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目的多种流式细胞仪机型应用于艾滋病防治工作中,比较不同机型间的免疫数据乃是当前迫切需要解决的问题。方法应用BDFACS Calibur和Beckman Coulter XL两种主流机型流式细胞仪,对阜阳市现场采集的183份标本[正常人41份,艾滋病病毒(HIV)阳性感染者142份]进行平行检测,观察上述两种机型对检测同一标本CD4绝对计数的影响。结果BD和XL两种机型的绝对计数结果比较显示,正常人CDd绝对计数在两种机型间的差异范围:≤10%的占57%,而〉10%占43%;检测142份HIV阳性标本,CD4绝对计数差异≤10%的占84%;而差异〉10%的占16%。在正常人标本组两机型数据间相关系数r=0.97;HIV阳性标本组数据间相关系数r=0.98,回归方程X系数均接近1。统计学检验显示,两种机型检测数据无显著性差异(P〉0.05)。结论两种机型间数据高度相关且数值相近.所测定的HIV感染者CD4细晌绡对计数可以百用. 相似文献
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目的:通过不同方案包装HIV-1假病毒,确定获得高重复性、高稳定性和高滴度假病毒的方法。方法从转染效率影响因素出发,通过不同的转染方案,利用pNL4-3 LucR-E-质粒与VSV-G质粒共转染293细胞包装病毒,分别于48 h和72 h收取假病毒并重新感染293细胞,48 h后测荧光素酶报告基因。结果成功包装出HIV-1假病毒,不同包装方案的病毒滴度不同,测得报告基因最高接近107 RLUs。结论应用PEI转染试剂、大提质粒pNL4-3︰VSV-G为4︰1时,转染效率最高,包装的假病毒滴度最高。 相似文献
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目的分析我国HIV-1B′亚型R5或R5/X4嗜性毒株在GHOST细胞的感染性。方法采用传统的共培养方法从HIV-1感染者PBMC中分离并培养病毒,用表达CD4和趋化因子受体CCR5或CXCR4的GHOST细胞系,测定毒株的辅助受体利用情况,使用相同病毒量即2mg的HIV-1 p24分别感染表达不同受体的GHOST细胞系,通过流式细胞仪检测分析绿色荧光蛋白(GFP)的表达反映病毒感染细胞的能力。结果35例B′亚型毒株利用CCR5受体,占22例(62.85%),双嗜性即CCR5/CXCR4均阳性占13例(37.15%)。GHOST-R5/X4细胞的感染性分析结果显示,R5/X4双嗜性毒株的感染性明显高于CD4〉200/μl的R5毒株的感染性(P〈0.05);R5/X4毒株与CD4≤200/μl的R5毒株感染性比较差异无统计学意义(P〉0.05);CD4〉200/μl的R5毒株与CD4≤200/μl的R5毒株感染性比较差异有统计学意义(P〈0.05);GHOST-CCR5细胞感染性分析结果显示:R5/X4双嗜性毒株的感染性明显下降,与CD4〉200/μl的R5毒株的感染性比较差异无统计学意义(P〉0.05)。利用相同剂量的双嗜性毒株分别感染R5、X4或R5/X4的GHOST细胞系,显示双嗜性毒株可同时利用CCR5和CXCR4辅助受体,但69.23%的R5/X4毒株以CCR5受体为主,30.77%的R5/X4毒株以CXCR4受体为主。结论HIV-1B′亚型R5/X4病毒不仅有更广泛的宿主细胞嗜性,而且在GHOST-R5/X4细胞中感染性明显提高。持续使用CCR5受体的毒株在疾病进展的过程中虽然辅助受体的利用是一样的,但病毒感染细胞的能力增加。 相似文献
