琵琶甲多糖的提取分离、结构表征及生物活性研究

目的 研究昆虫琵琶甲多糖的结构表征及生物活性。方法 采用水提醇沉和分级沉淀法制备得琵琶甲粗多糖组分BP50、BP75和BP90,并用葡聚糖凝胶G-75进一步分离纯化BP90得琵琶甲多糖组分BP90-Ⅱ。用苯酚-硫酸法、BCA法、HPLC、凝胶渗透色谱联用多角度激光光散射和示差检测器、红外光谱法分析表征多糖结构特征;测定各组分清除DPPH、ABTS和OH自由基的能力来评估抗氧化活性;此外,采用脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞初步研究琵琶甲多糖的抗炎活性。结果 多糖组分BP90的抗氧化能力最强。BP90-Ⅱ的总糖、蛋白质含量分别为82.13%和11.28%。BP90-Ⅱ的红外光谱呈现多糖的典型特征吸收峰,重均分子质量为56 200 g·mol^–1。BP90-Ⅱ是由甘露糖、鼠李糖、氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和岩藻糖10种单糖组成的杂多糖,其中葡萄糖含量最高,达74.85%。结果显示琵琶甲多糖BP90-Ⅱ对脂多糖诱导产生的NO有一定的抑制作用,当BP90-Ⅱ浓度为10 μg·mL^–1和100 μg·mL^–1时,NO抑制率分别为(14.86±1.63)%、(36.43±5.62)%。结论 琵琶甲多糖具有良好的抗氧化能力和一定的抗炎活性,具有一定的药用和食用开发价值。     

外源性BDNF对急性高眼压后大鼠视网膜ERK1/2磷酸化的影响

为研究脑源性神经生长因子(BDNF)干预对急性高眼压后大鼠视网膜磷酸化的细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)表达变化的影响,本实验将成年大鼠随机分为单纯高眼压组、BDNF预处理高眼压组和溶媒预处理高眼压组,BDNF预处理高眼压组和溶媒预处理高眼压组动物左眼于加压前2d分别给予BDNF或溶媒预处理,右眼设为正常对照。各组动物左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压并维持60min,动物分别存活1、3、7、14d后处死,冰冻切片行p-ERK的免疫组织化学染色。结果显示与正常对照相比,单纯高眼压组急性高眼压后p-ERK表达下调(P<0.05),1、3、7d组内核层出现p-ERK阳性细胞;溶媒预处理高眼压组实验结果与单纯急性高眼压组相似;BDNF预处理高眼压组急性高眼压后1、3、7d时p-ERK的表达与正常对照组相似,7d和14d出现了重新分布。此结果提示外源性BDNF可能通过促进急性高眼压后视网膜ERK1/2的活化对受损的视网膜起保护作用。     

氟西汀对条件恐惧消退大鼠边缘下皮质Erk1/2磷酸化的影响

目的研究氟西汀对条件恐惧消退大鼠内侧前额叶皮质边缘下区p-Erk1/2表达的影响。方法 16只成年雄性大鼠随机分成单纯条件恐惧消退组和氟西汀干预条件恐惧消退组,实验动物采用单调声配对电击大鼠足底造成条件恐惧刺激模型,氟西汀干预组灌胃给予氟西汀14 d,对照组灌胃给予生理盐水。后行消退训练并检测动物的静止不动时间(freezing time);处死动物,冷冻切片行内侧前额叶皮质边缘下区p-Erk1/2的免疫组织化学染色。结果行为学结果显示氟西汀干预组大鼠条件恐惧消退训练后静止不动时间百分比显著低于单纯条件恐惧消退组;p-Erk1/2的免疫组织化学染色显示氟西汀干预组大鼠条件恐惧消退训练后内侧前额叶皮质边缘下区p-Erk1/2表达明显增加,p-Erk1/2阳性细胞显著增多。结论氟西汀促进大鼠恐惧记忆的消退,其作用机制可能为通过促进大鼠内侧前额叶皮质边缘下区Erk1/2活化而发挥作用。     

BDNF对急性高眼压后大鼠视网膜三种钙结合蛋白表达的影响

目的：检测外源性BDNF对急性高眼压后大鼠视网膜Parvalbumin（PV），calbindin D-28k（CB）和calretinin（CR）表达的影响。方法：72只SD大鼠随机分成高眼压组、溶媒预处理高眼压组和BDNF预处理高眼压组，每组动物左眼制作急性高眼压模型，右眼为正常对照，动物分别存活1、3、7或14d。用免疫组化方法检测视网膜PV、CB和CR的表达变化。结果：溶媒预处理高眼压组中PV、CB和CR的表达与高眼压组相似。高眼压组中，随着再灌时间延长，内层视网膜中PV和CB标记的神经元数先下调再逐渐恢复，而CR标记的神经元数逐渐减少；再灌1d时PV和CR具有从内核层到内网层的重新分布。在BDNF预处理高眼压组，PV、CB和CR标记的神经元数在再灌1d、7d和14d时与高眼压组比较无明显差异，但在再灌3d时，明显高于后者（P〈0．05）。结论：BDNF预处理对急性高眼压后视网膜的保护作用可能与其再灌早期上调钙结合蛋白的表达有关。     

