双酚A致雄性生殖损害毒性通路的富集分析及关键凋亡信号通路的实验研究

目的 探讨低剂量双酚A(bisphenol A,BPA)暴露导致的雄性生殖损伤中可能涉及的关键毒性通路.方法 利用比较毒理基因组学数据库(Comparative Toxicogenomics Database,CTD)筛选BPA毒性相关基因,对其进行功能富集,探索可能的作用通路,确认相关通路中的关键基因.采用终浓度为0(DMSO对照组)、20、40、80 μmol/L BPA处理小鼠精原细胞株GC-2细胞72 h,观察细胞形态并检测凋亡发生率,采用RT-qPCR和Western blot检测关键基因mRNA和蛋白表达水平.结果 通过对CTD数据库中BPA相关的疾病进行筛选,得到1 460个相关基因,GO富集分析发现这些基因在生殖系统发育、生殖结构发育等分子生物过程中有明显富集,KEGG富集分析发现其在HIF-1和PI3K-Akt等信号通路中有明显富集(P＜O.01).可视化分析后得到通路上的关键基因分别为HIF-1a、PKC、P300/CBP以及PI3K、JAK、P53、BCL-2.BPA染毒GC-2细胞,发现凋亡率上升,且存在剂量-效应关系(P＜0.05).与对照组相比,染毒组PI3K和JAK的mRNA表达下调,P53和BCL-2上调(P＜0.05);PI3K和BCL-2的蛋白水平下调,P53则上调(P＜0.05).结论 PI3K-Akt信号通路在低剂量BPA暴露致GC-2细胞凋亡过程中可能发挥重要作用.     

静脉药物加药口消毒及使用医用输液瓶口贴的必要性研究

目的 研究静脉药物加药口消毒和使用医用输液瓶口贴的必要性。方法 在静脉药物配置中心的洁净操作环境下,向60个批次的静脉输液中加入10ml灭菌注射用水模拟配置加药过程,参照《中国药典》2010版二部附录Ⅺ J中细菌计数方法,对消毒组和未消毒组、使用密封消毒袋后医用输液瓶口贴组和未使用组的微生物污染情况进行统计分析。结果 消毒组和未消毒组在统计学意义上有显著差异（P>0.05）,在使用密封消毒袋后,贴医用输液瓶口贴组和未贴组在统计学意义上没有显著差异。结论 配制静脉药物时,加药口需要进行消毒以减少加药时微生物污染的风险,使用密封消毒袋后,30 min内静脉输液在病区使用不需要贴医用输液瓶口贴。     

直接蛋白沉淀-超高效液相色谱法测定氟尿嘧啶血药浓度

建立直接蛋白沉淀-超高效液相色谱法测定血浆中微量氟尿嘧啶的方法。以6%高氯酸为沉淀剂,5-氯尿嘧啶为内标物,样品经涡旋振荡等处理后,高速离心获取上清液作为供试液。供试液测定采用Acquity HSS T₃色谱柱,水-乙腈为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量为5 μL,柱温为20 ℃。方法的专属性、准确度、精密度、线性等指标经验证后完全符合定量测定要求,与传统的测定方法相比,可显著缩短进样分析时间、降低试剂成本。本方法已经被成功用于临床病人的血药浓度检测,具有良好的临床应用前景。     

加温至40℃复方碘醇复配型皮肤消毒剂在手术患者中的应用

目的：探讨复方碘醇复配型皮肤消毒剂加温至40℃在手术患者中的应用效果。方法将100例手术患者按随机数字表法随机分成观察组50例与对照组50例,观察组将复方碘醇复配型皮肤消毒剂加温至40℃,对照组采用常温法,比较两组消毒剂有效碘醇的含量及手术区皮肤消毒结果及患者寒颤发生率。结果两组检测结果均在指定的有效范围之内,观察组加温后有效碘含量（0．102±0．0015）％（g/ml）,乙醇含量（68．1±1．54）％（g/ml）,均低于对照组,差异有统计学意义（t值分别为-12．88,-4．594;P＜0．05）。两组患者皮肤消毒后采样均无细菌生长。皮肤消毒10 min后,观察组患者寒颤发生率为4．0％,对照组寒颤发生率为24．0％,两组比较差异有统计学意义（χ2＝8．306,P＜0．01）。结论将复方碘醇复配型皮肤消毒剂加温至40℃,对有效碘、乙醇浓度及手术区皮肤消毒效果影响小,手术患者寒颤发生率低。     

枸橼酸西地那非凝胶剂基质考察及体外溶出度测定

目的:考察枸橼酸西地那非凝胶剂的基质,并对其体外溶出度进行测定.方法:建立枸橼酸西地那非含量测定高效液相色谱法,筛选了该凝胶剂的处方工艺.结果:HPLC法以pH 3.0三乙胺-甲醇-乙腈(58:25:17,V:V:V)作为流动相;采用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),在5～100μg·mL-1的浓度范围内枸橼酸西地那非线性关系良好,线性方程为Y=25.58X-2.9823,r2=0.9997;通过单因素实验考察,以10％明胶-3％蔗糖作为凝胶基质的处方;通过药物含量及溶出度测定,在1～3 mg·mL-1药物浓度范围内,药物回收与投药量存在线性关系,Y=0.823X+0.053(r2=0.9989),可作为凝胶剂药物含量设定的参考;且在pH 1.0盐酸介质中,3种药物浓度的凝胶剂均有较好的溶出行为.结论:筛选出枸橼酸西地那非凝胶剂优化处方,有利于小儿服用.     

