顺铂联合唑来膦酸对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制

目的 观察顺铂联合唑来膦酸对肺癌A-549细胞增殖的影响并探讨其作用机制.方法 以噻唑蓝(MTT)比色法观察顺铂联合唑来膦酸对A549细胞增殖的影响,以Annexin-V/PI双染法检测细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DNA损伤检查点蛋白调节因子1(MDC1)mRNA的表达.结果 顺铂联合唑来膦酸对A549细胞增殖的抑制率(39.16±4.94)％高于顺铂(16.87±2.50)％、唑来膦酸(19.66±4.57)％;联合用药诱导A549细胞的凋亡率(32.30±0.50)％较顺铂(23.90±2.46)％、唑来膦酸(18.87±3.04)％上升;联合用药后A549细胞MDC1 mRNA的相对表达水平(0.134 ±0.037)较顺铂(0.356±0.033)、唑来膦酸(0.208 ±0.040)下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 顺铂、唑来膦酸可抑制肺癌A549细胞的增殖,诱导其凋亡;顺铂联合唑来膦酸抑制A549细胞的增殖具有协同作用;其协同作用可能与下调MDCl mRNA表达有关.     

谷胱甘肽S转移酶基因多态性与NSCLC化疗疗效的关系

59例非小细胞肺癌（NSCLC）患者，均采用以顺铂为基础的化疗方案治疗，用聚合酶链反应-连接酶检测反应（PCR—LDR）检测其GSTM1、GSTPiA313G基因多态性，并分析其与化疗疗效的关系。结果本组患者GSTM1基因缺失28例，基因未缺失31例；GSTP1基因A／G、G／G和A／A型分别有20、7、32例。GSTM1基因缺失者化疗有效率为42．86％，明显高于基因未缺失者的32．26％，P〈0．05。携带GSTPiA／A基因型者化疗有效率为31．25％，明显低于携带A／G、G／G基因型者的40．00％和51．74％，P均〈0．05。认为GSTM、GSTPi基因多态性与铂类药物治疗NSCLC的化疗疗效相关，可作为预测其化疗疗效的指标。     

小干扰RNA对结肠癌细胞株TLR4沉默效果的分析

目的 建立SYBR Green荧光定量聚合酶链反应(PCR) TLR4检测方法,构建标准曲线,并测定小干扰RNA( siRNA)沉默TLR4的效率.方法 设计TLR4 qPCR扩增引物,以SYBRGreen qPCR master mix,95℃15min,95℃15s,60℃ 1min 50个循环进行扩增,同时1:4稀释阳性对照,构建标准曲线.以65℃为起点,0.5℃为阶梯逐步增加至95℃,于每个温度点测定荧光强度,获得熔解曲线.LipofectamineTM 2000介导不同浓度的siRNA(60、80、100 nmol/L)转染SW480细胞6h后撤除.分别于24、48 h后,使用qPCR检测TLR4 mRNA水平表达变化.结果 (1)SYBR Green定量检测TLR4扩增曲线呈典型S型动力学曲线,扩增效率为100.9％,熔解曲线成单峰,熔解温度为81.5℃.(2) siRNA在24h、80 nmol/L时,TLR4 Ct值为27.72,较未干扰组(25.96)明显增加.(3)琼脂糖凝胶电泳显示转染组(24h、80 nmol/L)在PCR扩增28个循环时不能被检出,而阳性对照则扩增条带清晰.结论 (1) qPCR检测TLR4方法稳定,结果可靠.(2) siRNA浓度80 nmol/L,可对肠癌SW480细胞的TLR4 24 h时的表达水平明显抑制.     

当归制剂对脂多糖诱导的肝组织炎性损伤的影响及分子机制初探

目的　探讨应用当归制剂对脂多糖诱导的肝组织炎症反应的影响及其分子机制。方法　将ICR小鼠分为用药组、实验对照组及正常对照组 3组 ,采用脂多糖 (LPS)配合卡介苗 (BCG)注射法建立小鼠 (用药组和实验对照组 )肝脏炎性损伤模型 ,经腹腔给用药组小鼠注射当归制剂 ,给实验对照组注射等量生理盐水 ,连续给药 10d后 ,常规组织病理学观察 ,比较小鼠肝组织炎症反应情况。同时用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测小鼠脾脏单个核细胞TNF -αmRNA表达的变化。结果　用药组小鼠肝脏的炎症反应明显弱于实验对照组 (P <0 .0 5 ) ;肝脏炎性损伤小鼠脾脏单个核细胞TNF -αmRNA的表达在注射LPS后 4h较正常对照组小鼠明显增加 (P <0 .0 1) ,在注射后 7h时达到峰值 ,而后有所下降 ;在注射LPS后 7h ,用药组小鼠TNF -αmRNA的表达与实验对照组相比 ,无显著差异。结论　当归制剂能显著抑制脂多糖诱导的肝组织炎症反应 ,明显减轻肝组织的炎性损伤 ,然而其主要抑制作用可能并非通过影响炎性介质TNF -αmRNA的表达来实现。     

