复方石斛合剂调节胰岛素受体表达促进HepG2细胞糖代谢

目的 探讨复方石斛合剂增加HepG2细胞胰岛素信号促进葡萄糖代谢的机制.方法 以高胰岛素培养HepG2细胞24 h,诱导胰岛素抵抗(IR)状态,继以10％复方石斛合剂的含药血清干预48 h,测定细胞6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性,RT-PCR与免疫印迹胰检测岛素受体mRNA与蛋白水平的表达.结果 高浓度胰岛素能降低6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性,降低胰岛素受体的表达;复方石斛合剂的治疗能增加6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性(P＜0.05),促进胰岛素受体的转录与翻译水平表达(P＜0.05),逆转高胰岛素的下调影响.结论 高浓度胰岛素可诱发IR,复方石斛合剂能增加HepG2细胞胰岛素受体的表达,提高葡萄糖分解代谢关键酶活性,缓解IR.     

实验技术人员在中医院校生物化学实验室开放中的作用

正常实验教学结合实验室开放的模式是目前中医院校生物化学教学改革的一个重要方向。实验室开放质量的提高与实验技术人员的业务素质、服务水平和管理能力密切相关。实验技术人员在其中发挥骨干作用,是提高开放教学质量的重要动力。     

生物化学“糖代谢”说课设计方案

本文对生物化学"糖代谢"这一章节内容,从说教材、说教学设计与教学方式、说学法、说板书设计4方面进行说课方案设计,展示中医院校生物化学说课的技巧与方法,以促进教师提高教学水平。     

石斛合剂对HepG2细胞葡萄糖激酶与丙酮酸脱氢酶活性的影响

目的探讨石斛合剂促进葡萄糖代谢的酶学机制。方法①以5%、10%、15%石斛合剂的含药血清培养HepG2细胞24h,测定葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶活性;②以高浓度胰岛素培养HepG2细胞24h,继10%含药血清干预24h,测定葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活性。结果石斛合剂的含药血清能提高HepG2细胞葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活性（P〈0.05）;高浓度胰岛素能降低葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶活性（P〈0.05）,石斛合剂的治疗能增加葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活性（P〈0.05）。结论高浓度胰岛素能诱发胰岛素抵抗,石斛合剂能提高葡萄糖代谢关键酶活性,缓解胰岛素抵抗。     

缺氧对血府逐瘀胶囊促血管新生影响的研究

目的研究血府逐瘀胶囊在缺氧条件下对血管新生的影响。方法通过观察血府逐瘀胶囊含药血清在缺氧条件下对HMEC-1细胞的活力、增殖能力、黏附能力、迁移能力和体外成血管能力的影响,明确缺氧条件对药物促血管新生作用的影响。结果缺氧条件下含药血清在低浓度早、中期增加HMEC-1细胞活力,提高迁移及黏附能力;中、高浓度含药血清早期促进血管管腔形成,随后促管腔形成作用消失。结论缺氧条件下血府逐瘀胶囊通过影响HMEC-1细胞活力、迁移、黏附能力等环节来保护血管内皮细胞,促进血管新生。     

血府逐瘀胶囊与血管内皮生长因子促血管新生差异研究

目的观察血府逐瘀胶囊与血管内皮生长因子(VEGF)体外成血管作用的差异及各自对基因表达谱的影响,为中西两种药物促血管新生行为差异提供分子调控模式。方法通过血府逐瘀含药血清和VEGF影响内皮细胞HMEC-1(HMEC-1)体外成血管的结果分析,明确二者的行为差异,并确定各自最佳促血管新生的药物条件,进一步通过数字基因表达谱(DGE)技术,分析两种药物在最佳药效条件下影响基因表达的情况。结果与空白血清组比较,2.5%含药血清组作用48 h血管管腔数明显增加,5%含药血清组作用48、72 h血管管腔数明显减少(均P0.01)。与空白组比较,1.25、2.5、5、10 ng/mL VEGF干预组血管管腔数明显增加(P0.01)。将2.5%血府逐瘀含药血清和10 ng/mLVEGF作用48 h选定为最佳促血管新生的药物条件,进一步DGE分析的结果显示,受VEGF影响表达差异显著的基因共7个(SCGB3A1、FTPA2、IGLL5、SFTPC、SFTPA1、CD74、SFTPB),均为下调基因,共涉及百日咳、吞噬体、原发性免疫缺陷、抗原加工提呈、溶酶体、单纯疱疹感染、肺结核7条有显著差异的通路。受血府逐瘀胶囊影响的表达差异基因为5个(OTX1、BCYRN1、MRPL50、CCDC104、TCEAL1),其中OTX1表达上调,其余4个均表达下调,无差异显著的通路。结论血府逐瘀胶囊促血管生长呈现短暂及双向调控的特点,而VEGF只表现出单纯的促血管生长作用。两种药物促血管生长的行为差异与其所影响的基因密切相关。     

