应用信息化教学手段实施机能实验学翻转课堂的研究

随机选择240名临床医学专业学生为研究对象,分为对照组(传统教学法)和试验组(信息化技术支撑的翻转课堂教学法),以实验成功率、实验操作成绩、期末理论成绩及问卷等形式来观察实验教学效果。结果显示试验组各项指标明显高于对照组,说明以信息化教学手段为支撑的翻转课堂教学模式可以提高机能学实验的教学质量和效率。     

芹菜素γ-环糊精包合物的表征和抗氧化活性研究

目的研究芹菜素与γ-环糊精(γ-CD)包合物的制备、表征、包合机制及其抗氧化活性。方法采用加热回流共沉淀法制备芹菜素γ-环糊精包合物,红外光谱法(IR)对形成的包合物进行表征,荧光光谱法测定包合物的包合常数(K)和包合比(n);荧光光谱法和核磁共振法(NMR)研究芹菜素与γ-CD在溶液中形成的包合物;双倒数曲线法研究包合前后对自由基1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的清除率。结果在不同的pH值溶液中,γ-CD对芹菜素具有不同的包合能力,γ-CD最适合在中性介质中与芹菜素形成包合物,在实验浓度范围内按1∶1形成包合物,包合比为1236,包合物对自由基DPPH·的清除活性更强;NMR确定包合物的结构。结论在实验条件下,芹菜素分子从γ-CD大口端进入到空腔内形成稳定的包合物,且抗氧化活性增加。     

鸦胆亭上调miR-29a-3p抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖、迁移与侵袭

本研究主要探讨鸦胆亭(bruceantin,BCT)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞的增殖、侵袭与迁移的抑制作用及其机制。采用MTT法检测BCT对NSCLC细胞株的细胞毒作用;采用集落形成、划痕和Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移与侵袭能力;Western blot及RT-qPCR实验分别检测与细胞增殖、迁移与侵袭等的相关蛋白及miRNA、mRNA的表达情况;利用基因预测网站预测miRNA的下游靶基因。结果显示,BCT对NSCLC细胞株有强大的细胞毒作用,对H1299、PC-9和A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为0.12±0.02、0.31±0.20和2.07±0.70μmol·L^-1。当0、0.03、0.15和0.75μmol·L^-1BCT分别作用H1299细胞24 h后,其增殖、迁移与侵袭能力呈现浓度依赖性地抑制。值得关注的是,多种与细胞迁移与侵袭相关的miRNA,如miR-29a-3p、miR-21-3p、miR-183-5p与miR-34b-5p的表达水平随着BCT给药浓度的增加而增加,尤其对miR-29a-3p的作用最为明显;通过基因预测网站预测整合素β1(integrinβ1,ITGB1)可能为miR-29a-3p的靶基因;Western blot结果进一步显示,多种与细胞增殖、迁移与侵袭相关的蛋白,如整合素家族多种蛋白以及下游β-catenin、p-Src和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表达均呈浓度依赖性减低,其中ITGB1蛋白降低最明显;而RT-qPCR结果显示ITGB1的mRNA表达与给药浓度无关。由此推测,BCT有可能是通过上调miR-29a-3p抑制ITGB1蛋白的表达,且与其mRNA水平无关,深入的机制仍需进一步探讨。本研究初步提示BCT在NSCLC的治疗中具有继续开发的研究潜力。     

Ki-67、PCNA和Survivin在胃肠道间质瘤组织中的表达

目的 探讨Ki-67、PCNA和Survivin在胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)组织中的表达及其与GIST临床病理参数的关系.方法 应用免疫组化SP法检测103例GIST组织中Ki-67、PCNA和Survivin的表达.结果 GIST组织中Ki-67、PCNA和Survivin阳性表达率分别为56.3％、68.0％、72.8％,Ki-67、PCNA和Survivin表达与GIST的发生年龄、性别、部位、组织学类型无关,而与肿瘤的NIH分级有关,且Ki-67、PCNA与Survivin 的表达呈显著性正相关.结论 Ki-67、PCNA和Survivin联合检测可作为判定GIST恶性程度及预后的重要指标.     

