流感病毒抗原快速检测与real-time RT PCR的比较

目的介绍一种可同时检测甲型、乙型流感病毒的快速方法,便于及早确诊流感病原体。方法采用快速抗原法对2014年1月—2015年12月收集的632份流感样患者标本进行甲型、乙型流感病毒抗原检测,并对其中102份进行real-time RT PCR检测。结果快速抗原法检测到样本中甲型流感病毒阳性14例,乙型流感病毒阳性10例。real-time RT PCR法检测到甲型流感病毒阳性15例,乙型流感病毒阳性12例。快速抗原法针对甲型流感病毒诊断灵敏度93.3%,特异度100.0%;针对乙型流感病毒,诊断灵敏度83.3%,特异度100.0%,耗时15 min,明显少于real-time RTPCR法的3 h。结论采用快速抗原法可及早筛查甲型、乙型流感标本。     

新型快速流行性感冒病毒抗原检测方法免疫荧光法在流行性感冒筛查中的应用价值研究

背景　与核酸检测相比,传统快速流行性感冒（流感）病毒抗原检测方法灵敏度偏低,因此需要探索新的流感快速检测方法。目的　探讨免疫荧光法流感病毒抗原检测在流感筛查中的临床应用价值。方法　分别于2017年7-12月、2019年1-2月选取北京大学第三医院感染疾病科发热门诊收治的患者472例,采集其鼻咽拭子。采用免疫荧光法流感病毒抗原检测试剂盒读取仪器（简称Sofia）和传统快速流感抗原检测方法（免疫渗滤法和胶体金法）、流感病毒核酸检测实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）进行病原学检测。结果　472例患者采用RT-PCR方法共检出甲型/乙型流感292例（61.9%）,其中甲型流感195例（41.3%）,乙型流感94例（19.9%）,另有3例同时检出甲型流感和乙型流感。472例患者采用免疫荧光法共检出甲型/乙型流感262例（55.5%）,其中甲型流感169例（35.8%）,乙型流感93例（19.7%）。以RT-PCR方法为金标准,免疫荧光法、免疫渗滤法、胶体金法检测甲型/乙型流感的灵敏度依次为89.0%、82.9%、84.6%,特异度依次为98.9%、97.2%、93.3%;免疫荧光法、免疫渗滤法、胶体金法检测甲型流感的灵敏度依次为85.4%、79.3%、79.3%,特异度依次为100.0%、99.3%、97.1%;免疫荧光法、免疫渗滤法、胶体金法检测乙型流感的灵敏度依次为93.8%、87.6%、89.7%,特异度依次为99.5%、99.2%、97.3%。以RT-PCR方法为金标准,免疫荧光法对甲型H1流感、甲型H3流感、乙型流感的检出阳性符合率分别为91.8%（56/61）、84.7%（111/131）、94.8%（91/96）。16~20岁、21~40岁、41~60岁、>60岁患者中,免疫荧光法对甲型/乙型流感检测的灵敏度依次为95.6%、90.2%、87.2%、78.4%,特异度依次为100.0%、98.2%、100.0%、100.0%。结论　与传统快速流感病毒抗原检测方法比较,免疫荧光法在甲型/乙型流感的检测中表现出更高的灵敏度,在流感筛查中有一定应用前景。     

新型甲型H_1N_1流感检测方法的临床观察

目的:研究并探讨新型甲型H1N1流感病毒使用RNA荧光定量来检测的的方法,以及观察使用RNA荧光定量来检测是否具有临床的可行性以及安全性。方法:选取流感患者80例为研究对象。,所有患者都自愿接受调查并服从所有准则,有30例中鼻咽拭子混悬液患者,有28例咽拭子患者,有22例鼻拭子患者,收集的时间以患者去就诊的时间为标准,荧光定量PRC法是用来检测甲型H1N1流感病毒RNA,与此同时对这80例流感患者还要经常做季节性的流感病毒的检测。结果:B型流感病毒患者的人数为45例;其他流感有35例,占44%。根据取材方法来说,鼻咽拭子混悬液的阳性比重是68%,咽拭子所占的阳性比重为47%,鼻拭子所占的阳性比重为39%。结论:在检测新型甲型H1N1流感过程中,所取的材料应尽可能采取鼻拭子混悬液,同时要注意的是:采集样本的时间越早阳性率所占的比重越高。使用RNA荧光定量来检测更具有临床的可行性以及安全性。     

