慢性心力衰竭患者CD4+CD25+调节性T细胞检测及意义

目的:探讨慢性心力衰竭(CHF)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)水平及意义。方法:采用流式细胞分析法,检测42例CHF患者(CHF组)和16例正常对照者(对照组)外周血CD4 CD25 Treg/CD4 T细胞比例。结果:CHF患者外周血CD4 CD25 Treg/CD4 T细胞比例[(12.2±3.8)%]显著低于对照组[(16.3±5.2)%]。CD4 CD25 Treg/CD4 T比例在缺血性心脏病者[(12.6±4.1)%]与非缺血性心脏病者(12.0±3.7%)间差异无统计学意义,但心功能NYHA分级Ⅲ~Ⅳ级者[(10.4±3.2)%]比例明显低于Ⅰ~Ⅱ级者[(13.3±3·8)%]。结论:CHF患者外周血Treg比例减少,且与心功能有一定关系。CD4 CD25 Treg比例降低可能打破了外周免疫耐受,参与了心力衰竭的发生发展。     

维持胚胎干细胞不分化的分子机制

人胚胎干细胞(ESC)的主要特征和应用前景能够在体外长期甚至永久保持未分化状态,并维持其原始全能干细胞的特性,当培养环境改变时又能向3个胚层的所有组织类型细胞分化、增殖。ESC的这种基本生物学特性是由其调控机制的两个方面来保证的,即不分化的维持和分化的诱导,本文主要探     

B-ALL患者PTEN表达及其启动子甲基化状态研究

目的:探讨抑癌基因PTEN在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者外周血单个核细胞中的表达及其与启动子甲基化状态之间的关系.方法:收集24例初发B-ALL患者和25例正常人外周血单个核细胞,通过Kolmogorov-Smirnov(KS)分析,利用定量流式细胞术检测PTEN表达.提取基因组DNA后,采用MSP方法检测PTEN启动子甲基化状态,进而在体外培养过程中,以DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮-2'脱氧胞嘧啶进行处理,观察其对B-ALL单个核细胞PTEN表达的影响.结果:25例正常人外周血单个核细胞均表达PTEN,KS分析时D值为0.941±0.017,而24例B-ALL患者中22例(91.6%)外周血单个核细胞PTEN表达明显缺失,D值仅为0.546±0.115,两者差异具有显著性意义(P＜0.01);正常人和PTEN高表达的B-ALL患者外周血单个核细胞中未发现PTEN启动子发生甲基化修饰,而PTEN表达缺失的B-ALL患者中有5例(22.7%)出现PTEN启动子甲基化,将其单个核细胞培养时以5-氮-2'脱氧胞嘧啶处理4d,PTEN表达明显升高.结论:PTEN的表达缺失在B-ALL患者中很常见,其启动子甲基化导致的PTEN表达缺失在B-ALL的发生中可能起重要作用.     

骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复的实验探究

目的：探讨骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子促进大鼠脊髓损伤修复效果。方法：选取30只Wistar大鼠,按照移植方法分为研究组与对照组,研究组移植采取骨髓基质细胞移植兼用脑源性神经营养因子（BDNF）,对照组单纯移植的骨髓间充质肝细胞（BMSCs）悬液,分析比较两组效果。结果：术后2～8周,两组神经功能评分有统计学差异（P＜0.05）。结论：BMSCs移植能够提高大鼠半横断脊髓结构及功能水平恢复BMSCs与BDNF,联合应用对脊髓损伤修复具有明显协同效果。     

多奈哌齐对阿尔茨海默病患者调节性T细胞的影响

目的:观察阿尔茨海默病(AD)及认知功能正常的老年患者外周血CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞比例及IL-10、TNF-α、TGF-β1及hs-CRP水平及多奈哌齐治疗1年后调节性T细胞比例的变化。方法:采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+CD127dim/-Treg细胞数量,酶联免疫法(ELISA)法测定血清IL-10、TNF-α、TGF-β1及hs-CRP水平。结果:1年后AD对照组及健康对照组CD4+CD25+CD127dim/-T细胞占CD4+CD25+T细胞比例均明显增加(P0.05),多奈哌齐治疗组CD4+CD25+CD127dim/-T细胞占CD4+CD25+T细胞比例无明显变化。AD干预组、对照组和健康对照组间血清IL-10、TNF-α、TGF-β1及hs-CRP水平无明显变化,多奈哌齐治疗前后IL-10、TNF-α、TGF-β1及hs-CRP水平无明显变化。结论:外周血Treg水平在健康及AD老年人群均随增龄而增加,多奈哌齐的干预可以延缓AD患者Treg比例随增龄而增加。     