条件恐惧刺激对成年大鼠海马齿状回新生神经细胞的影响

目的 研究条件恐惧刺激后大鼠海马内新生神经细胞的表达变化,探讨恐惧情绪性记忆的神经牛物学机制.方法 24只成年雄性大鼠随机分成条件恐惧刺激组和对照组,实验动物刺激前3 d腹腔内注射Brdu标记神经干细胞,实验组动物采用单调声配对电击大鼠足底造成条件恐惧刺激模型,对照组仅给予单调声刺激.刺激前和刺激后7,14d分别行动物行为学检测(静止不动时间);动物存活7,14d后处死,冰冻切片行Brdu的免疫组织化学染色.结果 条件恐惧刺激后,行为学检测结果显示实验组大鼠静止不动时间百分比显著高于对照组[分别为(88.68%、91.33%)和(11.18%、14.23%),P<0.01]及电击前(24.11%、16.11%,P<0.01);Brdu免疫组化染色显示条件恐惧刺激后实验组7,14d组大鼠海马齿状回内Brdu免疫阳性细胞少于同时间点的对照组[分别为(1364±21)个、(296±22)个和(1567±28)个、(580±5)个,14d组差异具有显著性P<0.05].结论 条件恐惧刺激后大鼠海马齿状回新生神经元的减少可能与恐惧等情绪性记忆有关.

Abstract：

Objective To investigate neurogenesis in the dentate gyrus of adult rat following conditioned fear stimulus.Methods 24 adult male rats were randomly divided into conditioned fear stimulus group and control group,and all rats were intraperitoneally injected bromodeoxyuridine(BrdU)3 days before conditioned fear stimuli.Animals in conditioned fear stimulus group were given monotone matching foot shock and made conditioned fear stimulus model,animals in control group only give monotone.Freezing time was detected before stimuli and 7th,14th days after stimuli,then rats were sacrificed 7th or 14th day after fear conditioned stimulus,and immunohistochemistry for Brdu was detected.Results Behavioral assessment showed that the percents of freezing time in conditioned fear stimulus group 7th,14th days after conditioned fear stimulus were significantly high(88.68%,91.33%)than those in control group(11.18%,14.23%,P<0.01)and before stimulus(24.11%,16.11%,P<0.01).Compared to control group(1567±28,580±5),Brdu positive cells in dentate gyrus of rat in conditioned fear stimulus group(1364±21,296±22)were decreased,and it reached to a statistical significance on 14th day (P<0.05).Conclusion The decreased neurogenesis in the dentate gyrus of adult rat following conditioned fear stimuli may have relation to fear and other emotion memory.     

中西医联合治疗帕金森病64例临床观察

目的观察补肾活血汤和针灸联合西药治疗帕金森病的临床疗效。方法64例帕金森病患者随机分为对照组与治疗组。各组32例。其中对照组给予常规美多巴治疗，治疗组在此基础上加用补肾活血汤与针灸联合治疗，疗程结束后比较两组疗效。结果治疗组总有效率为84．38％，显著高于对照组71．88％的总有效率，差异有统计学意义（P〈0．05）；治疗组与对照组患者治疗后日常生活能力及运动功能均明显改善，且治疗组改善程度优于对照组，组间差异有统计学意义（P〈0．05）。两组美多巴最低维持量均有下降，仅治疗组美多巴用量减少有统计学意义（P〈0．05）。两组治疗前后比较H—Y改良分级无变化（P〉0．05）。结论补肾活血汤、针灸与西药多美巴片的联合应用对于帕金森病治疗具有较好疗效，优于单纯西药治疗。     

脑源性神经营养因子对急性高眼压后大鼠视网膜Mueller细胞的影响

目的：检测脑源性神经营养因子（BDNF）干预急性高眼压后大鼠视网膜Mueller细胞谷氨酰胺合成酶（GS）和谷氨酸／天冬氨酸转运体（GLAST）表达的变化，探讨BDNF保护节细胞（RGCs）的可能机制。方法：成年大鼠分为3个BDNF干预组和3个溶媒对照组并进行玻璃体内注射。2d后将预处理动物左眼眼压升高至闪光视网膜电图b波消失的临界眼压且维持缺血60min。实验动物分别存活1、3或7d后通过免疫组织化学检测大鼠视网膜GS和GLAST的表达变化。结果：与正常对照组比较，溶媒对照组GS和GLAST在存活1d和3d时表达上调，7d时下降；BDNF干预组未出现表达明显变化。结论：BDNF可能不是通过Mueller细胞上调GS和GLAST，降低胞外Glu来保护RGCs。     

艾滋病HIV因子暴露人群的心理健康状况调查分析

目的 探讨暴露于HIV因子的人群的心理健康状况。方法 采用症状自评量表(SCL—90)对43例HIV因子暴露人群的心理健康状况进行问卷调查分析。结果 暴露于HIV因子的人群的SCL—90总分、阳性项目数、躯体化、强迫、抑郁、焦虑、敌对及精神病性因子分得分均显著高于健康对照组(t=3.344～6.903,P<0.01),恐怖、偏执因子分得分高于健康对照组(t=1.880～2.309,P<0.05)。结论 暴露于HIV因子的人群存在较严重的心理问题,需加强健康教育。