2021―2022年海口市某哨点医院儿童流行性感冒的流行病学特征分析

目的 分析海口市某哨点医院儿童流行性感冒（简称流感）的流行病学特征,了解流感优势病毒株,为流感防治提供科学依据。方法 收集2021年10月—2022年9月海南省海口市流感监测哨点海南省妇女儿童医学中心的儿童流感样病例（influenza like illness,ILI）资料并采集患者发病早期的鼻咽拭子标本,用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,real-time qRT-PCR）检测样本中流感病毒核酸,以流感监测年度为周期对监测ILI病例数、年龄、发病季节以及流感病毒核酸阳性结果进行描述性分析。结果 共采集ILI咽拭子标本3 670份,流感病毒核酸阳性498份,阳性率为13.57%,其中甲型H3N2流感占56.22%(280/498),其次为乙型流感占37.35%(186/498),甲型H1N1流感占比最低,为6.43%(32/498)。各年龄组儿童均可发病,其中流感病毒阳性检出率以3～<6岁年龄组为最高（144/853,16.88%）;其次为1～<3岁年龄组（152/929,1...     

定量实时PCR技术快速检测甲型H1N1流感病毒

目的:对采集来的疑似甲型H1N1流感患者咽拭标本进行核酸检测,不断摸索快速检测流感的PCR方法。方法:实验方法按照WHO标准的实时PCR(Real-time PCR)检测法操作,选取343份疑似甲型H1N1流感咽拭子采用实时定量核酸检测和快速分型。结果:在343份咽拭子标本检测结果中,甲型H1N1流感病毒核酸阳性为52份,阳性率15.16%,乙型流感病毒阳性11份,甲3型流感病毒阳性13份,甲1型流感病毒未检出。结论:实时PCR技术操作方法简便、耗时短、特异性强、灵敏度高,是一种适合应用于甲型H1N1流感病毒可靠、快速诊断的检测方法。     

2009年海南省甲型H1N1流感病毒核酸检测结果

目的及时了解海南省2009年流感样病例及其密切接触者中甲型H1N1流感病毒感染情况。方法应用实时荧光定量PCR法对呼吸道鼻咽拭子标本中的流感病毒核酸进行定性检测。结果全年共检测哨点监测和爆发疫情标本1 148份,荧光定量PCR法检测结果：流感病毒A型核酸阳性为686份,B型核酸阳性为7份。流感样病例中流行型别以A型为主,占59.6%;A型中甲型H1N1流感病毒核酸阳性为500例,占72.9%（500/686）,其中学生占84.8%（424/500）。10月-11月份达到流行高峰。随机抽取30份核酸阳性标本进行核酸序列测定,27份为甲型H1N1流感病毒。结论 2009年海南省流感样病例中甲型H1N1流感病毒感染主要以学生为主,开展流感病毒核酸检测,有助于尽早了解流感样病例中流感病毒感染情况,为及时了解甲型H1N1流感疫情的动态变化以及制定科学有效的甲型H1N1流感防控策略提供可靠的实验室依据。     

甲型H1N1流感大流行期早期临床诊断的研究

目的:观察甲型H1N1流感大流行期早期临床诊断的问题。方法:在具有流感样症状的甲型流感病毒抗原检测阳性的患者200例中,按体温以38.0℃为界限分为两组,每组随机选择30例,采样送咸阳市疾控中心用RT-PCR(反转录聚合酶链反应)的方法行甲型H1N1流感的病毒核酸检测。结果:体温在38.0℃以上组甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性率100%,体温在38.0℃以下组甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性率30%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:具有流感样症状的患者,甲型流感病毒抗原检测阳性加上体温在38.0℃以上可以作为大流行期甲型H1N1流感临床诊断,尽快采用奥司他韦进行抗病毒治疗,值得推广应用。     

