冬凌草甲素对膀胱癌EJ细胞的生长抑制作用及机制

目的研究冬凌草甲素（ORI）对膀胱癌EJ细胞株的抑制作用及机制。方法 MTT法检测ORI对EJ细胞的生长抑制作用;电子显微镜和Hoechst 33258染色法观察细胞的形态学变化;Western blot检测Bcl-2和Bax表达的变化。TRAP-PCR-银染法检测端粒酶活性的变化。结果 ORI对EJ细胞有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系。随着ORI作用时间延长,Bcl-2的表达逐渐减弱,Bax的表达逐渐增强。EJ细胞的端粒酶活性随着ORI作用时间的延长而逐渐降低。结论 ORI对膀胱癌EJ细胞有明显的生长抑制作用;机制可能是通过下调Bcl-2/Bax和通过抑制端粒酶活性诱发EJ细胞凋亡的。     

Akt-Kv4.3-CaMKⅡ在有氧运动抑制压力负荷小鼠 心肌肥厚中的作用及其机制

目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶（Akt）-离子通道Kv4.3（Kv4.3）-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号 通路在有氧运动抑制压力负荷小鼠心肌肥厚中的作用及其机制。方法 60只实验小鼠均分为5组：假手术（SHAM） 组、主动脉缩窄手术（TAC）组、假手术+有氧运动（SHAM+E）组、主动脉缩窄术+有氧运动（TAC+E）组,主动脉缩窄术+ 有氧运动+ Akt抑制剂Perifosine（TAC+E+Peri）组。高分辨率小动物超声系统评价小鼠心功能及肥厚程度,麦胚凝集 素（WGA）染色检测心肌细胞横截面积;荧光定量PCR（RT-qPCR）检测ANP表达,Western blot检测蛋白心房钠尿肽 （ANP）、p-Akt、Kv4.3、p-CaMKⅡ表达水平。结果 与SHAM组相比,TAC促进心肌肥厚,恶化心功能（P＜0.01）。给 予有氧运动训练后,TAC+E组较TAC组小鼠心功能改善,心肌肥厚程度减轻（P＜0.01）。同时Western blot检测显示, TAC组较SHAM组p-Akt、Kv4.3表达降低,p-CaMKⅡ上调（P＜0.01）;TAC+E组p-Akt和Kv4.3表达较TAC小鼠增加, p-CaMKⅡ下调（P＜0.01）。而给予Akt抑制剂Perifosine后,相比于TAC+E组,TAC+E+Peri组心功能恶化、心肌肥厚 程度和ANP表达增加,心肌细胞横截面积增大,同时伴随Kv4.3表达降低、p-CaMKⅡ增高（P＜0.01）。结论 有氧运 动训练能够通过调节Akt-Kv4.3-CaMKⅡ信号通路抑制压力负荷心肌肥厚。     

KCNA5基因多态性与特发性房颤的关系

目的 探讨KCNA5基因单核苷酸多态性（SNP）与特发性房颤（IAF）的关系。方法 选取2015年1月至2018年12月海南医学院第二附属医院收治的204例IAF患者（IAF组）作为研究对象,并以性别、年龄作为匹配因子收集200例体检健康者作为对照组。采用基因测序法检测两组研究对象KCNA5 SNP（rs3741930、rs1056468）的分布,基于不同基因型（rs3741930、rs1056468）将IAF患者分为两组,比较IAF患者不同基因型相关临床指标的差异。结果 ①KCNA5基因rs3741930位点CC、CT、TT在IAF组、对照组中实际分布与预期分布对比,差异均无统计学意义（P>0.05）,KCNA5基因rs1056468位点AA、AT、TT在IAF组、对照组中实际分布与预期分布对比,差异均无统计学意义（P>0.05）;②IAF组rs3741930位点CC基因型和等位基因C分布频率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,两组研究对象CT、TT基因型频率对比,差异无统计学意义（P>0.05）;IAF组rs1056468位点AA、AT、TT和等位基因A分布频率与对照组对比差异均无统计学意义（P>0.05）;③IAF患者rs3741930位点CC与CT+TT基因型年龄、舒张压、收缩压、心率、左心房内径、射血分数对比,差异均无统计学意义（P>0.05）,CC基因型患者体质量指数（BMI）高于CT+TT基因型,差异有统计学意义（P<0.05）;IAF患者rs1056468位点AA与AT+TT基因型年龄、舒张压、收缩压、心率、左心房内径、射血分数对比,差异均无统计学意义（P>0.05）,AA基因型患者BMI低于AT+TT基因型,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 KCNA5基因SNP rs3741930与IAF发病有关,C等位基因携带人群更易患病。     

