多药耐药相关蛋白基因在非小细胞肺癌中的表达

探讨多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）基因表达与非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）多药耐药（ＭＤＲ）发生的关系。采用半定量逆转录多聚酶链反应（ＲＴＰＣＲ）和免疫组织化学染色方法，结合体外化疗药敏实验，检测３２例ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰ基因表达水平和对９种化疗药物敏感性。结果：ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰｍＲＮＡ表达阳性率为７１．９％，癌旁肺组织中为１０％；ＭＲＰ蛋白表达阳性率为６５．６％，在肿瘤细胞胞膜和胞浆内均有表达，癌旁肺组织中未见表达；中～高分化癌中ＭＲＰｍＲＮＡ和蛋白表达明显高于低分化癌（Ｐ＜０．０５）；ＮＳＣＬＣ中ＭＲＰｍＲＮＡ表达和ＭＲＰ蛋白表达呈正相关（ｒ＝０．９７，Ｐ＝０．０００１）。ＮＳＣＬＣ中对长春新碱、足叶乙甙和阿霉素耐药组，其ＭＲＰ蛋白表达率明显高于敏感组（Ｐ＜０．０５）。表明ＭＲＰ基因表达是非小细胞肺癌原发性多药耐药的重要参与因素，它的过度表达通过转录水平和翻译水平调节实现，ＮＳＣＬＣ对长春新碱、足叶乙甙和阿霉素耐药的重要原因是ＭＲＰ蛋白表达，ＭＲＰ基因检测和体外化疗药敏实验对进一步阐明肺癌耐药机理有重要意义     

鼻咽上皮细胞中过表达PIN1 激活JNK信号通路上调CyclinD1的研究

目的：研究肽脯氨酰异构酶PIN1（prolylisomerase,PIN1）可能影响的肿瘤信号通路和相关基因,探讨鼻咽癌早期发生发展的机制。方法：运用慢病毒表达系统在鼻咽上皮细胞系 NP69 中建立PIN1 过表达细胞克隆株,real-time PCR、Western blot检测PIN1表达情况;肿瘤信号通路阵列荧光素酶实验筛选PIN1可能影响的细胞信号通路,Western blot加以验证。结果：稳定表达 PIN1 的NP69 细胞可激活一系列肿瘤信号通路其中激活丝裂原活化蛋白激酶MAPK/c-Jun氨基末端激酶JNK（MAPK/JNK） 信号通路,差异具有统计学意义（P<0.01）,核转录因子－κB（P=0.036）、癌基因Myc（P=0.048）信号通路变化具有统计学意义（P<0.05）。Western blot结果显示与对照组相比,稳定表达 PIN1 的NP69实验组可明显上调JNK 信号通路重要的下游转录因子c-Jun、c-Jun Ser63、c-JunSer73的表达量,最终上调下游基因细胞周期蛋白CyclinD1（t=-7.295,P=0.002）的表达。结论：稳定表达 PIN1 的NP69 细胞可激活MAPK/JNK信号通路,明显上调JNK 信号通路重要的下游转录因子c-Jun、c-Jun Ser63、c-JunSer73的表达量,最终上调下游基因细胞周期蛋白CyclinD1的表达,PIN1与鼻咽癌早期的发生发展密切相关。     

