生发酊剂外用治疗脱发78例临床观察

目的 观察外用生发酊剂治疗脱发的疗效.方法 观察皮肤科门诊135例脂溢性脱发、斑秃患者.治疗组78例,予局部外用生发酊剂治疗脂溢性脱发和斑秃,对照组57例外用3%米诺地尔生发水.观察患者起效天数、治疗6个月后头发生长结果,评价疗效.结果 两组脂溢性脱发患者的疗效间差别有显著性意义（P＜0.05）,其治疗起效天数的分布间差别亦有显著性意义（P＜0.05）;两组斑秃患者的疗效间差别无显著性意义（P＜0.05）,但其治疗起效天数的分布间差别有显著性意义（P＜0.05）.结论 生发酊剂外用能有效治疗脱发,其疗效明显好于3%米诺地尔.     

米非司酮导致孕激素功能不足的自然流产小鼠模型的建立及其评价

目的 建立孕激素功能不足导致的自然流产小鼠模型,为自然流产发生机制以及孕期补充孕激素临床规范的研究提供理想的动物模型.方法 成年雌性小鼠随机分成米非司酮(RU486)高剂量组(50 μg/100μL丙二醇)、中剂量组(25 μg/100 μL丙二醇)、低剂量组(10 μg/10 μL丙二醇)和溶剂对照组(100 μL丙二醇/只),于妊娠8d经颈背部皮下注射RU486或溶剂后,分别于妊娠10d和分娩后观察妊娠状况和窝产仔数;于妊娠10d取各组小鼠外周血和子宫组织,对各组小鼠的血清雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平进行检测;应用基因芯片技术,对实验组与对照组间的子宫组织差异表达基因进行筛查分析,并通过Western blot检测,对其中3个差异表达基因进行了验证.结果 高、中和低剂量组流产率分别为100％、46.0％和13.9％,且中剂量组妊娠鼠子宫内均为停育被吸收的胚胎,而低剂量组的仔鼠出生体质量显著小于对照组(P＜0.05);与对照组相比,中剂量组妊娠鼠血清E2水平升高(P＜0.05)、P4水平降低(P＜0.001),而低剂量组妊娠鼠血清中E2水平降低(P＜0.05)、P4水平升高(P＜0.05).经基因芯片检测和Western blot验证表明,与对照组相比,细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)基因在中剂量组子宫组织中的表达量显著降低(P＜0.05),促细胞凋亡因子(Bax)基因的表达量也显著性降低(P＜0.05),而细胞周期蛋白D2(CCND2)基因的表达量则显著升高(P＜0.05).结论 适当剂量的RU486可诱导胚胎着床后妊娠鼠出现妊娠丢失或新生仔鼠体质量降低的表型,可能成为一种新的可用于研究人妊娠期孕酮功能不足所致的流产或宫内生长受限等病理妊娠发生机制的动物模型.     

工频电磁场接触对大鼠生殖功能的影响

目的 评价工频电磁场接触对大鼠生殖功能的影响,用以研究人类的电磁场接触对生殖功能的损伤风险.方法 自行设计制备磁场发生仪,把大鼠暴露于一定强度的磁场中生活一段时间.观察雌性大鼠的甾体激素水平、动情周期和生殖状况和数量;并观察雄性大鼠的睾丸和附睾重量、精子密度、活动精子比例和精子质膜完整性.结果 本实验发现工频电磁场强度达1 mT,每日暴露时间8h,自4周龄开始持续1个月,不会对雌性大鼠成年后甾体激素分泌情况和生育后代的情况产生显著影响,仅仅导致发情频率提高;而2 mT,每日暴露12h,自8周龄开始持续2个月,可导致雄性大鼠的活动精子比例下降.结论 在大鼠卵母细胞和精子发生过程中,环境工频磁场会导致雌性大鼠的发情频率增加,雄性大鼠的活动精子比例下降.     

