骨髓间充质干细胞移植对氧诱导视网膜病变新生大鼠视网膜新生血管的影响

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对氧诱导视网膜病变(OIR)新生大鼠视网膜新生血管的影响,并观察视网膜缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,为BMSC临床治疗OIR提供可靠的理论依据。方法将72只7日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为正常对照组、模型组(OIR组)与BMSC移植组(BMSC组)。体外培养BMSC,采用氧诱导法制成OIR模型,持续高氧5 d后,BMSC组行玻璃体内注射大鼠BMSC。移植后7 d,采用视网膜铺片法、苏木精-伊红染色(HE)法检测BMSC移植对OIR新生大鼠视网膜新生血管的影响;免疫组化法结合Western blot法观察BMSC对OIR新生大鼠视网膜HIF-1α及VEGF蛋白表达的影响。结果视网膜铺片结果示正常对照组视网膜血管排列整齐,而OIR组血管排列紊乱,可见大片无灌注区,BMSC组仅可见大血管稍迂曲,血管排列较规整,无灌注区明显减少;HE染色发现OIR组视网膜内界膜可见大量新生血管及视网膜前新生血管细胞(Pre-RNC),BMSC组视网膜内界膜新生血管明显减少,且pre-RNC数显著少于OIR组(P0.01);免疫组织化学结果示OIR组HIF-1α阳性与VEGF阳性细胞数显著多于正常对照组,而BMSC组HIF-1α阳性与VEGF阳性细胞数均显著少于OIR组(P0.05)。Western blot结果示OIR组HIF-1α与VEGF蛋白表达显著高于正常对照组,而BMSC组HIF-1α与VEGF蛋白表达显著低于OIR组(P0.01)。结论 BMSC玻璃体内移植可减轻OIR新生大鼠视网膜新生血管的形成,其机制可能与其抑制HIF-1α及VEGF蛋白的表达有关。     

排龈线在烤瓷冠桥修复中的应用

1998～1999年,我们采用成品排龈线,对35例(60颗牙)烤瓷冠桥修复病人进行基牙预备前后牙龈排龈处理,临床效果较好,现报告如下.     

DWI评估N-乙酰-5-羟色胺对脑缺血再灌注大鼠脑水肿的影响

目的 采用DWI观察N-乙酰-5-羟色胺（NAS）对急性局灶性脑缺血再灌注（IR）大鼠脑水肿的神经保护作用。方法 将66只大鼠随机分为假手术组（n=10）、大脑中动脉阻塞（MCAO）组（n=28）和NAS组（n=28）。对MCAO组和NAS组大鼠IR后6 h、24 h、72 h、7天,对假手术组于72 h,分别行DWI和病理学检查,比较3组不同时间点脑梗死区相对ADC值（rADC）、相对指数ADC值（reADC）、水通道蛋白4（AQP4）阳性细胞数的变化。IR后72 h,测量各组脑组织含水量的变化。结果 假手术组大鼠MRI检测未见异常信号。NAS组与MCAO组大鼠DWI图均可见损伤侧大脑皮层及纹状体异常高信号,ADC图为低信号,eADC图为高信号。IR后6、24、72 h,NAS组rADC值均高于MCAO组（P均<0.05）,reADC值和AQP4阳性细胞数低于MCAO组（P均<0.05）;IR后7天,各组rADC值、reADC值及AQP4阳性细胞数差异无统计学意义（P均>0.05）。IR后72 h,NAS组大鼠脑组织水含量低于MCAO组（P<0.05）。结论 NAS可减轻急性IR脑损伤大鼠脑水肿,其机制可能与下调AQP4蛋白的表达有关;DWI对评价NAS的神经保护作用具有重要价值。     