二氢嘧啶脱氢酶在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨二氢嘧啶脱氢酶(DPD)在胃癌组织中的表达和临床意义.方法 以β-actin为内参照,应用半定量RT-PCR技术检测51例T3或T4化疗前胃癌组织中DPD的mRNA水平.结果 以DPD mRNA表达水平的中位数(0.68)为界,将患者分为高表达组和低表达组.DPD mRNA高表达组(＞0.68)和低表达组(≤0.68)之间总生存期、无瘤生存期及1、2年生存率差异均有统计学意义(P＜0.05);而DPD mRNA表达与年龄、性别、淋巴结转移及组织学分级均无相关性(均P＞0.05).结论 检测DPD mRNA表达水平可预测胃癌患者的预后.     

协同刺激分子B7-H3在结直肠癌中表达的临床意义

目的探讨协同刺激分子B7-H3在结直肠癌中的表达与患者临床病理参数的相关性。方法收集2003年1月至2003年12月在苏州大学附属第四医院行手术切除术的结直肠癌患者组织标本98例,采用免疫组织化学方法检测结直肠癌组织中协同刺激分子B7-H3的表达,分析B7-H3分子在结直肠癌组织中的表达水平。结果 B7-H3分子在结直肠癌癌灶及间质中均高表达,与患者的年龄、性别、肿瘤分期、分化程度无相关性(P>0.05),但间质高表达B7-H3分子与患者淋巴结转移显著相关(P<0.05)。结论协同刺激分子B7-H3在结直肠癌间质中高表达与患者淋巴结转移相关,对结直肠癌患者的预后判断具有潜在的临床应用价值。     

低分子肝素对人胃癌裸鼠原位移植模型肿瘤生长、转移及趋化因子受体4表达的影响

目的:探讨低分子肝素(low molecular weight heparin ,LMWH)对人胃癌裸鼠原位移植模型中肿瘤生长、转移及趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)表达的影响.方法:应用原位移植方法建立人胃癌裸鼠原位移植模型,模型建立后7 d时将裸鼠随机分为对照组(0.9%氯化钠溶液)、化疗组(5-氟尿嘧啶)和LMWH组(低分子肝素钙),分别每周给药2次,共5周.第6周牺牲动物,观察裸鼠胃癌原位模型的肿瘤生长及转移情况.应用RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌组织中CXCR4 mRNA和蛋白的表达水平.结果:化疗组和LMWH组的肿瘤体积比对照组明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.05);LMWH组胃癌原位模型的肿瘤转移率(20%)低于对照组(70%),差异有统计学意义(P＜0.05),而与化疗组(11%)之间无明显差异(P＞0.05);LMWH组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均较对照组和化疗组下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:LMWH具有抑制人胃癌裸鼠原位移植模型中肿瘤生长和转移的作用,可能与肿瘤组织中CXCR4表达下降有关.     

培美曲塞联合顺铂方案治疗转移性乳腺癌的临床观察

目的观察培美曲塞联合顺铂方案治疗复发转移性乳腺癌的临床疗效及不良反应。方法 32例转移性乳腺癌患者,采用培美曲塞联合顺铂化疗方案：培美曲塞500mg/m2,顺铂75mg/m2,静脉滴注,每3周重复。每2个化疗周期评价疗有效率（RR）、疾病控制率（DCR）和不良反应,计算疾病进展时间（TTP）和总生存期（OS）。结果 32例入组患者均可评价临床疗效及不良反应,其中CR1例,PR11例,SD6例,PD14例。随访时间为12.5个月,中位TTP为4.2个月,中位OS为8.5个月。最常见的不良反应是消化道反应和中性粒细胞减低。结论即使转移性乳腺癌患者已对多种化疗药物产生耐药,培美曲塞联合顺铂方案仍是治疗转移性乳腺癌的有效方案,且其血液学和非血液学毒性耐受性较好。     

慢性心力衰竭患者营养筛查工具综述

慢性心力衰竭是心血管疾病的终末阶段,此阶段营养不良发生率高,严重影响预后。对慢性心力衰竭患者进行早期营养风险筛查,初步判断患者营养状态,对于营养评定、营养干预及改善预后具有积极意义。本文对7种常用慢性心力衰竭营养筛查工具进行综述,比较不同筛查工具的优缺点,为临床医护人员选择合适营养筛查工具提供参考。