2009～2010年深圳市福田区甲型H1N1流感病毒监测分析

目的检测深圳市福田区2009-2010年流感监测样本,分析甲型H1N1流感病毒的流行病学特点。方法采用实时荧光定量（Real Time RT-PCR）进行核酸检测和型别鉴定,同时进行病毒分离和血凝实验。结果 2009年8月-2010年12月共检测467份咽拭子样品,核酸检测阳性129份,阳性率为27.62%;病毒分离毒株101株,阳性率为21.63%。结论在2009年8月份甲型H1N1流感开始流行并成为流行的优势毒株,并持续到2010年3月份;5～59年龄人群甲型H1N1流感病毒分离率较高,而5岁以下及≥60岁年龄组分离率反而较低。     

甲型和乙型流感病毒抗原检测新方法

目的寻找一种更加简便的方法来定性检测流感病毒抗原阳性细胞。方法设计流式的方法来检测甲型流感病毒(IA)和乙型流感病毒(IB)抗原阳性细胞。采用2种荧光素标记抗体进行流式标记鼻咽拭子的上皮细胞,对157份鼻咽拭子进行甲型和乙型流感病毒抗原检测。结果 157例样本中,直接免疫荧光法检测到甲型流感病毒阳性44例,乙型流感病毒阳性35例,流式法检测到甲型流感病毒阳性39例,乙型流感病毒阳性29例,两种方法检测甲型和乙型流感病毒的阳性率差异无统计学意义(P0.05)。两种方法检测IA的阳性与阴性总符合率为93.0%,阳性率差异无统计学意义(P0.05),一致性系数检验κ=0.820,提示两种检测方法一致性较强且有统计学意义(P0.05)。两种方法检测IB的阳性与阴性总符合率89.8%,阳性率差异无统计学意义(P0.05),一致性系数检验κ=0.687,两种检测方法一致性基本满意且有统计学意义(P0.05)。结论采用流式法可及早快速筛查甲型、乙型流感标本,操作步骤简便,只需不到2 h就可完成检测,可以推广应用。     

2017-2019年西安市某三甲医院甲型流行性感冒病毒检测结果与分布特征分析

目的:分析西安市某三甲医院流感疑似病例流感病毒检测结果,了解该地区甲型流感流行特征和病原学情况,为流感早期诊治及防控工作提供参考依据。方法:对2017-2019年就诊于本院的3904例流感疑似病例,采集患者咽拭子标本,用甲型流感抗原检测试剂盒(胶体金法)进行甲型流感病毒快速检测,同时应用Real-time RT-PCR进行流感病毒核酸检测,运用SPSS 19.0软件对检测结果进行统计分析;然后收集确诊为甲型流感患者的基本信息及病原学监测资料,运用描述性流行病学方法进行分析。结果:共检出甲型流感病毒阳性患者1229例,其中男性679例,检出率为30.93%;女性550例,检出率为32.18%;不同性别之间检出率比较差异无统计学意义(χ~2=2.74,P>0.05)。甲型流感确诊患者以青、中年为主,分别占39%、33%;流感高发时间为每年的1、2月及12月,近年来,本院2019年1月确诊患者最多约占48%;确诊患者分布科室以发热门诊、急诊科、呼吸内科门诊、儿科等居多,依次为31.24%、30.01%、6.51%、4.31%。纳入的3904例流感疑似病例,Real-time RT-PCR法检测病毒RNA阳性率为31.48%(1229/3904),胶体金法检测病毒抗原阳性率为14.16%(553/3904),两组阳性率比较差异有统计学意义(χ~2=332.30,P<0.001)。结论:本地区甲型流感的分布呈现出一些新的特征,需要采取针对性措施,应对甲流患者集中分布科室设置隔离屏障,避免院内交叉感染。胶体金法检测速度快,但对早期感染患者检测效果欠佳,可进一步行甲流病毒核酸检测。     

1起甲型H1N1流感暴发疫情的调查分析

目的调查分析1起学校甲型H1N1流感暴发的原因和规律,为制订甲型H1N1流感防控措施提供科学依据。方法按照《甲型H1N1流感诊疗方案(2009年试行版第二版)》对病例进行诊断,采用个案调查表对病例进行流行病学调查,并进行描述性分析。结果 70例流感样病例中,首发病例发病时间为9月1日,发病高峰为9月2～4日,分别为14例、9例、9例。首发病例未及时报告与处理和人群普遍易感是导致此次疫情的主要原因。结论加强甲型H1N1流感疫情监测工作,及时隔离病人,积极开展健康教育和易感人群的免疫接种,可预防和控制甲型H1N1流感疫情的发生和流行。     