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目的 了解半乳糖基抗CD3单抗-TLL复合物(Gal-Anti-CD3-McAb-TIL) 的体内趋肝细胞性。方法 制备半乳糖基抗CD3单抗(Gal-Anti-CD3-McAb),采用苯酚-硫酸法测其糖密度;经动物外周静脉分别注入用^125I标记的抗CD3单抗(Anti-CD3-McAb)和用^131I标记的Gal-Anti-CD3-McAb,分别测定两者在动物体内各脏器的放射活性。结果 Gal-Anti-CD3-McAb的糖密度值为58.12;外周静脉注射给药,Anti-CD3-McAb趋于肺内浓聚,而Gal-Anti-CD3-McAb有显著趋肝性,且于靶器官有较长时间停留。结论 经外周静脉途径注射,Gal-Anti-CD3-McAb有显著的体内趋肝细胞性,其中半乳糖基与肝结合蛋白所介导的受体-配体反应在Gal-Anti-CD3-McAb的趋肝细胞过程中发挥主导作用。 相似文献
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由于上世纪90年代全球开展艾滋病高效抗反转录病毒治疗(highly antiretroviral therapy,HAART),使艾滋病的病死率显著下降,感染者的免疫功能得以重建,生存时间明显延长,生存质量显著改善。但是治疗过程中的多种因素可以导致抗病毒治疗的失败,耐药性是其中的重要问题。 相似文献
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目的研究抗人CD4DID2结构域多克隆抗体对HIV-1的抑制作用。方法经overlappingPCR构建人鼠嵌合型CD4质粒pcDNA3.1-mhD1D2m和pcDNA3.1-mhD2m,利用pcDNA3.1/V5-His—TOPO质粒载体的通用引物双向测序,测序结果用vectorNTI8.0软件与预期序列作比对,并通过假病毒感染实验检测其介导病毒感染能力,实验数据采用SPSS11.5统计学软件进行χ^2检验。pcDNA3.1-mhDID2m和pcD—NA3.1-mhD2m经DNA免疫BALB/c小鼠,所获多抗血清经假病毒中和实验检测其抗HIV-1中和能力,经FACS检测其与CD4抗原结合能力。结果所构建人鼠嵌合型CD4质粒pcDNA3.1-mhD1D2m能够介导HIV-1假病毒感染。质粒pcDNA3.1-mhD1D2m免疫小鼠8周后所获得的多抗血清稀释100倍后,对HIV-1毒株抑制率为76%~95%。质粒pcDNA3.1-mhD2m免疫小鼠所获得的多抗血清则无明显的中和作用。FACS检测显示mhD1D2m多抗血清与TZM-b1细胞表面的CD4可以特异性结合。结论抗人CD4D1D2结构域多克隆抗体对H1V-1具有较强的抑制作用,为AIDS治疗和疫苗研发提供实验依据。 相似文献
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目的探讨艾滋病病毒1型B′亚型(HIV-1 B′)慢性感染人群连续两年血浆中和能力的变化,及其与疾病进展的关系。方法通过对两年前后127例HIV-1 B′亚型感染者进行CD4和病毒载量(VL)的检测,采用基于TZM-b1细胞的中和实验方法,检测感染者血浆分别针对HIV-1临床分离株1597和实验室适应株SF33两种病毒的中和能力。通过分析中和50%病毒进入细胞的血浆浓度(EC50)与CD4计数和VL的相关性,阐明血浆中和水平与疾病进展的关系。结果2005年和2007年CD4分别为(454±131)个/μl和(440±182)个/μl(t=1.02,P=0.309),VL(log10)分别为(4.03±0.89)拷贝/ml和(4.21±0.89)拷贝/ml(t=2.72,P=0.008);血浆对1 597株有中和活性的分别有91例(71.65)和75例(66.93%),其EC50分别为(65.15±0.51)和(55.59±0.59)(t=1.16,P=0.248);对SF33株有中和活性的分别有108例(85.04%)和101例(85.04%),其EC50为(205.65±0.52)和(139±0.47)(t=3.57,P〈0.001)。聚类分析显示,EC50与VL的关联性较强,但EC50的变化与VL的变化的相关性没有统计学意义(SF33∶r=0.07,P=0.41;1597∶r=0.12,P=0.18)。结论从2005年到2007年,慢性HIV-1B′亚型感染者的VL显著升高,尽管对病毒的中和水平降低,但血浆中和水平的降低与VL的升高没有直接的相关性。 相似文献