实时RT-PCR方法和快速抗原检测方法(Dot-Elisa)检测甲型流感的比较

目的探讨实时逆转录聚合酶链扩增反应（real-time RT-PCR）和快速抗原检测方法（Dot-Elisa）在检测甲型流感中的应用。方法随机选择2009年5～10月在我院门诊就诊的318例流感样症状病例,采集咽拭子标本。采用real-time RT-PCR和Dot-Elisa同时检测咽拭子标本的甲型流感病毒核酸或甲型流感病毒抗原。结果在318例流感样病例中,real-time RT-PCR方法检测152例（47.8%）为甲型流感患者,其中118例（37.1%）为甲型H1N1流感（2009）,34例（10.7%）为普通甲型流感。快速抗原检测方法检测113例患者为甲型流感患者。与real-time RT-PCR方法比较,快速抗原检测方法检测甲型流感的敏感性为61.8%,特异性为88.5%,阳性预测值PPV为83.2%,阴性预测值为71.7%,总符合率为75.8%,一致性KAPPA检验κ=0.509（P〈0.01）。采用两种不同方法检测甲型流感阳性率的差异不受患者病程、年龄的影响（P均﹥0.05）。Ct值≤35的标本其抗原阳性检测率大于Ct值在35～37之间的抗原阳性率（U=0.00,P〈0.01）。结论快速抗原检测方法检测甲型流感的敏感性低于real-timeRT-PCR方法,其敏感性可能受标本的病毒量影响。     

抗SSA和抗SSB抗体在肝病患者的检测及临床意义

目的探讨抗SSA、抗SSB在肝病患者的临床意义。方法对143例抗SSA和(或)抗SSB抗体阳性的肝病患者自身抗体的检出情况及其与疾病的关系进行回顾性分析。结果 143例患者中,126例(88.1%)单一抗SSA阳性,3例(2.1%)单一抗SSB阳性,14例(9.8%)抗SSA、抗SSB均阳性;抗SSA的阳性率显著高于抗SSB(掊2=143,P0.05)。140例抗SSA阳性患者中,79例(56.4%)抗Ro52阳性,33例(23.6%)抗Ro60阳性,28例(20.0%)两者均阳性。本组患者中,126例(88.1%)抗核抗体(ANA)阳性,ANA滴度为1:320～1:1000和1:100的患者分别为102例(71.3%)、24例(16.8%),差异具有统计学意义(掊2=113.99,P0.05);17例(11.9%)患者ANA阴性,且均为单一抗SSA阳性者。抗SSA、抗SSB阳性主要见于原发性胆汁性肝硬化(61例,42.7%)、药物性肝损害(22例,15.4%)、自身免疫性肝炎(20例,14.0%)、慢性丙型肝炎(20例,14.0%)和慢性乙型肝炎(15例,10.5%)。143例患者中,13例(9.1%)合并干燥综合征。结论抗SSA和(或)抗SSB不仅见于干燥综合征、原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性肝炎等自身免疫性疾病中,还可见于药物性肝损害、病毒性肝炎等非自身免疫性疾病中,提示在肝病患者中出现抗SSA和(或)抗SSB抗体阳性时,应综合考虑其是否合并干燥综合征等结缔组织病,并密切随访,避免误诊漏诊。     

不同年龄组自身免疫性肝炎患者的临床特征分析

目的分析并比较不同年龄组自身免疫性肝炎（AIH）患者的临床特征、生化指标、免疫学指标和病理特点。方法 98例AIH患者按年龄分为青年（〈45岁）、中年（45～60岁）和老年（〉60岁）三组,回顾性比较三组患者临床特征、生化指标、免疫学指标、自身抗体和病理特点。结果老年组有并发症者显著高于青年组（50%vs 20%,P〈0.05）,其中,老年组肝硬化比例高于青年组（40.6%vs 5.7%,P〈0.05）。老年组TBil水平显著高于青年组,差异有统计学意义（P〈0.05）。中、老年组血清C4水平显著低于青年组（P〈0.05）;而lgG、lgM、lgA、C3水平差异无统计学意义。老年组抗核抗体（ANA）阳性率显著高于青年组（100%vs77.1%,P〈0.05）;青年组抗平滑肌抗体（SMA）阳性率显著高于老年组（31.4%vs 6.3%,P〈0.05）。中、老年组肝组织学界面炎比例显著高于青年组（88.5%、100%vs 51.8%,P〈0.05）;肝组织学炎症活动度评分（HAI）比较,中、老年组HAI高于靑年组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论老年AIH患者在发病时肝硬化发生率高、肝病相关并发症比例高,肝脏炎症活动较重。     

PDCA循环管理在自身抗体检验后阶段质量保证中的应用及体会

近年,国内一些三甲医院陆续开展了质量管理认证工作,全面质量管理理念逐步被管理者接受。PDCA循环作为全面质量管理的基本方法,其过程就是制订质量计划并组织实施,将搜集的大量数据资料综合运用到各个管理环节,周而复始,不停顿地运转,最终达到质量持续改进的目的。本文探索了将PDCA循环管理方法应用于自身抗体检验后的质量控制环节,通过计划、实施、检查及总结改进,不提升检验后质量。运用PDCA循环管理后,自身抗体检测的质量意识进一步加强,自身抗体检测能力和实验室管理水平进一步提升,质量持续改进效果显著。     

