癌胚型GPC-3特异诊断原发性肝细胞癌及其靶向治疗进展

原发性肝细胞性肝癌(primary hepatocellular cancer,PHC)的发生、发展是一个多因素、多步骤、多中心的复杂过程,他的早期诊断和有效治疗至关重要.磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3,GPC-3)在PHC进展过程中起重要作用.在肝细胞恶性转化过程中G P C-3呈进行性升高表达;人肝癌G P C-3阳性率与乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,Hbs Ag)、TNM分期、门脉癌栓及肝外转移显著相关.GPC-3及m RNA与甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)联合检测,对PHC诊断阳性率可提高至94.3%;沉默GPC-3可改变肝癌细胞迁移、转移和侵袭的生物学行为,伴随β-catenin、p-糖原合成激酶3β(pglycogen synthase kinase 3β,p-GSK3β)和cyclin D1表达明显减少,提示癌胚性GPC-3不仅是PHC特异诊断标志物,而且有可能成为PHC治疗的潜在靶点.     

平等视域下的和谐医患关系构建

医患关系不和谐是一个复杂而又敏感的社会问题,而医疗过程中的"不平等"是导致医患关系和谐的重要原因之一。本文从平等与和谐医患关系的作用,不平等是造成医患关系不和谐的重要原因,以及以平等思想构建和谐医患关系的重要性等三个方面进行分析,提出解决医疗不平等应从解决医疗保障制度、医疗资源配置、医疗主体之间等三个方面的不平等,来改善医患关系的建议。     

甲钴胺治疗老年脑梗死伴高同型半胱氨酸血症患者卒中后抑郁的疗效

目的:探究甲钴胺治疗老年脑梗死班高同型半胱氨酸血症(Hcy)患者卒中后抑郁的疗效。方法:选择86例老年急性脑梗死伴高Hcy血症患者,随机分为观察组与对照组,各43例。对照组经常规治疗,观察组在对照组基础上加用甲钴胺。结果:治疗后两组患者血浆Hcy水平对比具有统计学差异,P<0.05;在SCL-90总评分、阳性项目、阳性总分、阳性均分方面,观察组显著低于对照组,P<0.05。结论:老年脑梗死伴高同型半胱氨酸血症患者经甲钴胺治疗,疗效确切,值得推广。     

下调GPC-3转录经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌生长的抑制作用

目的研究干预磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3, GPC-3)活化经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的抑制作用。方法将miRNA干扰质粒转染GPC-3高表达的HepG2和Hep3B细胞,以CCK-8法检测细胞增殖,平板法分析克隆形成,以流式细胞术分析细胞周期;以裸鼠移植瘤模型观察成瘤时间、体积、生长曲线;以免疫组化法和免疫印迹法分析GPC-3及Wnt/β-catenin通路关键分子β-catenin、p-GSK3β及Cyclin D1的变化。结果特异性miRNA成功转染HepG2和Hep3B细胞后,体外研究显示HCC细胞增殖受到抑制、克隆形成明显降低和发生G_1期阻滞,差异有显著统计学意义(P0.01),β-catenin及p-GSK3β显著降低(P0.01);体内研究显示,移植瘤成瘤时间延长(t=12.89,P0.01)、瘤体小(t=15.29,P0.01);瘤内GPC-3表达明显下降(t=6.67,P0.01)、相关信号分子β-catenin(t=9.61,P0.01)、p-GSK3β(t=4.81,P0.01)及Cyclin D1(t=5.90,P0.01)表达均显著下调。结论干预GPC-3活化经Wnt/β-catenin通路抑制HCC细胞增殖和生长,提示GPC-3为HCC治疗的潜在靶目标。     

反转座子对人类基因组稳定性的影响

反转座子（retrotransposon）是通过RNA为中介反转录成DNA后进行转座的可动元件,可由基因组中一个位点进行复制,插入到基因组其它位点从而整合到基因组中。反转座子在人类基因组中含量丰富,约占45%,可以通过插入、缺失、重组、转导等机制影响局部基因组稳定性,甚至可以引起基因组重排,从而影响基因组稳定性,导致疾病的产生。本文就转座元件的特性及其对基因组稳定性的影响作一综述。     