N-乙酰-5-羟色胺(NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响

目的 探讨N-乙酰-5-羟色胺(N-acetylserotonin,NAS)对视网膜缺血再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响.方法 取健康成年Sprague-Dawley大鼠66只,采用随机数字表法随机分为正常对照组(6只)、缺血再灌注组(30只)与药物组(30只),药物组于造模前30 min腹腔注射5 mg·kg-1NAS,缺血再灌注组腹腔注射同等剂量的生理盐水,缺血再灌注组与药物组按RIRI后时间,分为6h、12 h、24 h、48 h、72 h五个亚组.采用HE染色法观察各组视网膜形态学变化,免疫组织化学染色检测各组大鼠视网膜活性Caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白表达.结果 HE染色显示正常对照组大鼠视网膜结构清晰,各层细胞排列紧密;缺血再灌注组大鼠RIRI后6h、12 h视网膜各层高度水肿,24h后水肿逐渐减轻,神经节细胞逐渐减少,分布较紊乱,随着时间延长,视网膜神经节细胞大片缺失;药物组6h、12h较缺血再灌注组细胞水肿明显减轻,24h、48 h、72h组较缺血再灌注组细胞排列规整,神经节细胞数量减少减轻.缺血再灌注组视网膜活性Caspase-3阳性细胞数在灌注后6h开始表达增加,阳性细胞数为(561.15±37.19)个·mm-2,24 h达到较高水平,阳性细胞数为(1522.61±84.36)个·mm-2,随后逐渐下降,药物组视网膜各时间点活性Caspase-3阳性细胞数均显著少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).正常对照组视网膜可见大量Bcl-2阳性细胞;缺血再灌注组RIRI后6 h Bcl-2阳性细胞开始下降,12h后继续减少,24h降至较低水平;药物组各时间点Bcl-2阳性细胞数均显著多于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).正常对照组大鼠视网膜几乎未见Bax阳性细胞;缺血再灌注组RIRI后6h神经节细胞层及内核层可见Bax阳性细胞,24h达到较高水平,48 h开始下降;药物组各时间点Bax阳性细胞均显著少于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 NAS可促进RIRI大鼠视网膜Bcl-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,降低活性Caspase-3蛋白表达,减轻细胞凋亡,具有神经保护作用.     

褪黑素对局灶性脑缺血大鼠扩散加权成像及脑组织中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表达的影响

目的 基于大脑中动脉栓塞（MCAO）模型,探讨褪黑素（MT）对局灶性脑缺血大鼠脑DWI及脑组织中Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表达的影响。方法 将80只SD大鼠随机分为Sham组（n=16）、MCAO组（n=32）及MT组 （n=32）。MCAO组及MT组建立大鼠MCAO模型后,于脑缺血再灌注（IR）前后30min,分别腹腔注射生理盐水与MT;Sham组进行假手术操作,腹腔注射生理盐水。对各组大鼠进行行为学评分,于MCAO组及MT组中选取评分为1~3分者纳入研究。分别于假手术或IR后6 h、24 h、72 h、7天,行大鼠脑DWI扫描,计算相对DWI信号强度（rDWI-SI）;并于每一时间点各组随机选取大鼠进行Fas、FasL及活性Caspase-3免疫组化染色观察,并比较各组Fas、FasL、活性Caspase-3阳性细胞数（个/mm²）。结果 最终Sham组16只、MCAO组29只、MT组30只大鼠纳入研究。3组间大鼠行为学评分差异具有统计学意义（χ²=50.125,P<0.01）,MT组及MCAO组行为学评分均高于Sham组（P均<0.01）,MT组行为学评分低于MCAO组（P<0.01）。IR后6 h、24 h、72 h、7天,MCAO组及MT组rDWI-SI值均高于Sham组假手术后相应时间rDWI-SI值（P均<0.01）;IR后6 h、24 h、72 h,MCAO组rDWI-SI值均高于MT组（P均<0.05）;IR后7天MT组与MCAO组间rDWI-SI值差异无统计学意义（P>0.05）。IR后6 h、24 h、72 h,MT组及MCAO组Fas、FasL染色及活性Caspase-3染色阳性细胞数均较Sham组增多（P均<0.01）,MT组较MCAO组减少（P<0.05）;IR后7天,3组间阳性细胞数差异无统计学意义（P>0.05）。结论 在大鼠局灶性脑缺血损伤模型中,MT可有效减低rDWI-SI值,并可抑制Fas、FasL、活性Caspase-3蛋白表达。     