成人社区获得性肺炎合并呼吸道病毒感染住院患者病毒谱及临床特征分析

背景　成人社区获得性肺炎（CAP）合并呼吸道病毒感染与单纯CAP在临床治疗上是否存在差异尚不清楚。本研究拟从分析CAP合并呼吸道病毒感染病毒谱和临床特征与单纯CAP的差异来探讨此问题。目的　分析成人CAP合并呼吸道病毒感染患者的病毒谱特点及其临床特征。方法　选取2017年6月-2019年5月复旦大学附属上海市第五人民医院住院部收治的CAP患者223例,采集CAP患者的咽拭子,应用多重巢式反转录酶-聚合酶链式反应（nested multiplex RT-PCR）检测8种（10型）常见的呼吸道病毒。将CAP患者分为病毒阳性组和病毒阴性组,分析病毒阳性组CAP患者的临床特征。同时,采集病毒阳性、病毒阴性CAP患者及社区健康对照者的血清各24份,采用ELISA检测血清中白介素（IL）-6、IL-8、IL-10、干扰素（INF）-γ、干扰素诱导蛋白（IP）-10、肿瘤坏死因子（TNF）-α的浓度。结果　223例CAP患者中61例（27.35%）患者病毒检测阳性,其中单病毒感染58例（26.01%）,多病毒感染3例。单病毒感染包括22例（9.87%）流感病毒A（Flu A）、14例（6.28%）鼻病毒（RhV）、9例（4.03%）流感病毒B（Flu B）、5例（2.24%）腺病毒（ADV）、2例（0.90%）冠状病毒（CoV）、2例（0.90%）呼吸道合胞病毒A（RSVA）、2例（0.90%）偏肺病毒（MPV）、1例（0.45%）博卡病毒（BoV）、1例（0.45%）呼吸道合胞体病毒B型（RSVB）。根据年龄分为非老年（≤65岁）组和老年（>65岁）组,两组病毒检出率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。CAP患者四季均会有病毒感染,冬季为高发季节,感染病毒主要有Flu A、RhV、Flu B。按照呼吸道病毒检测结果分为病毒阳性组和阴性组,病毒阳性组死亡率高于阴性组,差异有统计学意义（P<0.05）,其中病毒阳性组死亡患者均为合并流感病毒感染。进一步将呼吸道病毒阳性组分为流感组（包括Flu A和Flu B）和非流感组,发现流感组乳酸脱氢酶水平高于非流感组,流感组死亡率高于病毒阴性组（P<0.05）。影像学特征分析结果显示,病毒阳性组双肺病变、多肺叶病变、斑片状渗出影比例高于病毒阴性组,差异均有统计学意义（P<0.05）。血清细胞因子水平分析结果显示,病毒阳性组IL-10水平高于病毒阴性组。结论　上海闵行地区CAP患者合并呼吸道病毒感染较为常见,检出病毒以Flu A、RhV和Flu B为主,其临床特征无明显差异,合并流感病毒感染可能会导致死亡率增加,病毒阳性患者影像学多表现为双肺病变、多肺叶病变、斑片状渗出影,病毒阳性患者IL-10血清浓度明显升高,以上结果对于CAP合并呼吸道病毒感染有一定的参考价值。     

发热与不发热呼吸道疾病成人患者流感的检测

目的应用快速筛查法对发热及不发热的成人呼吸道疾病患者的甲型流感病毒(Flu A)、乙型流感病毒(Flu B)进行检测并结果分析,以了解流感病毒的流行及分布情况,为流感的防治奠定基础。方法对860例不发热呼吸道疾病成人患者和发热门诊407例发热成人患者鼻咽分泌物样本进行Flu A和Flu B的快速筛查检测,并对检测结果进行统计学分析。结果不发热病人Flu A检出率为9.5%,Flu B检出率为4.4%,发热病人Flu A检出率为32.9%,Flu B检出率为5.2%。发热病人的Flu A检出率明显高于不发热病人(P<0.01),而Flu B检出率二者则没有显著差异(P>0.05)。结论 Flu A和Flu B是呼吸道感染的重要病原体,并且能够共同流行,发热是其感染的重要症状之一,应用流感快速筛查的方法能够为临床提供一定的早期诊断依据。     

