石蜡组织提取DNA 4种方法的比较

目前，从石蜡包埋组织中提取DNA在数量和质量上都不能令人满意^[1]。而按常规酚一氯仿法抽提DNA，过程长，有毒性，用于PCR扩增，成功率较低。我们应用4种不同方法从石蜡包埋人胃癌组织中提取DNA，用于PCR扩增，从中摸索出一个简便，经济，实用的方法，现报道如下。     

CD151在原发性肝细胞癌中的表达及其意义

CD151是最早发现与肿瘤转移呈正相关的四跨膜蛋白,是四跨膜网络形成最为关键的分子之一[1].迄今已在胃癌、前列腺癌、肺癌的研究中均发现其过表达与肿瘤的转移与复发有关[2-5],但在肝癌中的表达情况鲜见报道.我们通过检测原发性肝细胞癌、癌旁与正常肝脏组织中CD151蛋白及mRNA的表达情况并分析其与肝癌临床病理学因素间的关系,对CD151在原发性肝细胞癌的侵袭与转移中的作用作进行了初步探讨.     

CD5和CD43在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及与预后的关系

目的：探讨CD5和CD43与弥漫大B细胞淋巴瘤（ DLBCL）（非特指）临床病理特征及预后的关系。方法收集DLBCL（非特指）病例81例,应用免疫组化染色方法检测CD20、CD3、CD5、CD43、CD10、Bcl－6、Mum－1和Ki－67在该组淋巴瘤中的表达,同时分析CD5和CD43表达与DLBCL临床病理特征及预后的关系。结果本组81例DLBCL病例中,CD5阳性表达7例（8.64％）,CD43阳性表达26例（32.01％）,CD5和CD43同时阳性表达6例（7.41％）,CD5和CD43均为阴性54例（66.67％）,两者表达呈正相关（r＝0.353,P＜0.05）。 CD5表达与年龄、性别、临床分期、B症状、免疫表型分型（ Hans分型）、部位和是否乙型肝炎病毒（ HBV）感染无关;CD43表达与免疫表型分型和HBV感染相关,而与年龄、性别、临床分期、B症状和部位无关。 CD5阳性DLBCL患者的EFS和OS显著低于CD5阴性者;CD43阳性DLBCL患者的EFS和OS显著低于CD43阴性者。 Cox回归分析结果显示,除临分期外,年龄、性别、部位、B症状、免疫表型分型和HBV感染情况对患者生存期均无影响。结论 CD5、CD43和临床分期与DLBCL预后有关。     

73例胃肠道梭形细胞肿瘤临床病理及免疫组化分析

目的研究胃肠道梭形细胞肿瘤的免疫组化及临床病理特征。方法用免疫组化S—P法检测CD117、CD34、Vimentin、S-100、actin（平）蛋白在肿瘤中的表达。结果73例胃肠道梭形细胞肿瘤中潜在、低度、中度及高度危险病例数分别为6例、34例、21例及12例；诊断胃肠道间质瘤60例，平滑肌源性肿瘤8例，神经源性肿瘤3例。侵袭行为危险程度与胃肠道梭形细胞肿瘤的发生部位相关（P〈0．05）。结论对胃肠道梭形细胞肿瘤进行分类诊断时，最好联合使用多项免疫组化指标。     

二烯丙基二硫对人结肠癌HT-29细胞周期的阻滞作用

[目的]探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌HT-29细胞周期的阻滞作用及其分子机制.[方法]应用MTF法及细胞计数法测量HT-29细胞生长抑制,流式细胞术检测细胞时相分布,免疫细胞法测定p21、C-myc、Cyclin E表达.[结果]MTT法显示,不同浓度DADS作用HT-29细胞12、24、48h后,细胞生长抑制率及细胞群体倍增时间呈浓度、时间依赖性增加.流式细胞仪分析,30、60pmol/LL DADS阻滞HT29细胞在G1期,与对照组相比,可使G1期细胞增加约2倍,而90、120μmol/L DADS显著地将细胞阻滞在G2/M期.免疫细胞化学分析表明在细胞周期阻滞的同时有p21wafl蛋白表达上调,Cyclin E、C-myc蛋白表达下降.[结论]DADS对HT-29细胞的抑制增殖作用可能与细胞周期阻滞有关,DADS对HT-29细胞周期阻滞的分子机制可能与调节p21wafl、Cyclin E、C-myc表达相关.     