沉默HOXA13基因对肝癌HepG2和QGY-7703细胞恶性表型的影响

目的：探讨沉默HOXA13基因对肝癌细胞株HepG₂与QGY-7703恶性表型的影响,为肝癌的诊断及治疗提供新的分子靶点。方法：构建HOXA13基因的干扰重组质粒plent-U6-GFP/si-HOXA13,将其稳定转染至HepG₂与QGY-7703细胞;采用RT-PCR和Western blotting法鉴定干扰效果;以HOXA13基因沉默细胞为实验组,以转染空质粒的细胞为对照组,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、细胞倍增时间测定、平板克隆形成实验和流式细胞术等分析HOXA13基因沉默后HepG₂与QGY-7703细胞生长速度、细胞倍增时间、克隆形成能力和细胞周期等的改变。结果：MTT实验,与对照组比较,实验组细胞的生长速度明显下降;其细胞周期也发生改变,G₁期细胞增多、S期细胞减少。对照组HepG₂和QGY-7703细胞平均倍增时间分别为（4.59±0.27）和（4.93±0.17） h,实验组HepG₂和QGY-7703细胞平均倍增时间分别为（6.02±0.86）和（6.43±0.66） h,2组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。对照组HepG₂和QGY-7703细胞平均细胞克隆形成数分别为（264.00±12.62）和（269.00±4.55）个,实验组HepG₂和QGY-7703细胞平均细胞克隆形成数目分别为（165.00±10.61）和（215.00±4.43）个,2组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：HOXA13基因可以使肝癌细胞HepG₂与QGY-7703的增殖加快、克隆形成能力增强、G₁期细胞减少、S期细胞增多,可以成为肝癌诊断和治疗新的分子靶点。     

千金子二萜醇衍生物抗非小细胞肺癌的作用及机制

目的:非小细胞肺癌占所有肺癌的85％,具有较高的发病率和病死率.非小细胞肺癌的治疗研究和新药开发迫在眉睫.本研究主要探讨千金子二萜醇衍生物的活性及其抑制非小细胞肺癌细胞生长的作用机制.方法:以千金子二萜醇为原料合成3个千金子二萜醇衍生物,采用磁共振验证结构;采用MTT法检测上述衍生物对非小细胞肺癌细胞(A549和H12...     

猪腹腔高压模型的建立及腹腔高压对门静脉血炎症细胞因子表达的影响

目的 探讨猪腹腔高压动物模型的建立方法,以及腹腔高压对门静脉血中肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-10等炎症细胞因子表达的影响。方法 选取健康家猪6只,体质量25.2~28.4（26.86±0.85）kg。采用多水囊叠加方法制备腹腔高压动物模型,并放置门静脉导管。在腹腔高压动物模型制备前和模型制备过程中腹腔压力为0、5、10、15、20、25、30 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）时,分别抽取门静脉血5 mL,采用免疫荧光法检测其中炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10的表达水平。观察对比制备腹腔高压动物模型前及制备过程中不同腹腔压力时门静脉血中TNF-α、IL-6、IL-10的变化情况,采用简单线性回归分析TNF-α、IL-6、IL-10表达水平与腹腔压力的关系。结果 6只实验动物均成功完成模型制备,实验过程中无死亡。腹腔压力达到30 mmHg时腹腔水囊注入液量为2 560~2 720 mL。腹腔高压动物模型制备前及制备过程中不同腹腔压力点,门静脉血中炎症细胞因子TNF-α、IL-10表达水平呈先上升后下降趋势,IL-6表达水平呈上升趋势,差异均有统计学意义（F=15.66、40.37、34.67,P值均<0.001）。线性回归分析显示：TNF-α表达水平与腹腔压力呈负相关性,回归方程分别为$\widehat{Y}$_TNF-α=-0.013X_腹腔压力+1.346（R²=0.341,P<0.001）;IL-6、IL-10表达水平均与腹腔压力呈正相关,回归方程分别为$\widehat{Y}$sub>IL-6=0.013X_腹腔压力+0.222（R²=0.777,P<0.001）, $\widehat{Y}$_IL-10=0.022X_腹腔压力+0.402（R²=0.642,P<0.001）。结论 采用多水囊叠加方法可成功制备腹腔高压动物模型。腹腔压力的升高,促进IL-6的表达,对TNF-α、IL-10的表达先促进后抑制。腹腔高压加重了机体的炎症反应。     