冬凌草甲素对人膀胱癌细胞株BIU-87的生长抑制作用及机制探讨

目的 观察冬凌草甲素(ORI)对膀胱癌细胞BIU-87的生长抑制作用并探讨其作用机制.方法 用MTT法检测ORI作用后BIU-87的生长抑制情况;用光学显微镜和电子显微镜观察细胞形态;用流式细胞仪检测细胞凋亡;分光光度法检测BIU-87中Caspase-3的活性变化;用端粒酶重复扩增(TRAP)-PCR-银染法检测其端粒酶活性的变化.结果 ORI对BIU-87有明显的生长抑制作用,呈时间-效应关系和浓度-效应关系.随着ORI作用时间延长,BIU-87凋亡增加,BIU-87内的Caspase-3活性增加,端粒酶活性逐渐降低.结论 ORI对BIU-87有明显的生长抑制作用;其机制可能是通过活化细胞内的Caspase-3和抑制端粒酶活性诱发BIU-87细胞凋亡的.     

冬凌草甲素和冬凌草多糖膀胱灌注治疗C57BL/6小鼠膀胱肿瘤的疗效及机制

目的:探讨冬凌草甲素(ORI)和冬凌草多糖(RRP)膀胱灌注治疗C57BL/6小鼠膀胱肿瘤的疗效及机制,并观察其对膀胱及全身重要器官的影响。方法:以C57BL/6小鼠原位膀胱肿瘤模型为研究对象,建立模型后10d,4组小鼠分别膀胱灌注磷酸盐缓冲液(PBS)、ORI、RRP、ORI+RRP,每5d灌注1次,灌注4次后1周处死小鼠,流式细胞术(FCM)检查血液淋巴细胞亚群变化,常规病理检查膀胱和心、肝、脾、肺、肾,了解灌注后对膀胱和重要器官的影响,并计算各自的治愈率。TUNEL检测残存肿瘤凋亡细胞。结果:ORI组治愈率为80.0%,RRP为60.0%,ORI+RRP组为93.3%,均明显高于对照组(13.3%);ORI组和ORI+RRP组明显高于RRP组(P0.01)。ORI组、RRP组和ORI+RRP组残存肿瘤细胞出现凋亡,越近肿瘤表面,凋亡越明显。灌注后,血液淋巴细胞亚群各组无差别,膀胱除ORI组和ORI+RRP组的移行上皮明显变薄外,无其它异常改变。各组的肝、脾、肺、心、肾未见明显损害。结论:ORI、RRP具有明显的抗C57BL/6小鼠膀胱肿瘤作用,其作用机制可能是诱发肿瘤细胞凋亡。ORI、RRP膀胱灌注治疗C57BL/6小鼠膀胱肿瘤对全身重要器官未见明显影响。     

冬凌草甲素对膀胱癌T24细胞的诱导凋亡作用及机制

目的 研究冬凌草甲素(Oridonin,ORI)对膀胱癌T24细胞的作用及机制.方法 MTT法检测ORI对T24细胞的生长抑制作用;光学显微镜和Hoechst 33258染色法荧光显微镜观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测凋亡变化;分光光度法检测Caspase 3的活性变化;Western blot检测bcl-2和bax表达的变化.结果 ORI对T24细胞有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系.随着ORI作用时间延长,T24细胞凋亡增加,见凋亡小体出现.随着ORI作用时间的延长,T24细胞的Caspase 3活性逐渐增加,bcl-2的表达逐渐减弱,bax的表达逐渐增强.结论 ORI对膀胱癌T24细胞有明显的诱导凋亡作用;机制可能是活化Caspase 3和下调bcl-2/bax.     

心脏瓣膜手术同期冠状动脉旁路手术治疗冠心病合并瓣膜病的临床观察

目的探讨心脏瓣膜手术同期冠状动脉旁路手术(CABG)治疗冠心病合并瓣膜病的可行性。方法回顾性分析2005年1月-2011年8月海南农垦总医院行瓣膜手术和CABG的60例患者的临床资料,60例患者按是否同期行心脏瓣膜手术与CABG分为同期组和非同期组,比较两组术后临床指标和随访预后结果。结果同期组术后呼吸机辅助通气时间、ICU室停留时间、术后出院时间均显著低于非同期组,相比较差异有统计学意义(t=12.25、14.89、13.20,P<0.01);同期组术后房颤、围手术期心梗、恶性心律失常的发生率均显著低于非同期组,相比较差异有统计学意义(χ2=6.84、11.40、8.86,P<0.05);随访期内,同期组死亡率、瓣周漏发生率和永久性起搏器植入率均显著低于非同期组,相比较差异有统计学意义(χ2=20.89、7.60、5.07,P<0.05)。结论冠心病合并瓣膜病老年患者同期行CABG与心脏瓣膜手术是可行的。术前和术后要做好对症处理,术中做好心肌保护,可以大大降低手术的死亡率和并发症的发生率。     