多参数流式细胞术分析505例急性淋巴细胞白血病跨系列表达方式

跨系列抗原表达是白血病免疫表型的一个重要特征。对于急性淋巴细胞白血病（ALL）的跨系表达方式,目前国内尚缺乏大样本多参数的研究报道。本研究利用三色流式细胞术探讨505例ALL（431例B—ALL,74例T—ALL）患者23种系相关抗原的跨系表达方式。结果显示：全部ALL病例中,髓系抗原的表达率为56．4％,其中以CD13（32．7％）的表达最常见,其次为CD33（29．5％）、CD15（19．2％）和CD11b（7．7％）。CD13／CD33在CD34^＋病例中的表达高于CD34^＋病例。在B—ALL中,T系抗原CD4、CD5、CD7和CD2的表达率依次为6．3％、2．8％、1．9％和1．4％,并且CD7^＋、CD2^＋和CD4^＋病例通常共表达CDl3和（或）CD33。在T—ALL,B系抗原cCD79a、CD19和CD22的表达率分别为8．1％、6．8％、和2．8％,而全部CD19和CD22表达者均伴CD13／CD33表达。结论：ALL的跨系袁达多存在未成熟的阶段,以跨髓系抗原的表达最常见（B^＋M^＋,T^＋M^＋）,偶有B系、T系和髓系抗原的共表达（B^＋T^＋M^＋）,仅有B系和T系跨系表达的极少（B^＋T^＋M^-）。     

骨髓红系细胞凋亡、增殖及促红细胞生成素受体表达在恶性淋巴瘤贫血中的意义

目的　探讨骨髓红系凋亡、增殖状态及促红细胞生成素受体 (EPOR)表达在恶性淋巴瘤贫血发病机理中的意义。方法　以转铁蛋白受体 (CD71)和血型糖蛋白A(GPA)作为红系标志 ,采用流式细胞术检测骨髓红系细胞的凋亡率、增殖率及EPOR的表达。结果　恶性淋巴瘤骨髓红系CD+ 71细胞和GPA+ 细胞凋亡率明显高于正常对照组 ,差异具有非常显著意义 (4 4 .2 8± 2 4.5 2对 11.0 7± 7.16,P <0 .0 0 1和 47.79± 2 8.3 7对 11.3 5± 5 .98,P <0 .0 0 1) ;增殖率也明显高于正常对照组 (4 9.63± 3 1.68对 2 8.47± 13 .63 ,P <0 .0 5和 5 0 .63± 2 8.74对 2 9.5 9± 9.81,P <0 .0 5 ) ;EPOR表达的平均荧光强度 (MFI)低于正常对照组 ,但差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。CD+ 71细胞和GPA+ 细胞凋亡率与血红蛋白 (Hb)水平呈一定的负相关 (r =-0 .60 0 9,P <0 .0 5和r =-0 .612 2 ,P <0 .0 5 ) ;EPOR表达与Hb水平无明显相关。结论　红系细胞凋亡率增高可能同恶性淋巴瘤贫血的发病机制有关 ,红系的明显增殖可能是对凋亡的反馈调节。EPOR表达水平降低可能不是恶性淋巴瘤贫血发病的普遍机制。     

不稳定心绞痛患者CD4+CD25+调节性T细胞检测及意义

目的探讨不稳定性心绞痛患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)水平及意义。方法采用流式细胞分析法,检测13例不稳定性心绞痛患者、8例稳定性心绞痛患者和10例胸痛综合征患者外周血CD4 CD25 Treg占CD4 T细胞比例。结果不稳定性心绞痛患者外周血 Treg/CD4 T细胞比例(10．1±3．4％)显著低于稳定性心绞痛组(14．2±2．9％)和胸痛综合征组 (16．5±4．9％)。结论不稳定性心绞痛患者外周血Treg比例减少。Treg比例降低可能打破了外周免疫耐受,参与了动脉粥样硬化的发生发展。     

阿霉素纳米粒对白血病耐药细胞株K562/DOX耐药逆转作用的研究

目的　合成阿霉素聚氰基丙烯酸异丁酯纳米粒 ,观察其对阿霉素耐受性细胞株K5 6 2 (K5 6 2 /DOX)耐药性逆转效果并探讨可能机制。方法　采用乳液聚合法合成纳米粒 ,透射电镜观察计算粒径 ,分光光度法计算包封率 ;以梯度浓度的阿霉素纳米粒处理培养的K5 6 2 /DOX细胞 ,噻唑蓝比色法 (MTT)检测K5 6 2 /DOX细胞的半数生长抑制浓度 (IC50 )并计算逆转倍数 ;流式细胞术检测细胞内药物浓度 ;TUNEL法检测药物诱导后凋亡的发生及凋亡率。结果　阿霉素纳米粒平均粒径 (98 5± 3 7)nm ,包封率为 95 % ;MTT结果显示阿霉素纳米粒对K5 6 2 /DOX细胞的生长抑制率较单纯阿霉素显著增高 ,阿霉素纳米粒对K5 6 2 /DOX的耐药逆转倍数为 6 2 ;TUNEL检测经 10 μg/ml阿霉素纳米粒处理后的K5 6 2 /DOX平均凋亡率为 38 7%。结论　以聚氰基丙烯酸异丁酯纳米粒为载体的阿霉素可增强诱导K5 6 2 /DOX细胞凋亡的效率和有效逆转其耐药性。