点突变Uchl1不影响小鼠卵母细胞成熟

目的 通过观察突变蛋白与野生蛋白过量对卵母细胞成熟过程的影响,分析Uchl1在小鼠卵母细胞离体成熟中发挥的作用及其作用方式。方法 通过原核重组蛋白技术制备点突变（C90S和I93M）和野生型Uchl1蛋白,通过蛋白微量注射技术将突变蛋白与对照蛋白注射到未成熟卵母细胞,或体外培养液中添加突变蛋白与野生型蛋白,分析野生型Uchl1过量,或突变Uchl1-I93M蛋白添加,或泛素水解酶活性缺失的Uchl1-C90S突变蛋白添加,对于卵母细胞体外成熟的影响。结果 显微注射UCHL1融合蛋白的各组之间以及与注射PBS之间, GVBD率差异没有达到统计学显著性;同时培养液中添加Uchl1的GST融合蛋白,相对于无注射对照组,也没有统计学显著差异（P>0.05）。注射GST-C90S融合蛋白组少量GV期卵母细胞体外发育为MII期卵母细胞后呈现极体偏大于对照组。I93M点突变小鼠与WT小鼠比较,GV期卵母细胞体外GVBD率无显著差异。结论 在小鼠卵母细胞中,添加外源性Uchl1,或者有毒性作用的I93M突变体,或者水解酶活性结构改变的C90S突变体,均不影响卵母细胞成熟的GVBD进程。即使构建的I93M点突变小鼠卵母细胞GVBD率无异常。但是,其水解酶活性位点突变影响极体的形成。     

清热化瘀中药方治疗子宫内膜异位症临床研究

目的观察腹腔镜术后配合清热化瘀中药方治疗子宫内膜异位症(EMs)的临床疗效。方法将90例EMs患者按照随机数字表法分为2组,2组均行腹腔镜下卵巢囊肿剥离术。治疗组30例术后予清热化瘀中药方治疗,治疗3个月经周期,经期不服用;对照组30例于术后第1次月经来潮第1～5 d予注射用醋酸曲普瑞皮下注射1次,每4周1次,共用4次。比较2组治疗前后疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分、中医症状积分、子宫内膜异位症患者生存质量调查表-30(EHP-30)评分、血清糖类抗原-125(CA125)及性激素六项水平变化,统计比较2组临床疗效。结果治疗后2组疼痛VAS评分、中医症状积分、EHP-30各维度评分及总分均较本组治疗前下降(P0.05),且治疗组均低于对照组(P0.05)。治疗后2组CA125水平及雌激素(E_2)水平均较本组治疗前下降(P0.05),且治疗组均低于对照组(P0.05)。治疗组总有效率93.33%,对照组总有效率83.33%,2组总有效率比较差异无统计学意义(P 0.05)。结论腹腔镜术后配合清热化瘀中药方可以显著减轻EMs患者疼痛等症状,改善其生活质量,并能够降低CA125及E_2水平。     

PPAR-γ对卵巢功能的影响及其作用机制

过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)是配体依赖型核受体,目前发现PPARs具有多种亚型,包括有PPAR-α、PPAR-β和PPAR-γ等,其中对PPAR-γ的研究最为深入。PPAR-γ在细胞信号转导中起重要作用,参与调节细胞内许多功能,如脂肪细胞分化、脂质代谢、免疫细胞活化和炎症介质生成等。近年来的一些研究也显示,PPAR-γ在卵巢组织周期性调控中也发挥着重要的作用,如促进排卵等。在卵巢组织中,PPAR-γ可由卵巢组织自身产生,并参与调控卵巢的周期性变化;同时,脂肪或巨噬细胞中激活的PPAR-γ可能通过脂质代谢或炎症介导因子而对卵巢产生重要影响。     