人脐带间质干细胞对大鼠的免疫毒性研究

目的:研究人脐带间质干细胞(UCMSC)对Wistar大鼠的免疫毒性作用。方法:SPF级Wistar大鼠112只分为4组:溶媒组(给予溶媒5 ml/kg)、低剂量组(给予人UCMSC 1×107个/kg)、高剂量组(给予人UCMSC 5×107个/kg)和对照组(给予大鼠UCMSC 1×107个/kg)。每组28只大鼠,雌雄各14只。大鼠尾静脉注射给药,2周1次,共注射4次。给UCMSC后每周进行受体鼠临床移植物抗宿主病(GVHD)评分,末次注射UCMSC后1、13周检测血IgG、IgM含量,CD3+、CD4+、CD8+T细胞数量,并对大鼠淋巴结、胸腺、脾脏进行脏器系数计算和组织病理学检查。结果:给予UCMSC后,各组大鼠的GVHD评分值均为0。末次给予UCMSC后1周,低、高剂量组雌性大鼠IgG[(0.65±0.12)、(0.63±0.14)g/L]和IgM含量[(0.06±0.01)、(0.06±0.01)g/L]明显高于溶媒组雄性大鼠[(0.41±0.17)g/L、(0.04±0.01)g/L,P<0.01或P<0.05];高剂量组雄性大鼠IgM含量[(0.05±0.01)g/L]明显高于溶媒组雄性大鼠[(0.03±0.01)g/L,P<0.01];对照组雌性、雄性大鼠IgM[(0.06±0.02)、(0.05±0.02)g/L]也明显高于溶媒组(P<0.01或P<0.05)。末次给予UCMSC后13周,各剂量组雌、雄性大鼠IgG、IgM与溶媒组相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。末次给予UCMSC后1周,低、高剂量组雌性大鼠的脾脏系数[分别为(0.274±0.016)%、(0.294±0.019)%]明显高于溶媒组[(0.232±0.012)%,P<0.01];高剂量组雄性大鼠的脾脏系数[(0.242±0.027)%]明显高于溶媒组[(0.202±0.012)%,P<0.01];对照组雌、雄性大鼠脾脏系数[分别为(0.261±0.019)%、(0.236±0.014)%]也明显高于溶媒组(P<0.05或P<0.01)。末次给予UCMSC后13周各组大鼠的脾脏和胸腺系数差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组大鼠CD3+、CD4+、CD8+T细胞百分比及CD4+/CD8+比值均在正常范围内。各组大鼠胸腺、脾脏和肠系膜淋巴结组织病理学检查均未见明显异常。结论:人脐带间质干细胞可引起正常Wistar大鼠免疫球蛋白含量和脾脏系数的升高,该作用具有一过性和可逆性。     

从络论治荨麻疹体会

荨麻疹是常见的皮肤病,常反复发作,提出以"毒郁络脉"思想为基础,从络论治荨麻疹。认为解毒通络为治疗荨麻疹的根本大法,可采用毫针通调经络、艾灸温通经络、锋针刺络放血强通经络;中药内服可以疏风通络、解毒和血,外用辛热药以温通经络、流畅气血,并重用某些毒性药物以毒攻毒。     

温肾固疏汤结合西医常规疗法治疗绝经后骨质疏松症肾阳虚证临床研究

目的:评价温肾固疏汤结合西医常规疗法治疗绝经后骨质疏松症肾阳虚证的临床疗效。方法:将符合入选标准的2017年1月-2019年12月本院105例绝经后骨质疏松症肾阳虚证患者采用随机数字表法分为对照组52例和观察组53例。对照组采用西医常规疗法治疗,观察组在对照组基础上加服温肾固疏汤,2组均连续治疗8周。分别于治疗前后进行...     

Ⅰ、Ⅱ类切口围手术期抗菌药物预防应用调查

目的 了解某院Ⅰ、Ⅱ类切口围手术期患者抗菌药物预防应用情况并进行合理性分析.方法 随机抽取各外科病房2009年3、4及5月份手术病例各10例,对围手术期患者预防性应用抗茵药物的种类、用药疗程及联用情况等进行分析.结果 所有手术病例均在围手术期预防性应用抗茵药物.Ⅰ类切口平均用药时间为6.14d.Ⅱ类切口平均用药时间为5.8d.手术后单一和二联用抗茵药物率分别为74.55%、25.45%.结论 该院Ⅰ类、Ⅱ类切口手术预防性应用抗茵药物存在明显不合理现象,应制定相应的监管措施并加强管理.     