239例甲型H1N1流感患者临床分析

目的总结239例甲型H1N1流感患者的临床特征、治疗及转归。方法回顾性分析239例甲型H1N1流感患者的临床资料。结果本组中98例（41.0%）有明确接触史。26例（10.9%）并存其他内科疾病。潜伏期中位数为2d（1～7d）。临床表现：发热（92.8%）,咳嗽（83.1%）,咽痛（47.4%）,咳痰（47.0%）,乏力（30.9%）等。根据病情划分为普通型167例（69.8%）,重症型36例（15.1%）,危重型36例（15.1%）,分组比较发现随着病情加重,患者淋巴细胞比例逐渐降低,中性粒细胞比例升高,乳酸脱氢酶水平升高,血清白蛋白水平下降,胸部X线检查异常比例增加P〈0.05。经治疗后221例（92.5%）好转出院,18例死亡。18例死亡患者均存在ARDS,其中15例合并MODS,12例（66.7%）存在基础疾病。比较生存组和死亡组发现年龄、存在基础疾病、淋巴细胞比例下降、中性粒细胞比例上升、乳酸脱氢酶水平增高、血清白蛋白水平下降、动脉血氧分压和氧合指数下降以及开始奥司他韦治疗时间延迟在两组间有显著性差异。结论ARDS为甲型H1N1流感最常见死亡原因;年龄增加、存在基础疾病是病情危重和死亡的危险因素;中性粒细胞比例升高、淋巴细胞比例降低、乳酸脱氢酶水平升高、血清白蛋白水平下降、动脉血氧分压和氧合指数下降以及抗病毒治疗延迟可提示病情重、预后差。     

Outbreak of Influenza (H1N1) amongst children in a residential school

Background

An outbreak of pandemic Influenza H1N1 occurred from 13 Feb to 20 Feb 2010 in a residential school at Belgaum, India.

Methods

On report of sudden increase in number of students reporting sick with symptoms suggestive of flu like illness, an investigation was launched to detect the source of infection and to control the spread of infection amongst those not affected. Six random samples of throat from the initial cluster were collected and RT-PCR was done to confirm the diagnosis. The outbreak in this institution was effectively controlled by standard preventive & control measures in the absence of vaccine.

Result

In a school of 335 children, 96 cases of Influenza like illness possibly resulting from pH1N1 (2009) were reported with an attack rate of 28.6%. Out of a total of 96 cases reported, 73 (76%) were hospitalized and 23 treated as outdoor patients. Serogroup A of Influenza H1N1 pandemic was identified to be the agent responsible for this outbreak as 06 random samples drawn from initial cluster tested positive on RT-PCR. A visit to an exhibition in the city was possibly the source of exposure amongst the children.

Conclusion

An outbreak of Influenza H1N1 infection amongst students in a residential public School was found to be linked to a visit to an exhibition following which the secondary transmission led to further occurrence of cases.     

Outbreak of Influenza (H1N1) amongst children in a residential school

Background

An outbreak of pandemic Influenza H1N1 occurred from 13 Feb to 20 Feb 2010 in a residential school at Belgaum, India.

Methods

On report of sudden increase in number of students reporting sick with symptoms suggestive of flu like illness, an investigation was launched to detect the source of infection and to control the spread of infection amongst those not affected. Six random samples of throat from the initial cluster were collected and RT-PCR was done to confirm the diagnosis. The outbreak in this institution was effectively controlled by standard preventive & control measures in the absence of vaccine.

Result

In a school of 335 children, 96 cases of Influenza like illness possibly resulting from pH1N1 (2009) were reported with an attack rate of 28.6%. Out of a total of 96 cases reported, 73 (76%) were hospitalized and 23 treated as outdoor patients. Serogroup A of Influenza H1N1 pandemic was identified to be the agent responsible for this outbreak as 06 random samples drawn from initial cluster tested positive on RT-PCR. A visit to an exhibition in the city was possibly the source of exposure amongst the children.

Conclusion

An outbreak of Influenza H1N1 infection amongst students in a residential public School was found to be linked to a visit to an exhibition following which the secondary transmission led to further occurrence of cases.     

