神经元型一氧化氮合酶基因在脑震荡大鼠脑组织中的表达

背景：脑震荡是一种轻型颅脑损伤，因其客观指标较少，常为临床诊断和治疗带来难度。在基础研究方面，脑啡肽和多巴胺在其中的表达及其意义尚不清楚。目的：探讨神经元型一氧化氮合酶(neuron nitric oxide synthase，nNOS)在大鼠实验性脑震荡中的表达及意义。设计：随机对照实验研究。地点和对象：实验地点：解放军军事医学科学院放射医学研究所。健康Wistar雄性二级(清洁级)大鼠80只，军事医学科学院实验动物中心清洁级动物房饲养，水料任意，用于复制脑震荡动物模型，依致脑震荡所用砝码质量不同，随机分为对照组，50，100，200g组。主要观察指标：实验动物于伤后1，3，7，14及30d活杀取脑组织，经免疫组化和原位杂交等技术研究nNOS在脑震荡中的变化规律。结果：100g组见典型脑震荡的临床表现。其病理改变为脑血管扩张。脑组织瘀血、水肿，神经元变性、坏死，尼氏体减少甚至消失。nNOS蛋白和mRNA于伤后3d表达增强，7d达高峰，14d后开始减少，30d仍呈阳性表达。阳性部位见于大脑皮质、海马、丘脑和小脑神经元胞浆内。结论：脑震荡以血液循环障碍和实质细胞变性、坏死为主要病理改变；nNOS基因表达参与脑震荡发生时脑组织损伤的病理过程，可能对神经细胞变性、坏死起重要调节作用。     

高功率脉冲微波对心肌酶谱的影响

目的：研究高功率脉冲微波(high power pulse microwave，HPPM)辐照对心肌酶谱的影响。方法：以实验犬30只和离体培养原代乳鼠心肌细胞为对象，检测HPPM辐照后不同时间点动物血清和细胞培养液中天门冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶同工酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、羟丁酸脱氢酶和碱性磷酸酶活性的变化。结果：HPPM辐照后，出现以酶活性显著降低为主的心肌酶谱紊乱。实验犬以肌酸激酶的变化最为敏感，于辐照后6h～1个月[辐照后6，24h，3d，1，2周，1个月实验犬的肌酸激酶分别为(796．9&;#177;756．70)，(287．8&;#177;274．87)，(367．2&;#177;241．16)，(324．4&;#177;128．81)，(336．5&;#177;152．36)．(257．5&;#177;105．86)，(165．8&;#177;99．00)mmol／L]一直显著降低(t=2．67～4．77，P&;lt;0．01)；细胞培养液心肌酶多于辐照后0～1h下降到最低水平。24h时大多恢复到正常水平，48h时酶活性出现显著性增高。结论：HPPM辐照可明显影响实验动物和心肌细胞的心肌酶活性。     

在放射性肾损伤纤维性修复中的分子病理机制

目的为探讨纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)在放射性肾损伤纤维性修复中的作用和意义,揭示其发病的分子病理机制。方法24只雄性健康的Wistar大鼠以30Gy60Coγ线单次双肾局部照射,于照射后4个不同时相点活杀,取肾组织进行常规病理学观察及原位分子杂交,观察PAI-1mRNA表达的变化。结果纤维化的肾组织PAI-1表达较正常对照组增高,与纤维化程度呈正相关。结论PAI-1可能在肾放射性损伤后纤维性修复的发生及发展中起重要的作用。     

