黄芪治疗复发性阿弗他溃疡疗效分析及作用机理探讨

目的:观察黄芪治疗复发性阿弗他溃疡(RAU)的临床疗效,并探讨黄芪对RAU患者失衡表达转录因子T-bet/GATA-3的调节作用.方法:健康对照组25例,RAU患者65例随机分为RAU常规治疗组和黄芪治疗组,观察治疗后1年溃疡复发情况;酶联免疫吸附测定法检测血清中白细胞介素(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)含量;Western blot法检测外周血单个核细胞中T-bet和GATA-3蛋白表达.结果:黄芪治疗组总有效率为90.91%,显著高于常规治疗组25%(P＜0.01).血清IL-4含量,对照组(25.45±3.69)pg/ml,显著低于RAU常规治疗组(42.32±4.47)pg/ml,(P＜0.01),治疗组(32.35±5.24)pg/ml显著高于对照组(P＜0.01).血清IFN-γ含量,对照组(24.53±2.69)pg/ml显著高于常规治疗组(17.57±0.68)pg/ml(P＜0.01),黄芪治疗组(21.60±3.03)gp/ml显著低于对照组(P＜0.01),显著高于常规治疗组(P＜0.01).外周血单个核细胞中T-bet蛋白表达,健康对照组(0.75±0.17),显著高于常规治疗组(0.21±0.09)(P＜0.01),黄芪治疗组(0.56±0.23),显著高于常规治疗RAU组(P＜0.01),显著低于对照组(P＜0.01);外周血单个核细胞中GATA-3蛋白表达,健康对照组(1.06±0.20),显著低于常规治疗组(1.82±0.17)(P＜0.01),黄芪治疗组(1.04±0.27),显著低于常规治疗组(P＜0.01),与对照组比较无统计学差异(P＞0.05).结论:黄芪通过调节转录因子T-bet和GATA-3的平衡表达,纠正RAU患者Th1/Th2细胞亚群失衡的免疫异常,有效治疗RAU溃疡复发.     

量子点标记技术在生物医学中的研究进展

量子点（QDs）又称半导体纳米微晶体，是一种由Ⅱ～Ⅵ族或Ⅲ～Ⅴ族元素组成的约2～20nm的纳米晶粒，具有可调节和对称的发射光谱、光化学稳定性好、激发光谱宽且连续、粒度的不同发射光的颜色也不同等特点，可用于多种标记物的同时检测，极大地促进了荧光标记在生物医学中的应用。该技术具有当前体外和体内标记所没有的独特优势，根据特定的检测对象，可选择合适的生物分子进行修饰。     

Med19基因沉默对p53野生型和突变型乳腺癌细胞紫杉醇化疗疗效的影响

目的：探讨下调中介体（mediator,Med）19表达是否增加紫杉醇(pacliatxel, PTX)对p53野生型和突变型乳腺癌细胞化疗的疗效。方法：构建Med19RNA干扰（RNAi）慢病毒,分别感染p53野生型的乳腺癌细胞MCF-7和p53突变型的乳腺癌细胞MDA-MB-231,两种细胞均分为Med19基因敲减组（KD组：细胞感染pGcscil-Med19-siRNA-GFP ）、空载体感染组（NC 组：细胞感染pGcscil-Med19-NC-GFP）、对照组（CON组：未感染慢病毒的乳腺癌细胞）,荧光显微镜观察慢病毒感染效率。Western blotting检测Med19基因沉默后各组细胞内P53、磷酸化P53（pP53）、P21蛋白表达水平的变化。紫杉醇分别作用于Med19基因沉默前后的MCF-7和MDA-MB-231细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率的变化。结果：KD组和NC组细胞的荧光感染效率均大于90%,表明获得了满意的感染效率。与CON组和NC组相比,两种细胞KD组的Med19蛋白表达水平均下降,差异有统计学意义（均P<0.05）。MCF-7细胞KD组P53、pP53、P21蛋白表达上调,差异有统计意义（均P<0.05）。在0.01～50 μg/ml 范围内,紫杉醇抑制两种乳腺癌细胞的生长增殖并呈浓度依赖性（P<0.05）,对KD组的抑制率和细胞凋亡率均高于NC组及CON组,差异有统计学意义（均P<0.05）;但MDA-MB-231细胞各组间抑制率差异无统计学意义（均P>0.05）。10 μg/ml紫杉醇导致两种细胞的KD组和NC组均出现G2/M期阻滞,并且MCF-7细胞KD组G0/G1期细胞较NC组显著增加（P<0.05）。结论：Med19基因沉默增强紫杉醇对p53野生型乳腺癌MCF-7细胞化疗的疗效,其机制可能为增强了p53基因的表达活化,通过其下游基因p21 调节细胞周期、促进细胞凋亡。     