二烯丙基三硫诱导人胃癌细胞凋亡与活性氧之间的关系

目的:探讨二烯丙基三硫(diallytrisulfide,DATS)诱导人胃癌细胞系MGC-803凋亡与细胞内活性氧(re-activeoxygenspecies,ROS)之间的关系。方法:用12mg/L的DATS作用于体外培养的MGC-803细胞24h后,用流式细胞术检测凋亡率及细胞内活性氧水平。结果:12mg/LDATS作用于MGC-803细胞24h后,细胞凋亡率明显上升;细胞内活性氧水平与DATS呈浓度依赖性升高。用抗氧化剂NAC预处理细胞,能抑制细胞内活性氧水平的升高及DATS诱导的细胞凋亡。结论:DATS诱导胃癌细胞凋亡与细胞内活性氧产生增加有关。     

溶脂法在胃癌淋巴结及腹膜转移检测中的意义

目的:探讨溶脂法在胃癌淋巴结及腹膜转移检测中的意义。方法:分别采用常规法和溶脂法检测30例胃癌根治性手术标本的淋巴结和转移癌结节,并对2种方法的检测结果进行比较。结果:常规法+溶脂法检出的淋巴结数、淋巴结转移癌数、直径≤5 mm的淋巴结数及直径≤5 mm的淋巴结转移癌数均明显多于常规法(P<0.05~0.01);溶脂法检出的淋巴结中直径≤5 mm的淋巴结占96.8%,淋巴结转移癌中直径≤5 mm的淋巴结占93.9%;溶脂法检出腹膜种植性转移癌结节3例;8例TNM分期发生变更。结论:溶脂法是检测胃癌淋巴结转移和腹膜种植性转移比较全面而可靠的方法。     

POLD1基因突变及蛋白表达在胃癌组织中的临床意义北大核心

目的:观察DNA聚合酶δ(polymerase data, Polδ)的催化亚基p125与胃癌细胞恶性增殖的关系,并探讨p125的编码基因POLD1与胃癌发生、发展的关系。方法:采用免疫组化法检测胃癌组织及癌旁组织中p125的表达;沉默胃癌细胞中POLD1基因,用MTT实验检测POLD1基因沉默前后胃癌细胞的增殖速率。采用Sanger测序法对胃癌细胞株MGC-803中POLD1基因cDNA进行测序。结果:免疫组化结果显示,胃癌组织中p125表达明显高于癌旁组织。MTT实验结果显示,POLD1基因沉默的胃癌细胞生长速率明显低于对照组细胞。Sanger测序结果显示,胃癌细胞中POLD1基因cDNA的碱基序列发生了4处点突变,1个碱基插入,1个碱基缺失。结论:p125高表达与胃癌细胞恶性增殖相关;胃癌细胞中POLD1基因cDNA碱基序列发生点突变、碱基插入从而引起其氨基酸序列改变,这有可能是导致胃癌细胞中p125高表达并引起癌细胞恶性增殖的分子机制之一。     

MicroRNA-29c表达与胃癌临床病理特征的关系研究

目的：探讨miR-29c的表达与胃癌临床病理特征之间的关系，预测miR-29c靶基因生物学功能。方法：从癌症基因组图谱（TCGA）数据库下载胃癌微小RNA表达及临床数据，分析miR-29c在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达情况。收集胃癌及正常组织石蜡标本，制作成组织芯片，使用miRNAscope技术检测miR-29c在胃癌及正常组织中的表达情况，通过卡方检验分析miR-29c表达与胃癌临床病理特征的关系。TargetScan、Pictar、miRTarbase和Starbase数据库预测miR-29c的靶基因，并对潜在靶基因进行富集分析。结果：TCGA数据分析显示，与正常组织相比（n=41）,miR-29c在胃癌组织（n=434）中表达显著下调（P<0.001）。miRNAscope检测结果显示，与正常组织相比，miR-29c在胃癌组织中表达下调（P<0.001），其表达水平与胃癌患者TNM分期、淋巴结转移、组织学分型显著相关（P<0.05）。数据库预测得到18个潜在靶基因，主要富集在DNA甲基化转移酶活性等生物学功能，以及癌症相关miRNAs等信号通路。结论：miR-2...     

cdx1、cdx2在结肠癌中的研究进展

近年来研究结肠癌增生，分化的分子机制成为热点。cdx1、cdx2是控制果蝇尾部形态的一种同源异型基因，在人类结肠中呈特异性表达，并调节结肠上皮细胞增生、分化，在结肠癌的发生发展中发挥着重要的作用。本文综述近年来有关cdx1、cdx2在结肠癌中作用的研究进展。