高功率微波辐射对大鼠脑内神经递质及全身儿茶酚胺代谢的影响

目的：观察高功率微波辐射对大鼠脑内氨基酸类神经递质及全身儿茶酚胺代谢的影响。 方法：实验于2004-09／12解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验病理研究室完成。选择6～8周二级雄性Wistar大鼠60只，随机抽签法分为假辐射组（n=10）和辐射组（n=50）。辐射组按照辐射剂量分为3mW／cm^2亚组（n=10）、10mW／cm^2亚组（n=20）、30mW／cm^2亚组（n=10）和100mW／cm^2亚组（n=10）。采用0，3，10，30和100mW／cm^2高功率微波辐射大鼠，于辐射后6h,1d和7d活杀取材，通过高效液相色谱仪检测大脑皮质、海马和丘脑中谷氨酸、天冬氨酸、1一氨基丁酸和甘氨酸4种氨基酸的含量以及尿中香草扁桃酸和高香草酸含量的变化。 结果：参加实验大鼠60只，均进入结果分析．①高功率微波辐射后6h大鼠不同脑区氨基酸类神经递质含量的变化：大脑皮质．10mW／cm^2组谷氨酸及卜氨基丁酸含量升高，谷氨酸／γ-氨基丁酸比值降低；海马3～100mW／cm^2组谷氨酸含量均显著降低丘脑中4种氨基酸含量无明显改变。②高功率微波10mW／cm^2辐射不同时间后大鼠不同脑区氨基酸类神经递质含量的变化：辐射后6h大脑皮质谷氨酸含量升高．1d后基本恢复正常；γ-氨基丁酸含量明显升高，1d后有昕恢复，7d时仍未恢复正常：谷氨酸/γ-氨基丁酸比值显著降低，1d后有所恢复．7d时仍未恢复正常。海马内谷氨酸含量明显降低：甘氨酸含量在辐射后6h明显降低，1d时基本恢复。丘脑氨基酸含量无明显改变。③高功率微波辐射后尿中儿茶酚胺代谢产物含量的变化：辐射后3d，10mW／cm^2组尿中香草扁桃酸含量显著升高，30和100mW／cm^2组显著降低；10mW／cm^2组尿中高香草酸含量于显著降低；而100mw／cm^2组显著升高. 结论：高功率微波辐射可引起大鼠氨基酸类和儿茶酚胺类神经递质代谢紊乱，大脑皮质和丘脑均可见主要兴奋性和抑制性氨基酸含量升高，二者比值下降，提示兴奋性氨基酸参与了大脑皮质和丘脑的早期损伤．而抑制性氨基酸则与其病变恢复有关，海马兴奋性氨基酸含量及谷氨酸／γ-氨基丁酸比值均降低．提示海马神经元的兴奋性降低，可能与学习记忆能力的降低密切相关。     

高功率微波辐射对大鼠脑内神经递质及全身儿茶酚胺代谢的影响

目的:观察高功率微波辐射对大鼠脑内氨基酸类神经递质及全身儿茶酚胺代谢的影响。方法:实验于2004-09/12解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所实验病理研究室完成。选择6～8周二级雄性Wistar大鼠60只,随机抽签法分为假辐射组(n=10)和辐射组(n=50)。辐射组按照辐射剂量分为3mW/cm2亚组(n=10)、10mW/cm2亚组(n=20)、30mW/cm2亚组(n=10)和100mW/cm2亚组(n=10)。采用0,3,10,30和100mW/cm2高功率微波辐射大鼠,于辐射后6h、1d和7d活杀取材,通过高效液相色谱仪检测大脑皮质、海马和丘脑中谷氨酸、天冬氨酸、γ-氨基丁酸和甘氨酸4种氨基酸的含量以及尿中香草扁桃酸和高香草酸含量的变化。结果:参加实验大鼠60只,均进入结果分析。①高功率微波辐射后6h大鼠不同脑区氨基酸类神经递质含量的变化:大脑皮质,10mW/cm2组谷氨酸及γ-氨基丁酸含量升高,谷氨酸/γ-氨基丁酸比值降低;海马3～100mW/cm2组谷氨酸含量均显著降低。丘脑中4种氨基酸含量无明显改变。②高功率微波10mW/cm2辐射不同时间后大鼠不同脑区氨基酸类神经递质含量的变化:辐射后6h大脑皮质谷氨酸含量升高,1d后基本恢复正常;γ-氨基丁酸含量明显升高,1d后有所恢复,7d时仍未恢复正常;谷氨酸/γ-氨基丁酸比值显著降低,1d后有所恢复,7d时仍未恢复正常。海马内谷氨酸含量明显降低;甘氨酸含量在辐射后6h明显降低,1d时基本恢复。丘脑氨基酸含量无明显改变。③高功率微波辐射后尿中儿茶酚胺代谢产物含量的变化:辐射后3d,10mW/cm2组尿中香草扁桃酸含量显著升高,30和100mW/cm2组显著降低;10mW/cm2组尿中高香草酸含量于显著降低;而100mW/cm2组显著升高。结论:高功率微波辐射可引起大鼠氨基酸类和儿茶酚胺类神经递质代谢紊乱,大脑皮质和丘脑均可见主要兴奋性和抑制性氨基酸含量升高,二者比值下降,提示兴奋性氨基酸参与了大脑皮质和丘脑的早期损伤,而抑制性氨基酸则与其病变恢复有关。海马兴奋性氨基酸含量及谷氨酸/γ-氨基丁酸比值均降低,提示海马神经元的兴奋性降低,可能与学习记忆能力的降低密切相关。     