冬凌草甲素诱导膀胱癌MB49细胞凋亡及机制研究

目的研究冬凌草甲素对膀胱癌MB49细胞株的生长抑制及诱导凋亡作用及其机制。方法MTT法检测冬凌草甲素对MB49细胞的生长抑制作用;Hoechst 33258染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检查Annexin V-FITC-PI双染色法检测细胞凋亡率;分光光度法检测caspase-3、caspase-8和caspase-9活性变化;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果冬凌草甲素对MB49细胞有明显的生长抑制作用,呈明显的时间-效应关系和浓度-效应关系。随着冬凌草甲素作用浓度增加,凋亡细胞数和坏死细胞数均增加,浓度越高,坏死细胞的比率增加越多。随着冬凌草甲素作用时间延长,MB49细胞的Caspase-3和Caspase-9活性均升高;Bcl-2蛋白的表达逐渐减弱,Bax蛋白的表达逐渐增强,但Caspase-8未见明显变化。结论冬凌草甲素对膀胱癌MB49有明显的抗肿瘤作用。冬凌草甲素可能主要通过Fas/FasL-线粒体途径上调Bax、下调Bcl-2,导致MB49细胞凋亡的发生。     

KCNA5基因多态性与特发性房颤的关系

目的 探讨KCNA5基因单核苷酸多态性（SNP）与特发性房颤（IAF）的关系。方法 选取2015年1月至2018年12月海南医学院第二附属医院收治的204例IAF患者（IAF组）作为研究对象,并以性别、年龄作为匹配因子收集200例体检健康者作为对照组。采用基因测序法检测两组研究对象KCNA5 SNP（rs3741930、rs1056468）的分布,基于不同基因型（rs3741930、rs1056468）将IAF患者分为两组,比较IAF患者不同基因型相关临床指标的差异。结果 ①KCNA5基因rs3741930位点CC、CT、TT在IAF组、对照组中实际分布与预期分布对比,差异均无统计学意义（P>0.05）,KCNA5基因rs1056468位点AA、AT、TT在IAF组、对照组中实际分布与预期分布对比,差异均无统计学意义（P>0.05）;②IAF组rs3741930位点CC基因型和等位基因C分布频率高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,两组研究对象CT、TT基因型频率对比,差异无统计学意义（P>0.05）;IAF组rs1056468位点AA、AT、TT和等位基因A分布频率与对照组对比差异均无统计学意义（P>0.05）;③IAF患者rs3741930位点CC与CT+TT基因型年龄、舒张压、收缩压、心率、左心房内径、射血分数对比,差异均无统计学意义（P>0.05）,CC基因型患者体质量指数（BMI）高于CT+TT基因型,差异有统计学意义（P<0.05）;IAF患者rs1056468位点AA与AT+TT基因型年龄、舒张压、收缩压、心率、左心房内径、射血分数对比,差异均无统计学意义（P>0.05）,AA基因型患者BMI低于AT+TT基因型,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 KCNA5基因SNP rs3741930与IAF发病有关,C等位基因携带人群更易患病。     

原发性膀胱印戒细胞癌的诊断和治疗：附2例报告

目的提高对原发性膀胱印戒细胞癌的认识和诊治水平。方法回顾分析我院收治的2例原发性膀胱印戒细胞癌,结合文献就其临床表现、诊断及治疗进行讨论。第1例患者,男,57岁,以全程肉眼血尿和继发的贫血就诊,CT检查示膀胱顶部占位性病变,界限清楚,有斑点状钙化。第2例患者,男,66岁,以黏液尿就诊,无其他临床表现,CT示膀胱右侧壁占位性病变。均于术前膀胱镜活检明确诊断。第1例因患者拒绝膀胱全切除术行膀胱部分切除术加脐尿管和相邻腹膜的切除术,第2例因陈旧性心肌梗塞行膀胱部分切除术。结果第1例患者术后血尿消失,贫血纠正。7个月后发现肺部转移,术后8个月死亡。第2例术后黏液尿和膀胱刺激症状消失。随访37个月,患者恢复良好,无复发和转移。结论原发性膀胱印戒细胞癌临床罕见,预后较差,诊断主要依赖病理学检查,全膀胱切除术是其首选治疗方法。