乳腺癌患者部分外周血指标的变化及血清CA125、CA153、CEA检测的诊断价值

目的：分析乳腺癌患者部分外周血指标的变化及血清糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)和癌胚抗原(CEA)检测的诊断价值。方法：将2018年1月-2021年8月北京市健宫医院收治的经病理检查确诊为乳腺癌的102例患者作为恶性组(其中65例发生淋巴结转移作为转移组,37例无淋巴结转移作为未转移组),53例乳腺良性肿瘤患者作为良性组,另取同期于北京市健宫医院体检的48例健康人员作为对照组。检测各组外周血淋巴细胞计数(LYM)、中性粒细胞计数(NEU)、NEU与LYM的比值(NLR)、红细胞体积分布宽度(RDW)、前白蛋白和唾液酸水平,以及血清CA125、CA153和CEA水平。以病理检查结果为金标准,分析单项及联合检测对乳腺癌的诊断效能。结果：各组LYM、NLR、RDW、前白蛋白和唾液酸比较,差异均有统计学意义(P<0.05);各组NEU比较,差异无统计学意义(P>0.05)。三组血清CA125、CA153和CEA水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。CA125、CA153、CEA联合检测敏感度、准确度均高于各项指标单独检测(P<0.05)...     

辅酶NADH抑制人肝细胞株L02化疗凋亡损伤的作用

为研究辅酶NADH对顺铂（DDP）诱导的肝细胞凋亡的抑制作用及其分子机制，采用透射和扫描电镜检测肝细胞超微结构改变，碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞凋亡，RT－PCR检测p53和bcl-2基因表达变化，并用紫外分光光度法测定凋亡分子caspase-3和caspase－8活性水平的改变。结果显示，与DDP组比较，NADH／DDP组典型凋亡超微形态改变不明显，细胞凋亡明显下降，p53基因表达下降，bcl-2基因表达上升，caspase-3和caspase-8活性维持在低水平。提示NADH具有明显抑制DDP诱导肝细胞凋亡的作用。     

影响ⅢＢ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者放化疗后生存的临床因素分析

目的 探讨影响ⅢＢ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者放化疗后生存的临床因素以及化疗方案的选择对预后的影响。方法 收集1999~2005年经诊治的62例经病理学或细胞学证实的ⅢＢ～Ⅳ期非小细胞肺癌病例,全组病例均采用化、放、化疗的"夹心"治疗。化疗方案采用第二代的MVP、IVP、EP、VDS+DDP方案和第三代的NP、TP、GP方案。放疗均采用60Coγ射线常规外照射,剂量为65～76 Gy（未行肺校正）。部分Ⅳ期病例因脑转移或椎骨转移压迫脊髓而需首先照射脑或脊椎。用Kaplan-Meier法计算生存率,Logrank法行单因素检验,Cox模式行多因素分析。结果 1年生存率44.54%,2年生存率7.66%。中位生存10.75个月。不论是单因素检验或Cox模式多因素分析均显示患者的疾病分期、PS状态和治疗前体重减轻对患者生存期的影响有显著意义,在单因素检验时还显示化疗方案的选择和近期疗效影响患者的生存,而与患者的年龄、病理类型关系不大。结论 影响ⅢＢ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者放化疗后生存的重要因素是疾病分期、PS状态和治疗前体重减轻;化疗方案的选择对预后的影响仍需继续做更多的临床研究。     

FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响

目的探讨转染试剂FuGNE6与pGPu6/GFP/neo-GPC3-iRNA质粒不同比率对HepG2细胞转染效率的影响,并寻找最佳的转染比例。方法采用转染试剂FuGNE6(以6μl为例)与GPC3-iRNA质粒(μg)比率分别为6∶0.5,6∶1,6∶1.5,6∶2,6∶4,6∶6及GPC3-iRNA量固定1μg(以此为例),转染试剂与GPC3-iRNA质粒(μg)比率分别为2∶1,4∶1,6∶1,8∶1,10∶1进行转染。分别用荧光显微镜、流式细胞仪及PI染色实验观察细胞转染效率及48h细胞存活率。结果FuGNE6固定为6μl时,质粒用量从0.5-2μg转化效率逐步增高,超过2μg后转染效率反而大大降低,各比例组在48h细胞存活率都在95%以上;质粒量固定为1μg时,随转染试剂增加转化效率不断增大,超过6∶1时,随转染试剂增加,48h细胞存活率也逐渐下降。结论FuGNE6与GPC3-iRNA比例为6∶1.5时转化效率最大,且细胞存活率高。