扁塑藤素抑制卵巢癌细胞株OVCAR3生长的实验研究

背景与目的:蛋白酶体抑制剂作为肿瘤的靶向治疗方法之一,近年来备受关注.研究发现,蛋白酶体抑制剂PS-341(bortezomib)可以诱导多种卵巢癌细胞株凋亡.扁塑藤素是一种天然化合物,具有蛋白酶体抑制剂的作用.本研究旨在研究扁塑藤素对卵巢癌细胞的增殖抑制作用.方法:采用MTT增殖抑制试验、Hoechst 33258荧光染色、Western blot检测等方法,研究扁塑藤素对卵巢癌细胞株0VCAR3增殖的抑制作用.结果:扁塑藤素可以抑制卵巢癌细胞增殖,IC50值为(2.74±0.04)μmol/L;通过Hoechst 33258荧光染色、PARP蛋白裂解,证实扁塑藤素通过诱导卵巢癌细胞凋亡抑制其增殖,其作用机制是抑制了肿瘤细胞信号通路ERK及Akt磷酸化.结论:扁塑藤素通过抑制ERK和Akt磷酸化,诱导卵巢癌细胞凋亡,抑制其生长,是一个有治疗卵巢癌临床应用价值的天然药物.     

氧氟沙星包合物的制备、表征及其包合机制的分析

目的：研究氧氟沙星与环糊精（包括β-环糊精和羟丙基β-环糊精）包合物的制备过程,包合物的结构表征以及包合机制。方法：采用超声法制备包合物,并采用各种不同的方法对形成的包合物进行表征和识别,包括荧光光谱法、紫外-可见分光光度法和核磁共振法等。荧光光谱法计算包合常数（K）以及包合比（n）,同时研究室温条件下不同浓度的环糊精及其衍生物以及不同的酸碱度对包合作用的影响,核磁共振法用于研究包合机制。结果：溶液中不同的pH对氧氟沙星的存在形式影响不同;不同pH条件下,环糊精对氧氟沙星具有不同的包合能力,其中β-环糊精（β-CD）在中性条件下更容易与氧氟沙星进行包合,其包合常数为1 300;而羟丙基β-环糊精（HP-β-CD）更容易在酸性性条件下与氧氟沙星进行包合,其包合常数为1 640。在研究的浓度范围内,环糊精分子与氧氟沙星分子是按1：1形成包合物的。结论：氧氟沙星与环糊精在实验条件下形成了稳定的包合物,氧氟沙星分子是从环糊精及其衍生物的大口端包合进入到空腔内。     

紫草素促进大鼠皮瓣成活的实验研究

目的 观察紫草素对大鼠狭长窄蒂皮瓣成活的影响及作用机制。方法 取Wistar大鼠在其背部设计2个类似“乒乓球拍”的皮瓣,每个狭长窄蒂（蒂的长宽比为2 cm∶1 cm）携带3 cm×3 cm皮瓣。48只大鼠随机分为对照组和紫草素组,各组相应处理:紫草素组（2 mg/kg）,对照组（给予等剂量溶剂,2 ml/ kg）,1次/d腹腔注射,连续7 d。免疫荧光组织化学染色分析术后皮瓣组织血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）和热休克蛋白70（Heat Shock Protein 70,HSP70）的表达;HE染色观察大鼠皮瓣形态学变化,并计算皮瓣成活面积百分比;ELISA 法检测动物血清一氧化氮（nitric oxide,NO）、超氧化物歧化酶（superoxide Dismutase,SOD）和丙二醛（malondialdehyde,MDA）的含量。结果 紫草素增加了术后大鼠皮瓣VEGF、eNOS和HSP70的表达,并促进新生毛细血管形成,提高了大鼠皮瓣的成活率;紫草素显著降低了大鼠血清MDA的水平,升高了NO和SOD的水平。结论 紫草素可促进狭长窄蒂皮瓣成活,机制与调节VEGF/eNOS/ NO信号分子表达和抗氧化作用有关。