广州地区急性呼吸道感染患者的病毒检出情况

【目的】 了解广州医学院第二附属医院急性呼吸道感染就诊人群病毒流行病学特征。【方法】 采用多重RT-PCR法,对2006.9至2009.8广州医学院第二附属医院门诊急性呼吸道感染患者鼻咽拭子检测呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)、流感病毒A型(FluA)、流感病毒B型(FluB)、人偏肺病毒(HMPV)及腺病毒(ADV)、副流感病毒(PIV)、冠状病毒(HCoV)8种病毒,分析其年份、季节及年龄分布特点。【结果】 3年共收集1388例标本,病毒检出率40.634%,RSV毒检出率最高(17.8%),其检出率逐年下降(P = 0.000);HMPV检出率于第2年升高(P = 0.016),第3年下降(P = 0.000)。RSV春季检出率高(P = 0.009);HRV秋季检出率高(P = 0.001);PIV春季检出率高(P = 0.000),夏季(P = 0.023)、冬季(P = 0.048)检出率低;FluA夏季检出率高(P = 0.000);HMPV春季(P = 0.05)、秋季(P = 0.01)检出率高。各季节不同病毒检出率有差异:春季,RSV(P = 0.000)及HRV(P = 0.004)检出率较高;夏季,HRV(P = 0.000)及FluA(P = 0.000)检出率较高;秋季,HRV(P = 0.000)检出率较高;冬季,HRV(P = 0.002)及RSV(P = 0.000)检出率较高。各年龄段病毒分布有差异:RSV(P = 0.004)、HRV(P = 0.029)及HMPV(P = 0.001)于 < 3岁组检出率较高;ADV(P = 0.000)与Flu B(P = 0.011)于3 ~ < 14岁组检出率较高;Flu A(P = 0.011)于14 ~ < 40岁组检出率较高。【结论】 病毒有季节流行趋势,RSV春季流行,FluA夏季流行,HRV则全年高发;病毒检出率与年龄有相关性,RSV、HRV及HMPV检出多见于婴幼儿,ADV与Flu B多见于3 ~ < 14岁人群,Flu A于14 ~ < 40岁组检出率较高。RSV检出率最高,并有年份强势流行趋势;且是各年龄组急性上呼吸道感染的主要病毒之一。     

重症甲型H1N1流感并肺炎的临床和影像学特点分析并文献复习(附39例病例报道)

目的 探寻新型重症甲型H1N1流感的发病规律,积累诊治经验.方法 回顾性分析中南大学湘雅二医院2009年甲型H1N1流感病房收治的诊断为重症甲型H1N1流感并肺炎的39例患者的临床和影像学特点,并结合文献复习.结果 发病年龄2岁11月～57岁.既往有基础疾病的患者11例(28.2％),肥胖症1例(2 6％),妊娠4例(10.3％).起病均有流感样症状(100％),10( 25.6％)例出现活动后气促.血气分析提示4例为I型呼衰,3例为低氧血症.胸部影像学表现主要为毛玻璃样模糊阴影的背景下,有局部散在、片状的高密度影,既有急性肺间质改变的表现,又有局灶肺实变的表现,但几乎未见典型的大叶性肺炎影像学改变.39例均为确诊病例.入院后立即给予奥司他韦抗病毒治疗,37例病例痊愈,2例患者死亡.结论 年龄较大(大于60岁)的人群中发生重症甲流的病例很少,孕妇在此次甲型H1N1流感病毒流行中感染后较易发展为重症;重症主要并发肺炎,以双下肺野分布的磨玻璃样模糊阴影为其典型的影像学表现;发病时间超过48小时仍不应放弃奥司他韦抗病毒治疗.     

2005～2006年度营口市流行性感冒监测结果分析

目的：了解营口市流感主要流行毒株及流行规律。方法：采用流感样病例的咽拭子标本进行流感毒株分离及鉴定，对流感样病例进行分析。结果：全年共采集流感样病例咽拭325份，分离毒株7份，经鉴定均为甲3型。营口地区流感在11月进入流行高峰，持续到第2年3月。结论：营口市流感发病人群以青少年为主，其流行有明显的季节性。