丹参素经PI3K/AKT信号通路改善血管性痴呆小鼠认知功能的机制研究

目的：基于磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）信号通路探讨丹参素对血管性痴呆小鼠认知功能的改善情况。方法：将60只昆明种小鼠按随机数字表法分为6组：正常对照组、模型组、阳性对照组（尼莫地平注射液,2 mg·kg-1）、丹参素低（10 mg·kg -1）、中（20 mg·kg -1）、高（30 mg·kg -1）剂量组,每组10只。模型组、阳性对照组、丹参素低、中、高剂量组小鼠构建血管性痴呆模型。建模成功后,从第1天开始丹参素各剂量组和阳性对照组腹腔注射相应的药物,正常对照组和模型组腹腔注射等量生理盐水,每天1次,持续28d。给药结束后对小鼠进行水迷宫实验,检测小鼠脑损伤相关因子血清星形胶质源性蛋白（S-100β）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）含量,苏木精-伊红（HE）染色观察小鼠脑组织结构,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测小鼠脑组织中PI3K、AKT蛋白水平。结果：正常对照组小鼠脑组织结构正常,细胞排列整齐,无明显空泡结构;模型组可见明显的脑白质受损,细胞排列紊乱,视野中大量空泡结构;在给予丹参素干预后,随着丹参素给药剂量的增加,可见脑组织细胞排列逐渐变整齐,空泡结构逐渐减少。与正常对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期、血清S-100β、NSE含量显著升高,脑组织中PI3K、AKT蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;与模型组比较,丹参素低、中、高剂量组和阳性对照组小鼠逃避潜伏期、血清S-100β、NSE含量显著降低,脑组织中PI3K、AKT蛋白表达水平显著升高（P<0.05）;随着丹参素给药剂量的增加,小鼠逃避潜伏期、血清S-100β、NSE含量逐渐降低,脑组织中PI3K、AKT蛋白表达水平逐渐升高,具有量-效关系（P<0.05）;丹参素高剂量组和阳性对照组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：丹参素可通过调节PI3K/AKT信号通路及相关细胞因子,改善血管性痴呆小鼠的认知功能障碍。     

中药绞股蓝改善血管性痴呆小鼠认知功能障碍

目的探讨绞股蓝对血管性痴呆(VD)小鼠认知功能障碍和海马神经元损伤的保护作用。方法随机将雄性C57BL6/G小鼠分为假手术(Sham)组、血管性痴呆模型(VD)组、绞股蓝治疗组(低、中、高剂量组)。采用双侧颈总动脉阻断(2VO)方法复制血管性痴呆小鼠模型,Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力,HE染色法观察小鼠海马神经元的形态学变化。结果 Morris水迷宫测试发现VD小鼠学习记忆能力下降,海马CA1区神经元迟发性死亡;绞股蓝治疗可显著提高VD小鼠的学习记忆能力,减少VD所致的海马CA1区神经元死亡;中、高剂量绞股蓝治疗组VD小鼠逃避潜伏期的时间明显短于低剂量组,穿越平台次数明显多于低剂量组,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论绞股蓝可通过保护血管性痴呆所致的小鼠海马神经元损伤,改善VD小鼠的认知功能。     

绞股蓝神经保护作用的研究进展

绞股蓝为葫芦科多年生草本植物（GprostemmaPentaphyllum Makino GP）,又名五叶参、七叶胆等。味甘苦性寒,现代研究表明绞股蓝中含有皂苷、氨基酸、黄铜类化合物、多糖、磷脂、维生素等活性成分,其中皂苷有80多种,4种皂苷（Gyp-3、4、8、12）分别与4种人参皂苷（Gin-Rb1、Rb3、Rd、F2）同物异名,     

绞股蓝总苷对缺氧/复氧小鼠海马HT22细胞PAK1、CREB表达及凋亡的影响

目的探讨绞股蓝总苷（Gyp）对缺氧/复氧（O/R）小鼠海马HT22细胞p21活化蛋白激酶1（PAK1）、环磷酸腺苷反应单元结合蛋白（CREB）表达及凋亡的影响。方法将小鼠海马HT22细胞分为正常对照组、O/R组、70mg/LGypO/R组、85mg/LGypO/R组和100mg/LGypO/R组后,4组细胞建立O/R模型。观察细胞形态学变化;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;Westernblot法测定各组B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、PAK1、CREB蛋白表达水平。结果正常对照组细胞贴壁生长,细胞膜光滑、完整,胞体折光性强,细胞突触明显,突触之间相互交织成网状;O/R组细胞贴壁不紧,细胞膜皱缩,胞质凝聚,细胞胞体突触明显减少,细胞间连接大量减少;70mg/LGypO/R组、85mg/LGypO/R组、100mg/LGypO/R组细胞上述现象依次缓解。与正常对照组相比,O/R组细胞凋亡率、Bax、Bax/Bcl-2蛋白表达水平均升高（均P＜0.05）,Bcl-2、PAK1、CREB蛋白表达水平均降低（均P＜0.05）;与O/R组相比,70mg/LGypO/R组、85mg/LGypO/R组、100mg/LGypO/R组细胞凋亡率、Bax、Bax/Bcl-2蛋白表达水平依次降低（均P＜0.05）,Bcl-2、PAK1、CREB蛋白表达水平依次升高（均P＜0.05）。结论Gyp可能通过上调小鼠海马HT22细胞PAK1、CREB蛋白表达水平来抑制细胞凋亡。