异同.结果:Nissl染色结果显示,培养脑片中的锥体细胞体积逐渐增大、染色变浅,1～4周内皮质分层清晰.抗NFH免疫组化染色显示,培养至第10天时,位于第V层的锥体细胞着色,第12天以后Ⅲ层和V层均着色.对照组第5天时V层着色,3周以后Ⅲ层和V层都着色.对位于Ml区的第V层锥体细胞进行计数,从培养第12天开始至2个月时,神经元数目保持恒定.结论:器官型脑片培养适用于出生后神经元发育的研究,并可用于制作神经系统变性疾病的体外模型.     

氢化可的松抑制Jurkat细胞的调节性体积减小

目的 :研究氢化可的松对Jurkat细胞调节性体积减小 (regulatoryvolumedecrease ,RVD)的影响及可能的机制。方法 :通过MoticImagesAdvanced 3.1软件系统实时监测细胞体积的变化 ,并通过3 H掺入实验观察Jurkat细胞增殖。结果 :氢化可的松对Jur kat细胞RVD具有剂量依赖性的抑制作用 ,在 10 -4和 10 -3 mol·L-1时可以明显抑制Jurkat细胞的RVD ,而在 10 -9、10 -7和 10 -5mol·L-1时对Jurkat细胞的RVD没有明显影响。钾通道阻断剂奎宁 (quinine)亦可以抑制Jurkat细胞的RVD。氢化可的松和奎宁在10 -3 mol·L-1均可明显抑制Jurkat的增殖 (包括自然增殖和ConA诱导增殖 )。结论 :氢化可的松对Jur kat细胞RVD的抑制可能是通过钾通道起作用     

生理学教学中以问题为基础学习应用效果的评价

以问题为基础学习(problem-baged learning,PBL)是一种有效的教学方法,北京大学医学部生理学与病理生理学系从2004年起开展PBL教学.为了改善PBL教学效果,本系对PBL教学进行了连续3年的跟踪调查,收集了大量数据,形成了对PBL较为客观的评价.这些反馈信息既显示了PBL教学方法的优势,也发现了其中存在的问题,为继续推进PBL教学、改善教学效果提供了依据.     

运动神经元病体外器官模型的建立

目的:利用微孔膜器官型脊髓组织片培养的方法,加入适当剂量的线粒体功能抑制剂丙二酸钠,造成选择性运动神经元数目减少从而建立肌萎缩侧索硬化症(ALS)的体外器官模型.方法:取出生后6天的SD乳鼠的腰段脊髓冠状切片后将脊髓片置于微孔膜上进行培养,首先经丙二酸钠量效检测确定最佳丙二酸钠剂量.在培养第3天时加入适量的丙二酸钠,维持此浓度继续培养至第15天时结束培养,并利用免疫组化方法行运动神经元及中间神经元计数.结果:经丙二酸钠量效检测后确定2 mmol/L为最佳加入剂量(存活率为75%,P<0.01).造模实验结果显示,对照组的脊髓片内的运动神经元数目为每半侧(15.29±1.70)个,丙二酸钠组为每半侧(11.00±2.45)个, 两组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组中间神经元的数目略有减少,但两组间差异无统计学意义.结论:利用微孔膜进行器官型脊髓片培养并加入2 mmol/L丙二酸钠造成的此病理模型符合运动神经元病患者的特点,可重复性强,适用于ALS的发病机制、治疗等方面的研究.     

脑内注射白细胞介素-1β对淋巴结细胞应激免疫抑制因子生成的影响

our previous work showed that a suppressive factor( a protein with largemolecular weight in serum was induced by restraint stress in mice and rats,which suppressed Con Ainduced lymphocyte proliferation.It was also found that the generation of serum suppressive factorwas under control of the central nervous system.Our further study showed thatintracerebroventricular(icv )injection of interleukin 1 receptor antagonist(IL-1Ra)antagonised thegeneration of serum suppressive factor induced by restraint stress and icv injection of interleukin-1β(IL-1β)increased the generation of the suppressive factor.Our experiment also showed that the serumsuppressive factor induced by restraint stress was first made in lymph tissue and then released intoblood.The present work was designed to investigate the role of IL-1 in the brain in generation of thesuppressive factor in lymph node in mice.Icv injection of IL-1β( 1 pg/mouse) was shown tosignificantly increase the generation of the suppressive factor in lymph node.Icv injection of IL-1Ra,however ,antagonised generation of the suppressive factor.In mice without restraint stress,both thesuppressive factor in serum and in lymph node were found to be induced in dose-dependent manner byicv injection of IL-1β.Taken together,these results suggest that IL-1β in brain played a veryimportant role in generation of the suppressive factor in lymph node.The positive correlation betweenthe suppressive action of lymph node and of serum added to the evidence that lymph tissue is probablythe source of the serum suppressive factor.     

环磷酰胺条件性免疫抑制反应动物模型的建立及有关机制的分析

环磷酰胺条件性免疫抑制反应动物模型的建立及有关机制的分析李乐群，汪静雪，宋德懋，范少光，梅林（北京医科大学生理学系，北京１０００８３）在神经免疫调节的研究中，近年来有报道证明某一无关刺激当与一些能够引起机体免疫反应的刺激（又称非条件刺激）相结合（强化...     

运动神经元线粒体抑制后产生谷氨酸毒性损伤

目的研究运动神经元病中线粒体损伤和谷氨酸兴奋毒性之间的关系。方法取SD大鼠额叶中央前回部位做器官型脑片培养,加入丙二酸钠造成线粒体损伤,同时加入谷氨酸受体阻滞剂地佐环平(MK-801),分4组,浓度分别为0·025、0·050、0·075、0·100mmol/L。用尼氏染色和抗神经丝重链免疫组织化学染色显示神经元的形态并进行计数;用丙二醛(MDA)检测试剂盒检测培养基中MDA的含量。结果用丙二酸钠0、1、3、5、7mmol/L处理1周后,脑片中运动神经元数目(个/脑片)呈剂量依赖性减少,分别为49·78±4·30、47·89±6·81、25·67±6·18、4·44±3·40、1·22±1·99。选择3mmol/L丙二酸钠作为损伤组进行下一步实验。和损伤组相比,0·050、0·075、0·100mmol/LMK-801组运动神经元数目(个/脑片)明显增加,分别为38·89±3·41、39·33±3·61、41·33±3·74,但三组之间差异无统计学意义,并且未达到正常组水平。正常组和3、5mmol/L丙二酸钠组培养基中MDA含量(mmol/L)分别为13·47±0·49、15·87±0·74、20·52±0·74,在5mmol/L丙二酸钠组中同时加入0·050mmol/LMK-801,MDA含量下降至14·45±0·78,接近正常水平。结论谷氨酸兴奋毒性参与慢性线粒体抑制导致的运动神经元损伤;在运动神经元病的发病机制中,线粒体损伤和谷氨酸兴奋毒性之间存在相互联系。     

生理学试卷传统和情景式选择题的比较

目的评估情景式考题对生理学试卷质量和考察学生能力的作用。方法以难度系数和区分度为指标,比较试卷情景式和传统选择题的考核效果。结果情景式考题难度系数比传统考题有所增加,且情景式考题的区分度更合理。理解型情景式考题区分度高于传统的记忆型和理解型考题,应用型情景式考题区分度与相应的传统考题相比没有差别。结论情景式考试题不仅能提高试卷质量,更能考察和评估学生的学习能力。