自身免疫性肝炎患者抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体的检测及意义

目的评价血清抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(抗-SLA/LP)在自身免疫性肝炎(AIH)的诊断价值。方法收集40例AIH患者和69例对照组血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫印迹法(WB)检测抗-SLA/LP,比较其检测结果;分析抗-SLA/LP阳性组与阴性组临床和实验室指标的差异。结果 40例AIH患者中12例抗-SLA/LP阳性,对照组均为阴性。ELISA法和WB法的符合率为100%。抗-SLA/LP阳性的AIH患者均为女性,平均年龄明显高于阴性组[(60.92±11.97)岁vs.(48.25±10.40)岁,P=0.002]。抗-SLA/LP阳性组丙氨酸氨基转移酶为(83.91±58.05)U/L、天冬氨酸氨基转移酶为(97.83±57.52)U/L,明显低于抗-SLA/LP阴性组的(367.96±415.48)U/L和(275.52±317.00)U/L(P=0.001,P=0.008)。两组中均有其他自身抗体,但抗-SMA只在抗-SLA/LP阴性组中检测到。结论抗-SLA/LP对AIH的诊断具有高度特异性,抗-SLA/LP在老年女性患者多见。     

抗着丝点抗体在肝病患者中的检测及其意义

目的探讨抗着丝点抗体(ACA)的肝功异常患者中出现的频率、特点及其临床意义。方法对10000例肝功异常患者采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(SMA)和抗细胞骨架抗体等,并采用免疫印迹法检测抗着丝点抗体及其它抗可提取的核抗原(antextractablen2uclearantigens,ENA)抗体。结果 (1)10000例肝功异常患者中,间接免疫荧光法筛选结果显示抗核抗体阳性,着丝点型的患者为134例,占1.34%。其中滴度1∶100的占35.8%;滴度1∶320的占40.3%;滴度大于等于1∶1000的占23.9%。滴度大于等于1:320的患者再免疫印迹法检测,抗着丝点抗体均为阳性。部分患者伴有其他核型的抗核抗体以及抗线粒体抗体等自身抗体。(2)134例ACA阳性患者,诊断为硬化型肝病的有83例,包括PBC、PBC和AIH重叠症、肝炎肝硬化以及原发性肝癌硬化型。诊断为非硬化型肝病的有51例,包括病毒性乙型肝炎、自身免疫性肝炎、药物性肝炎和病毒性丙型肝炎等。抗着丝点抗体高滴度组患者的肝硬化发生率明显高于低滴度组。(3)分析高滴度组(滴度大于等于1∶320)和低滴度组(滴度1∶100)组的实验室检查结果发现,ACA高滴度组AST/ALT比值明显高于低滴度组,ALB和PA明显低于低滴度组,IgM的含量也高于低滴度组,两组间的差别有统计学意义。结论肝病患者中,抗着丝点抗体并不少见,高滴度的抗着丝点抗体更见于各种原因引起的肝硬化患者。     

ROC曲线对原发性胆汁性肝硬化患者预后诊断阈值的确定及意义

目的采用受试者工作特征(ROC)曲线确定原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者生存预后诊断阈值并评价其临床意义。方法以2001年10月至2009年9月北京佑安医院收治的155例确诊PBC患者为研究对象,进行随访,随访终点事件为死亡和(或)进行肝移植。对患者临床资料进行分析,符合正态分布的定量资料采用独立样本t检验,偏态分布的定量资料采用Wilcoxon秩和检验;计数资料采用χ2检验;偏态分布定量资料或分类变量资料采用Spearman秩相关分析法。采用ROC曲线确定预后诊断指标及阈值,采用Kaplan-Meier法进行组间生存率,评价临床意义。结果随访中位时间为50个月(6~316个月),36例患者出现终点事件(33例患者死亡,3例患者进行了肝移植)。年龄≥55岁、TBil1.8 mg/dl、血清总IgG17.2 g/L、Mayo评分(MRS)6.11对肝硬化阶段PBC患者具有预后诊断价值;4项指标作联合分析,串联的特异度可达99.18%,灵敏度为5.56%,总符合率为79.23%;并联时,其灵敏度可达100%,特异度为24.51%,总符合率为40.77%;对年龄≥55岁组,TBil1.8 mg/dl组,IgG17.2g/L组,MRS6.11组分别与其对照组进行组间生存率比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论年龄≥55岁、TBil1.8 mg/dl、IgG17.2 g/L、MRS6.11可能对肝硬化阶段PBC患者生存预后具有预测价值。     

应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法研究原发性胆汁性肝硬化的血清多肽谱

目的应用弱阳离子交换磁珠提取多肽结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统(MALDI-TOF-MS)分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的血清多肽谱,寻找具有潜在意义的血清标志物。方法收集105例血清样本,包括55例PBC患者、25例其他肝病患者和25例正常对照者血清样本,经弱阳离子交换磁珠纯化,MALDI-TOF-MS分析及ClinProTools生物信息学方法研究其血清多肽表达谱。结果在质荷比(m/z)1000～10 000 Da的范围内3组间共检测到158个血清多肽峰,其中83个有统计学意义(P<0.001),在PBC中表达上调的多肽有31个,表达下调的多肽有52个。组合m/z 1062.47、5356.13、4268.63、846.18、1945.31和6649.53Da 6个峰建立多肽诊断指纹图谱模型,该模型盲样验证的准确率在PBC组、正常对照组和其他肝病组分别为100%、81.8%和72.7%。结论可以利用MALDI-TOF-MS技术和ClinProTools软件来筛选PBC血清标志物,其在PBC诊断方面具有一定的价值。