清热解毒药对2型糖尿病小鼠血糖血脂的影响

正我们用KM小鼠建立2型糖尿病模型,研究蒲公英、野菊花、紫花地丁、金银花对血糖和血脂的影响。1材料与方法1.1试剂和仪器链脲佐菌素(STZ)(美国Sigma公司);柠檬酸钠、柠檬酸(上海生物工程有限公司);悦准血糖测定试纸、I型悦准血糖仪(江苏鱼跃医疗设备股份有限公司);All600型全自动生化分析仪(日本Olympus公司)。1.2 STZ溶液配制1.2.1柠檬酸缓冲液配制柠檬酸(FW:210.14)     

建立小鼠2型糖尿病模型时链脲佐菌素剂量的研究

目的：研究链脲佐菌素（STZ）注射剂量对建立2型糖尿病小鼠模型的影响。方法：不同文献中STZ的注射剂量不一致。本文以存活率和成模率两个因素为指标,采用高脂饲料喂养加不同浓度梯度的链脲佐菌素（STZ）注射建立2型糖尿病模型。结果：50mg/Kg剂量组小鼠虽然全部存活,成模率为0;100mg/Kg剂量组全部存活,成模率20%;150mg/Kg剂量组死亡率达70%,但存活下来的30%全部成模;200mg/Kg剂量组的小鼠全部死亡。结论：125mg/Kg是此方法中的STZ最佳剂量。     

利用iTRAQ技术对2型糖尿病模型大鼠与正常大鼠的肝脏进行比较蛋白质组学研究

目的：研究2型糖尿病模型大鼠与正常大鼠肝脏蛋白表达差异。方法：采用相对和绝对定量同位素标记法（iTRAQ）进行比较蛋白质组学研究。结果：检测到模型组和空白对照组有161个蛋白差异,其中上调的61种,下调的100种。结论：iTRAQ法可以比较2型糖尿病模型大鼠与正常大鼠的肝脏蛋白表达的差异,为后续研究打下基础。     

基于蛋白组学探讨石斛合剂对糖尿病大鼠的作用机制

目的分析正常大鼠和糖尿病大鼠以及经石斛合剂和二甲双胍治疗后差异表达的蛋白质,探讨中药复方石斛合剂对糖尿病糖脂代谢的作用机制。方法通过提取4组(正常组、模型组、石斛合剂组和二甲双胍组)大鼠肝组织蛋白,采用以iTRAQ为标记的液相色谱质谱联用(iTRAQ-LC-MS/MS)技术鉴定并分析各组的差异表达蛋白质。结果与正常组相比,模型组上调和下调的差异蛋白161种;与模型组相比,石斛合剂组总差异蛋白数量为352种;二甲双胍组总差异蛋白数量为125种,蛋白涉及细胞结构、能量代谢-电子传递、翻译的调控及翻译后修饰、物质转运、氨基酸代谢、脂肪酸氧化等方面,但经石斛合剂和二甲双胍治疗后趋向恢复的蛋白种类存在不同。结论本实验筛选出模型组以及石斛合剂和二甲双胍治疗后糖尿病大鼠肝组织中的差异蛋白,表明中药复方石斛合剂与西药二甲双胍对糖尿病大鼠靶蛋白的影响不同,为深入研究石斛合剂对糖尿病的作用机制奠定了基础。