中医药治疗慢性阻塞性肺疾病研究进展

正2017年,慢性阻塞性肺疾病全球创议中提出了慢性阻塞性肺疾病的新定义,即以持续存在的呼吸道症状和气流受限为主要临床表现,由气体暴露、有害颗粒物损伤肺泡组织等引起,是一种可以预防的常见病,此次会议中明确了慢阻肺临床病症与呼吸道症状的区别。随着对中医中药理论的分子化研究和系统     

联合检测血清miR-1290和CA19-9 对胰腺癌的诊断价值

目的 分析血清微RNA(miR)-1290在胰腺癌患者中的表达水平及与临床病理的关系,以探讨miR-1290和CA19-9联合检测在胰腺癌中的诊断价值。方法 通过3个独立的GEO数据集分析,筛选出胰腺癌患者血清中表达上调的miR-1290,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测35例胰腺癌患者、23例胰腺良性疾病患者和20例健康志愿者血清miR-1290的表达水平,分析其与临床病理特征之间的相关性。采用受试者操作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线对血清miRNA、CA19-9、miRNA联合CA19-9检测的诊断价值比较。结果 通过GEO数据集分析发现,miR-1290在胰腺癌患者中表达上调。胰腺癌患者血清miR-1290水平[0.51(0.37,0.85)]显著高于胰腺良性疾病组[0.14(0.05,0.28)]及健康对照组[0.08(0.04,0.22)],差异均有统计学意义(P＜0.05)。miR-1290联合CA19-9检测对区分胰腺癌组与胰腺良性疾病组(AUC为0.929、敏感度为85.7%、特异性为87.0%)、胰腺癌组与健康对照组(AUC为0.959、敏感度为91.4%、特异性为85.0%)、胰腺癌组与所有对照组(AUC为0.942、敏感度为85.7%、特异性为90.7%)优于任一单一指标。胰腺癌患者血清miR-1290表达水平与肿瘤T分期、是否存在淋巴结转移及远处转移有关(P＜0.05),miR-1290高表达是影响胰腺癌发生的危险因素。结论 胰腺癌患者血清miR-1290表达升高,与胰腺癌的发生、发展相关,可作为胰腺癌诊断的生物学标志物。联合检测miR-1290和CA19-9诊断胰腺癌价值优于任一单一指标。     

脐血单个核细胞侧脑室移植对HIBD新生大鼠脑神经元凋亡及Bax、Bcl-2蛋白的影响

目的 探讨脐血单个核细胞移植对缺氧缺血性脑损伤 （HIBD）新生大鼠脑神经元凋亡及Bax、Bcl-2蛋白的影响。方法 7日龄Sprague-Dawley新生大鼠制备缺氧缺血性脑损伤 （HIBD）模型,随机分为正常对照 （N）+生理盐水 （NS）、HIBD+NS、N+脐血单个核细胞 （UCBMC）及HIBD+UCBMC组。N+UCBMC与HIBD+UCBMC组侧脑室注入3×106个UCBMC,N+NS与HIBD+NS组注入等体积NS。移植后7 d采用NeuN/活性Caspase-3免疫荧光双标染色法、TUNEL法观察大脑皮层神经元凋亡,Western blot观察脑组织Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 HIBD+NS组的NeuN+活性Caspase-3+DAPI+细胞及TUNEL+DAPI+细胞均多于N+NS和N+UCBMC组 （P < 0.01）;HIBD+UCBMC组的NeuN+活性Caspase-3+DAPI+细胞及TUNEL+DAPI+细胞均少于HIBD+NS组 （P < 0.01）。HIBD+NS组的Bax蛋白表达高于N+NS与N+UCBMC组,Bcl-2蛋白低于N+NS与N+UCBMC组 （P < 0.01）;而HIBD+UCBMC组的Bax蛋白较HIBD+NS组降低 （P < 0.01）,Bcl-2蛋白则高于HIBD+NS组、N+NS和N+UCBMC组 （P < 0.05）。结论 HIBD新生大鼠侧脑室移植UCBMC可以减轻神经元凋亡,其机制可能与Bcl-2蛋白表达上调,Bax蛋白表达下调有关。