新生儿溶血3项试验与血型抗体 IgG亚型的相关性分析

目的 探讨新生儿溶血3项试验与血型抗体IgG亚型的相关性,评价IgG抗体亚型检测的临床价值,为临床后续治疗提供理论依据。方法 对2018年7月～2019年7月在笔者医院分娩的65例产前血型抗体高效价的孕产妇进行产后新生儿血型血清学检测(ABO 58例,Rh 7例),采用微柱凝胶技术分别检测新生儿血型、溶血病3项试验和血型抗体IgG亚型含量。结果 65例新生儿中有42例溶血试验证实为与血型有关的新生儿溶血病。31例患儿血清中检测到IgG1亚型含量升高,27例IgG2升高,10例IgG3升高,IgG1和IgG3亚型升高的新生儿均出现重症高胆红素血症,而5例仅IgG4亚型升高的新生儿均未出现溶血相关的高胆红素血症,提示新生儿IgG1和IgG3抗体亚型的含量与高胆红素血症的危重程度密切相关。溶血3项试验对诊断新生儿溶血病具有一定的参考价值,但对判定新生儿溶血病的严重程度,其结果的准确性不高,临床上不能以此作为评估患儿黄疸严重程度和干预治疗的指标。结论 新生儿溶血3项试验与血型抗体IgG亚型含量具有一定的相关性,溶血病严重程度与血型抗体IgG1和IgG3亚型含量呈正相关、对溶血3项试验阳性的新生儿有必要进行IgG抗体亚型分析,从而实现个体化精准治疗。     

UGCG通过调控MDR1/P-gp参与人结肠癌奥沙利铂耐药的初步研究

目的 建立人结肠癌耐奥沙利铂（L-OHP）细胞株,检测该细胞株的多药耐药性并初步探讨其可能的耐药机制。方法 以人结肠癌细胞HCT116为对象,采用药物浓度梯度递增诱导法建立人结肠癌耐奥沙利铂细胞株HCT-116/L-OHP。CCK-8法检测L-OHP、顺铂（DDP）、5-氟尿嘧啶（5-Fu）对亲本细胞和耐药细胞株的半数抑制浓度（IC50）。使用UDP-葡萄糖神经酰胺糖基转移酶（UGCG）siRNA转染HCT-116/L-OHP细胞,实时荧光定量 PCR和Western blot检测干扰前后UGCG基因和多药耐药基因1（MDR1）mRNA及其编码的蛋白表达水平。结果 HCT-116/L-OHP对L-OHP的耐药指数为10.5,与DDP有一定程度的交叉耐药,耐药指数为4.61,但对5-Fu无交叉耐药。耐药细胞HCT-116/L-OHP中UGCG、MDR1 mRNA和UGCG、P-糖蛋白（P-gp, MDR1编码的蛋白）表达均增加,相比HCT-116细胞,差异具有统计学意义（P<0.05）。UGCG siRNA成功抑制HCT-116/L-OHP细胞中UGCG的表达,各干扰组MDR1 mRNA、P-gp表达减少,与对照组相比差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 成功构建了人结肠癌耐药细胞株;UGCG基因通过调控MDR1/P-gp的表达参与人结肠癌奥沙利铂的耐药机制的形成。     

PDGF-D对人肝癌细胞增殖及VEGF表达影响研究*

目的:研究血小板源性生长因子D（PDGF-D）对人肝癌细胞株BEL-7402增殖及其血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法:体外培养肝癌细胞株BEL-7402和肝癌旁非瘤性细胞株QSG-7701,采用RT-PCR 方法检测PDGF-D 与PDGFR βmRNA 在BEL-7402和QSG-7701的表达情况;将浓度分别为0（对照）、5、10、20、50、100、200 μ g/mL 的人重组PDGF-DD蛋白加入BEL-7402中,采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测肝癌细胞的生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期变化;半定量RT-PCR 检测VEGF及PDGFR β mRNA 表达情况,ELISA 检测PDGF-DD干预细胞后培养上清中VEGF蛋白的表达情况。结果:PDGF-D 及PDGFR βmRNA 在BEL-7402中高表达,与QSG-7701相比差异有统计学意义（P<0.05）。 PDGF-DD干预细胞后,可促进人BEL-7402增殖,浓度为100 μ g/mL 时达最高峰;细胞周期分布变化,G0/G1 期细胞数减少,S 期细胞数增加,与对照组相比差异有统计学意义;RT-PCR 结果显示,VEGF 及PDGFR β RI 值,实验组（除5 μ g/mL 组外）与对照组相比差异有统计学意义;ELISA 结果显示,加入PDGF-DD各浓度组VEGF蛋白浓度较对照组增高,差异有统计学意义,并呈量效依赖性关系。结论:PDGF-DD能促进BEL-7402的增殖,上调PDGFR β 及VEGF的表达。PDGF-D 及其信号传导系统在肝癌的发生、发展中可能发挥重要的作用,可作为肝癌预后预测指标和治疗靶点。