干预磷脂酰肌醇蛋白多糖3基因转录联合抗肿瘤药物抑制肝癌细胞增殖的协同作用

目的探讨干预磷脂酰肌醇蛋白多糖(GPC)3基因转录和联合抗肿瘤药物对肝癌细胞增殖的抑制效果。方法构建4种GPC-3-shRNA质粒转染肝癌HepG2细胞,以realtime-PCR、Western Blot法观察GPC-3基因及蛋白表达水平,分析其与肝癌细胞增殖、凋亡的关系。计量资料两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果 4种转染质粒中shRNA1转染HepG2细胞效率85%,在mRNA水平的沉默效率为89.3%,GPC-3蛋白表达显著抑制(P0.01)。shRNA1干扰组72 h HepG2细胞抑制率71.1%,与阴性组比较差异有统计学意义(t=18.092,P0.001);shRNA1干扰组肝癌细胞发生生物学特性改变,迁移抑制率为89.1%,明显慢于阴性组,差异有统计学意义(t=8.326,P0.001);HepG2细胞运动抑制率为53.6%、侵袭抑制率60.1%,与阴性组比较差异均有统计学意义(t值分别为52.400、48.245,P值均0.001)。shRNA1干扰组β-catenin mRNA抑制率为46.9%,Gli1 mRNA上调率为7.4%,与对照组比较差异均有统计学意义(t值分别为30.108、-3.551,P值分别为0.001、0.009)。在24 h时,10μmol/L索拉非尼与shRNA1联合,对肝癌细胞抑制率为52.6%,100μmol/L索拉非尼与shRNA1联合,对肝癌细胞的抑制率为79.5%,与对照组比较差异有统计学意义(t值分别为23.314、50.352,P值均0.001)。索拉非尼对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC_(50))值为(4.67±1.20)μmol/L、雷帕霉素为(7.85±2.00)nmol/L、厄洛替尼为(18.36±0.56)μmol/L,与shRNA1联合使用后HepG2细胞抑制率达95.11%。结论特异性shRNA干预GPC-3转录可抑制肝癌细胞增殖、迁移运动和侵袭能力,并诱导肝癌细胞凋亡,与抗肿瘤药物协同抑制癌细胞增殖,提示GPC-3可能是肝癌治疗有效靶点,联合靶向治疗将为肝癌提供更佳治疗策略。     

大鼠肝DNA拓扑异构酶Ⅰ的提纯及其与B_2蛋白的鉴别

DNA拓扑异构酶Ⅰ(拓扑酶Ⅰ)催化DNA单链的暂时断裂、解缠及重新接合而使超螺旋DNA转变成松弛DNA。它存在于原核细胞及各种真核生物细胞核中,可能参与DNA的复制、转录和重组,亦可能参与基因表达的调节。     

脂肪干细胞体外分离培养鉴定及免疫学性质

背景：脂肪干细胞由于具备易于获取等特点,在组织工程中比骨髓间充质干细胞具有更加广阔的应用前景,并因此成为当今的研究热点之一。目的：观察脂肪干细胞的生长规律,鉴定其干细胞特性和免疫学性质。方法：自整形外科行抽脂的3名健康志愿者身上获取皮下脂肪组织及外周血,志愿者年龄20一30岁,均为女性。用I型胶原酶消化脂肪组织获得脂肪干细胞,在体外原代培养及传代培养,观察其体外增殖能力等生物学特性;通过流式细胞术检测人脂肪干细胞分化群表面抗原和主要组织相容性抗原的表达。并将异体脂肪干细胞和淋巴细胞共培养,观察脂肪干细胞是否可以刺激后者增殖。结果与结论：所获脂肪干细胞具有很强的体外增殖能力,其生长曲线呈“S”形;第3代脂肪干细胞表面CD29、CD44、CD90以及主要组织相容性抗原I呈阳性表达,CD31、CD45、CD34及主要组织相容性抗原II呈阴性表达;未发现异体脂肪干细胞刺激淋巴细胞增殖。提示所获细胞确为脂肪干细胞,且具有较弱的排斥反应,有可能成为细胞治疗或组织工程的同种异体细胞来源。     

NGX6基因两转录本在不同分期结直肠癌中的表达 及与癌胚抗原的关系

目的：探讨NGX6 mRNA两种转录本NGX6 S和NGX6 L在结直肠癌中的表达及功能。方法：采用原位杂交法检测NGX6 L和NGX6 S在不同分期结直肠癌癌组织及其配对正常组织中的表达特征,并分析其与血清癌胚抗原（CEA）的相关性。结果：在结直肠癌组织中短转录本NGX6 S的表达明显高于长转录本NGX6 L（P=0.008）。NGX6 S和NGX6 L在不同分期结直肠癌癌组织中的表达差异均无统计学意义（P＞0.05）。NGX6 S在Duke A,B和C三期结直肠癌组织中的表达与其在配对正常组织的表达差异无统计学意义（P＞0.05）,在有远处转移的Duke D期结直肠癌组织中的表达低于配对正常组织（P=0.033）。NGX6 L在Duke A,B,C和D期结直肠癌组织中的表达与配对正常组织差别无统计学意义（P＞0.05）。结直肠癌中NGX6 S,NGX6 L的表达与血清CEA浓度无相关性。结论：在结直肠癌中NGX6基因发挥抑瘤功能的主要形式是短转录本NGX6 S,其表达下调可能与结直肠癌的远处转移相关。