间质-上皮转化参与子宫内膜异位症模型大鼠包囊形成

目的探讨间质上皮转化以及转录因子Snail在子宫内膜异位症(EMS)模型大鼠异位包囊形成中的作用。方法自体移植法建立EMS大鼠模型。选取造模成功形成包囊的EMS大鼠,分为造模后2周至7周组,取正常大鼠为正常对照组。采用免疫组织化学方法研究上皮标志物(E-钙黏蛋白、角蛋白8)、间质标志物(波形蛋白)以及Snail在异位内膜包囊中的定位和表达情况,Western blotting法检测E-钙黏蛋白、波形蛋白在异位内膜包囊形成组织中的含量。采用TUNEL法检测异位包囊内部脱落细胞凋亡情况。结果免疫组织化学结果显示,EMS模型大鼠的异位内膜包囊腔上皮E-钙黏蛋白、角蛋白8和波形蛋白含量在造模后2~7周过程中,相对于包囊壁间质层均处于较高水平,而且与正常子宫内膜上皮比较,亦处于较高的水平。另发现造模后2~7周异位包囊腔上皮样细胞脱落,E-钙黏蛋白、角蛋白8、波形蛋白阳性表达,且在造模后4~5周阳性信号最强。与正常大鼠子宫内膜组织比较,造模后3~5周异位内膜包囊腔上皮中Snail阳性表达信号增强。Western blotting法检测显示,造模后2~7周异位内膜中E-钙黏蛋白、波形蛋白含量与正常内膜比较,均维持在较高水平,差异均有统计学意义(P0.05)。TUNEL法检测发现异位包囊内部脱落细胞未发生凋亡。结论 EMS模型大鼠异位包囊腔上皮细胞可能是由间质细胞转化形成,提示间质-上皮转化(MET)参与了异位包囊形成,且Snail参与调控其过程;异位内膜包囊上皮细胞脱落以形成囊腔,但其上皮细胞脱落不伴随细胞凋亡。     

温经汤对子宫内膜异位症大鼠在位和异位内膜VEGF及SPARC表达的影响

目的:探讨温经汤对子宫内膜异位症大鼠在位和异位内膜中血管内皮生长因子(VEGF)及富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)表达的影响。方法:自体移植法建立子宫内膜异位症(EMs)大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、米非司酮组及温经汤低、中、高剂量组,另取一组正常大鼠为正常对照组。各组分别给予生理盐水、米非司酮和温经汤灌胃,连续给药21 d后处死大鼠,取子宫和异位内膜组织。免疫组化法观察在位和异位内膜中VEGF和SPARC的定位和表达情况,Western blotting法检测二者在在位和异位内膜中的蛋白表达量。结果:免疫组化结果显示,模型组在位和异位内膜中VEGF和SPARC阳性表达强烈,各治疗组在位和异位内膜中二者的阳性表达均有不同程度的降低。Western blotting检测显示,温经汤中、高剂量组在位和异位内膜VEGF蛋白含量较模型组显著降低(P0.05);除温经汤低剂量组外,其余各组在位内膜SPARC蛋白含量均低于模型组(P0.05);温经汤中、高剂量组异位内膜SPARC蛋白含量和模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:温经汤可以降低EMs大鼠在位和异位内膜中VEGF和SPARC表达,影响新生血管形成,抑制异位子宫内膜的生长。     

癸源煎配方颗粒对卵巢储备功能下降模型小鼠的改善作用及机制研究

目的:研究癸源煎配方颗粒(GDFG)对卵巢储备功能下降(DOR)模型小鼠的改善作用及机制。方法:将动情周期正常的42只雌性ICR小鼠随机分为对照组、模型组、戊酸雌二醇组(阳性对照,0.15 mg/kg)和GDFG低、中、高剂量组(0.75、1.49、2.98 g/kg),每组7只。除对照组外,其余各组小鼠均腹腔注射顺铂(3 mg/kg)复制DOR模型。造模成功后,给药组小鼠灌胃相应药物,模型组和对照组小鼠灌胃生理盐水,每天1次,连续4周。末次给药后,采用酶联免疫吸附试验测定小鼠血清中抗米勒管激素(AMH)和促卵泡生成素(FSH)水平;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠卵巢组织病理学形态;采用免疫组化法观察小鼠卵巢组织中AMHR受体Ⅱ(AMHRⅡ)、Smad4蛋白的分布情况;采用Western blot法检测小鼠卵巢组织中AMHRⅡ、Smad4蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠血清中AMH水平和卵巢组织中AMHRⅡ、Smad4蛋白表达水平均显著降低(P<0.01),血清中FSH水平显著升高(P<0.01);卵泡组织中可见卵泡皱缩、卵泡核丢失、卵巢间质纤维化、黄体疏松;AMHRⅡ、Smad4蛋白主要分布在卵泡膜上和卵巢间质中。与模型组比较,GDFG各剂量组小鼠血清中AMH水平和卵巢组织中AMHRⅡ、Smad4蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),血清中FSH水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);卵巢组织中可见各级卵泡、卵泡形态改善,未见明显核丢失和卵丘形成;AMHRⅡ、Smad4蛋白主要分布在卵泡核(GDFG高剂量组除外)及卵巢颗粒细胞膜上(GDFG中剂量组以分布在窦卵泡为主),成熟卵泡核周围或黄体中有少许分布。结论:GDFG可改善DOR模型小鼠的卵巢功能,其机制可能与升高血清中AMH水平和卵巢组织中AMHRⅡ、Smad4蛋白表达水平,改善AMHRⅡ、Smad4蛋白在卵巢颗粒细胞膜和卵泡核内的分布以及降低血清中FSH水平有关。