番茄表层硫丹残留的近红外快速检测方法

选择经Rubberband 64点基线校正和二阶导数(平滑窗口为17,拟合阶数为2)预处理的近红外漫反射光谱,采用Boosting偏最小二乘法(PLS),利用5个子模型建立了番茄表层硫丹残留量预测模型,并对模型的预测性能进行验证。模型的定标系数为0.992,预测残留量范围为5.1~134.1 ng,预测均方根误差（RMSEP）和校正均方误差（RMSECV）分别为2.79 和2.82,训练集和预测集的回收率范围分别为（100.1±1.4）%和（98.9±2.6）%。结果表明：本法快速、准确,有望成为新的蔬菜表层农药残留监测方法。     

静脉药物加药口消毒及使用医用输液瓶口贴的必要性考察

目的:考察静脉药物加药口消毒和使用医用输液瓶口贴的必要性.方法:在静脉药物配置中心的洁净操作环境下,向60份静脉输液中加入10mL灭菌注射用水,模拟配制加药过程,按照《中国药典》2010版二部附录ⅪJ中细菌计数方法,对消毒组和未消毒组、医用输液瓶口贴组和未使用组的微生物污染情况进行统计分析.结果:消毒组和未消毒组在统计学意义上有显著差异(p＜0.05),在使用密封消毒袋后,贴医用输液瓶口贴组和未贴组在统计学意义上没有显著差异(P＞0.05).结论:配制静脉药物时,加药口需要进行消毒,以减少加药时微生物污染的风险;使用密封消毒袋后,30 min内静脉输液不需要贴医用输液瓶口贴.     

临床药师参与的血药浓度危急值管理实践

血药浓度危急值管理具有其特殊性，既是医院危急值管理的一部分，也是规范临床用药、保障患者用药安全的重要手段。因此，医院应重视血药浓度危急值的管理，针对临床检测发现的血药浓度危急值，应及时反馈、沟通处理。在医疗改革日益深化的今天，专科临床药师是医院药学技术服务转型的主力军。本院从2013年起，临床药师、检测药师和医护人员共同参与、逐步探索，建立了患者的血药浓度危急值管理和临床干预体系，对临床检测的血药浓度危急值进行预警、跟踪和临床干预。所建立的血药浓度危急值管理模式，显著提高了我院血药浓度危急值的上报率，同时也降低了危急值患者药品不良反应的发生率。     

汉族人外周血二氢尿嘧啶脱氢酶活力影响因素的研究

目的：考察年龄、性别、肝功能、肾功能以及是否怀孕这五大因素对汉族人外周血二氢尿嘧啶脱氢酶（DPD）活力的影响,为制定符合我国汉族人群实际的氟尿嘧啶类药物使用指南提供参考。方法：选取460份汉族人的血样分成5个大组,以外周血全血温孵的方法分别考察年龄、性别、肝功能、肾功能以及是否怀孕这五大因素对外周血DPD活力的影响。结果：汉族人外周血DPD活力与年龄负相关,与性别无关,当个体肝肾功能异常时,外周血DPD活力降低,当个体怀孕时,外周血DPD活力增强。结论：使用氟尿嘧啶类药物时,当患者为老人或肝肾功能异常时,应适当减量;当患者为无法避免用药的孕妇时,要注意怀孕导致药物代谢的异常加快。     

HIF-1α/ALYREF/PKM2信号轴在膀胱癌糖酵解和肿瘤发生中的作用

背景与目的 丙酮酸激酶肌肉同工酶M2(pyruvate kinase muscle isozyme M2,PKM2)是糖酵解的限速酶,参与肿瘤的代谢和生长。PKM2在肿瘤中的调控网络复杂,在膀胱癌中尚未得到充分研究。PKM2 mRNA的5-甲基胞嘧啶(5-methylcytidine,m5C)修饰可能参与了膀胱癌的发病过程,机理有待深入研究。本文旨在探讨PKM2在膀胱癌中的生物学功能及其调控机制。方法 用Western blotting、qRT-PCR和免疫组织化学方法检测PKM2和Aly/REF输出因子(Aly/REF export factor,ALYREF)的表达水平。通过一系列体内实验和体外试验,研究膀胱癌细胞的生物学过程。通过RNA免疫沉淀、RNA测序和双荧光素酶报告分析,探讨PKM2在膀胱癌中的调控机制。结果 在膀胱癌中,我们首次证明了ALYREF稳定了PKM2的mRNA,并与其3’-非翻译区的m5C位点结合。ALYREF过表达通过PKM2介导的糖酵解促进膀胱癌细胞增殖。此外,PKM2和ALYREF高表达与膀胱癌患者生存不佳相关。最后,我们发现缺氧诱导因子1α(hypoxi...