KiSS-1/GPR54系统的生殖内分泌功能研究进展

亲吻素(kisspeptins)是由KiSS-1基因编码的一组多肽激素,与其受体GPR54一起组成KiSS-1/GPR54系统,参与下丘脑-垂体-性腺轴功能的调节,并在青春期启动和促性腺素释放过程中发挥非常重要的作用。在人和许多动物中研究显示:KiSS-1基因在下丘脑的特定部位表达,并受到性激素的调节。由此人们推测,性激素,特别是雌激素,可能是通过KiSS-1/GPR54系统将其反馈信号传递到GnRH神经元,导致排卵前GnRH/LH峰的形成。本文主要对KiSS-1基因及其编码蛋白的分子结构,KiSS-1/GPR54系统的信号转导途径及其对性腺轴功能的调节机制进行介绍,以期为从事生殖基础医学研究的科研人员提供有益的参考。     

卵泡液和血清中内分泌腺源血管内皮生长因子对卵巢过度刺激综合征的预测价值

目的评价卵泡液和血清内分泌腺源血管内皮生长因子(EG-VEGF)浓度水平对接受控制性超促排卵(COH)的体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妇女并发卵巢过度刺激综合征(OHSS)的预测价值。方法本研究为单中心的回顾性病例对照研究。2008年10月至2009年2月因输卵管和(或)男性因素进行IVF/ICSI治疗,COH中呈中、重度卵巢反应的不育妇女74例,其中OHSS组14例,非OHSS组60例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测取卵日卵泡液和取卵后第2天血清的EG-VEGF、VEGF浓度。结果所有患者中,卵泡液EG-VEGF、卵泡液VEGF和血清EG-VEGF浓度均与人绒毛膜促性腺激素(hCG)日血清雌二醇(E_2)水平呈显著负相关(r=-0.630,P0.01;r=-0.559,P0.01;r=-0.478,P0.01),而与血清VEGF浓度无此相关性,卵泡液EG-VEGF和卵泡液VEGF浓度间呈显著正相关(r=-0.412,P0.01)。与非OHSS组相比,OHSS组的卵泡液EG-VEGF、卵泡液VEGF和血清EG-VEGF浓度均明显降低(P0.01,P0.01,P0.05),而血清VEGF浓度无显著差异。与轻度OHSS者相比,中度OHSS者的卵泡液EG-VEGF浓度显著降低(P0.01),而血清EG-VEGF、卵泡液VEGF和血清VEGF浓度均无显著差异。结论卵泡液和黄体早期血清EG-VEGF浓度与卵巢反应负相关并在OHSS发生者中明显下降,可用于预测OHSS的发生。与VEGF相比,EG-VEGF对OHSS的预测性更强,且卵泡液EG-VEGF浓度还能预测OHSS的严重程度。     

卵巢高反应对围着床期子宫内膜基因表达谱的影响

目的 研究控制性超排卵过程中卵巢高反应者围着床期子宫内膜基因表达谱的变化。方法 超排卵过程中因出现卵巢高反应而取消胚胎移植的妇女（高反应组,n=4）和有正常生育史的育龄妇女（对照组,n=3）,分别于围着床期行子宫内膜组织活检术。HE染色观察子宫内膜组织学改变;基因芯片Affymetrix U133A 2.0筛选差异表达基因,Real-time PCR加以验证;应用生物信息学分析工具PANTHER进行差异表达基因的生物学过程分析。结果 对照组子宫内膜均为分泌中期,高反应组子宫内膜部分腺体发育延迟。筛选出差异表达基因364个,其中上调基因233个,下调基因131个;Real-time PCR验证与子宫内膜功能相关基因OPN、PLA2G2、DPPIV、IGFBP5和 SSAT,每个基因的Real-time PCR结果与芯片检测的信号值呈显著正相关（r=0.44, P<0.01）。PANTHER分析显示,差异表达基因参与细胞因子信号转导和免疫调节等生物学过程。结论 卵巢高反应影响围着床期子宫内膜的基因表达,可能是高甾体激素使子宫内膜接受性降低的机制之一。     

高血压病血瘀证与非血瘀证患者血清瘦素水平的比较

目的：研究高血压病血瘀证与非血瘀证患者血清瘦素水平的变化及意义。方法；采用放射免疫法测定87例高血压病血瘀证与114例高血压病非血瘀证患者的血清瘦素水平，观察其与性别，年龄，体重指数（BMI），脂肪百分比（Fat%)，空腹血糖（FBS），总胆固醇（TC），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），甘油三酯（TG），内皮素（ET），血浆胰岛素（INS）等指标的关系。结果：血瘀证与非血瘀证患者BMI，INS，ET，三项指标差异显著（P<0.05和P<0.01)；多元线性相关结果显示瘦素与ET呈负相关；在逐步回归分析中只有ET最后进入方程。结论：高血压病血瘀证与非血瘀证患者的血清瘦素水平变化不大；ET是与血清瘦素水平变化的主要相关因素。     