不同波段电磁辐射致大鼠Sertoli细胞SOX9和WT1表达的影响

目的 探讨不同波段电磁辐射对大鼠睾丸支持细胞(Sertoli细胞)性别决定相关基因SOX9和WT1表达的影响。方法 原代分离3周Wistar大鼠的Sertoli细胞,应用WT1免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Sertoli细胞经平均功率密度为100 mW/cm²的S波段微波和X波段微波及场强6×10⁴ V/m的电磁脉冲辐射4 min。应用实时RT-PCR和Western blot方法,检测SOX9、WT1的mRNA和蛋白质的变化。结果 3种波段电磁辐射后Sertoli细胞SOX9 mRNA和蛋白表达在辐射后6和12 h及辐射后的6和24 h均见不同程度的降低(F=15.20和4.84, P<0.05;F=8.46和7.47,P<0.05);WT1 mRNA和蛋白表达在辐射后6和12 h及辐射后的24 h出现不同程度降低(F=13.46、5.08和10.26,P<0.05)。结论 3种波段电磁辐射后Sertoli细胞性别决定相关基因(SOX9、WT1)表达呈不同程度的降低。Sertoli细胞SOX9、WT1的变化可能参与了电磁辐射致生殖危害的病理生理过程。     

冲击复合伤大鼠对血气变化及病理形态学的影响和c-fos蛋白表达的研究

目的　探讨冲击波复合四氧化二氮 (N2 O4 )染毒致冲毒复合伤大鼠对血气变化及病理形态学的影响和c fos蛋白的表达及其意义。方法　采用Wistar大鼠复制冲击伤、N2 O4 中毒复合效应动物模型 ,于伤后 3,6 ,1 2 ,2 4 ,4 8及 72h活杀 ,进行主要器官病理形态学检查 ,血气分析并采用H&E及SP免疫组化技术观察肺组织损伤病变特点及c fos基因表达的变化。结果　三组动物PaO2 均在伤后 3～ 6h内显著下降 ,冲毒复合伤组动物伤后PaO2 下降最为显著。三组动物的主要病理形态学均有改变 ,以冲毒复合伤组的损伤最重 ;免疫组化显示c fos蛋白于冲击伤和N2 O4 组表达均明显增加 ,而于冲氮组表达持续呈强阳性。结论　N2 O4 冲毒复合伤对血气的影响极及显著。另外 ,三组动物的主要病理形态学均有改变 ,以冲毒复合伤组的损伤最重 ;结果表明c fos蛋白表达参与冲毒复合伤对肺损伤的加重过程     

亚急性微波辐射对大鼠精子运动参数及畸形率的影响

目的探讨亚急性微波辐射对雄性大鼠精子的影响。方法将90只成年清洁级雄性Wistar大鼠随机分为对照组和10、30 mW/cm2微波辐射组,每组30只。采用微波模拟源进行全身均匀辐射,15 min/次,5次/周,连续2周。于末次辐射后6 h和1、3、7、14、28 d检测附睾精子活率参数[包括前向运动(A+B级)、非前向运动(C级)和不动(D级)精子百分比],精子活力参数[包括运动的曲线速度(curvilinear velocity,VCL)、直线速度(straight-line velocity,VSL)、平均速度(average path velocity,VAP)和鞭打频率(beat/cross frequency,BCF),运动方式参数[包括线性指数(linearity,LIN)、直线指数(straightness,STR)、振动指数(wobble,WOB)、头部侧向运动平均振幅(amplitude of lateral head displacement,ALH)]。结果与对照组比较,各剂量微波辐射后大鼠AB级精子百分比明显下降,D和C级精子百分比明显增加,活力参数VCL、VSL、VAP和BCF明显下降,运动方式参数ALH明显降低,LIN、STR和WOB无明显变化,精子畸形率明显增加。结论亚急性微波辐射可引起大鼠精子活动力下降和精子畸形率增加,从而影响其生育力。     

微波辐射对大鼠大脑皮质突触体结构功能影响

目的探讨微波辐射对大鼠大脑皮质突触体及神经递质释放影响。方法采用30和50mW/cm2微波对大鼠大脑皮质突触体进行辐射;采用流式细胞仪和电子自旋共振仪检测辐射后突触体内Ca2+浓度和膜蛋白流动性;高效液相色谱仪和分光光度法检测氨基酸和乙酰胆碱递质释放量。结果 30mW/cm2微波辐射后突触体内Ca2+浓度为(36.96±1.01),明显高于对照组(P0.01);膜蛋白强弱固定化比为(0.278±0.022),高于对照组(P0.05);突触体谷氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸释放明显减少(P0.05或P0.01);50mW/cm2微波辐射后,突触体天门冬氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸释放明显增加(P0.05或P0.01);辐射后突触体乙酰胆碱释放明显增加(P0.01)。结论微波辐射可引起大脑皮质突触体结构和功能损伤,氨基酸和乙酰胆碱递质释放量发生变化。