血瘀证与血管内皮细胞内游离钙浓度关系的实验研究

目的：研究血瘀证与血管内皮细胞内游离钙浓度的关系,观察不同复方（活血化瘀复方、益气活血复方、理气活血复方）对血内皮细胞内游离钙浓度的影响。方法：以大鼠为研究对象,给予高胆固醇和高脂饲料喂养建立血瘀证动物模型,分为6组,观察组分别给予硝苯地平、活血化瘀复方、益气活血复方、理气活血复方。下腔静脉取血,测血清钙、血清总胆固醇和三酰甘油,Fura-2/Am标记,荧光测定血管内皮细胞内游离钙浓度。结果：①造模组与对照比较,血清钙明显升高（P＜0．05）。②所有复方均具有钙通道阻断剂样作用,能增加细胞外钙浓度,与造模组比较差异显著（P＜0．05）。③造模组与对照组比较,胞内游离钙浓度明显升高（P＜0．05）,益气活血复方能使造模运动血管内皮细胞内游离钙浓度降低,与造模组比较差异显著（P＜0．05）。结论：①血瘀证血管内皮细胞内游离钙浓度升高,血瘀证的形成可能与血管内皮细胞的屏障功能下降有关。②益气活血复方能降低胞内游离钙浓度,具有血管内皮保护作用。     

血管表皮生长因子基因单核苷酸多态性与子宫内膜异位症遗传易感性的关系

目的:探讨血管表皮生长因子(vaseular endotheliac grouth factor,VEGF)基因(-460C/T,+405G/C,-2578A/C)单核苷酸多态性(single nucleotide podymorphisms,SNP)与子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)遗传易感性的关系。方法:筛选来自上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院行腹腔镜手术的90例患者,选择60例腹腔镜术后病理证实为EMS且符合瘀热证的患者为观察组,其余30例同期行腹腔手术的输卵管炎性疾病患者为对照组。PCR测定VEGF基因-460C/T,+405G/C,-2578A/C多态性,探讨EMS的发病机理。结果:两组患者VEGF基因多态性-460C/T的基因型频率比较,差异具有统计学意义(P0.05),而+405G/C,-2578A/C基因多态性比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:VEGF基因SNP类型-460C/T,+405G/C,-2578A/C不构成妇女子宫内膜异位症易患性关键因素,但作为复杂因素之一,需要结合中医证型分析,作为EMS的临床诊断和疗效评价参考指标。     

卵巢高反应对围着床期子宫内膜基因表达谱的影响

目的 研究控制性超排卵过程中卵巢高反应者围着床期子宫内膜基因表达谱的变化.方法 超排卵过程中因出现卵巢高反应而取消胚胎移植的妇女(高反应组,n=4)和有正常生育史的育龄妇女(对照组,n=3),分别于围着床期行子宫内膜组织活检术.HE染色观察子宫内膜组织学改变;基因芯片Affymetrix U133A 2.0筛选差异表达基因,Real-time PCR加以验证;应用生物信息学分析工具PANTHER进行差异表达基因的生物学过程分析.结果 对照组子宫内膜均为分泌中期,高反应组子宫内膜部分腺体发育延迟.筛选出差异表达基因364个,其中上调基因233个,下调基因131个;Real-time PCR验证与子宫内膜功能相关基因OPN、PLA2G2、DPPIV、IGFBP5和SSAT,每个基因的Real-time PCR结果与芯片检测的信号值呈显著正相关(r=0.44,P<0.01).PANTHER分析显示,差异表达基因参与细胞因子信号转导和免疫调节等生物学过程.结论 卵巢高反应影响围着床期子宫内膜的基因表达,可能是高甾体激素使子宫内膜接受性降低的机制之一.