杂交链反应在超灵敏检测方面的应用进展

DNA在生命活动中具有重要意义,针对DNA检测技术日益增多,近些年一种无酶等温高效的超灵敏扩增技术,杂交链反应(HCR)逐渐引起广泛的关注。HCR,仅在特定的核苷酸引发物(NI)和两个特殊设计的发夹DNA(H1,H2)同时存在的情况下进行自组装,实现了原位扩增反应。由于NI,H1,H2的可编辑性及可修饰性,使得HCR适用于分子生物学的各个领域,具有广泛的应用前景。该文通过HCR在核酸检测、蛋白检测、细胞检测及生物成像等方面的应用进展来探究其优点和不足。     

2012—2020年广州地区肺炎链球菌耐药趋势增高及聚集性多重耐药模式

目的：分析2012—2020年广州地区肺炎链球菌抗菌药物耐药性的分布情况及聚集性多重耐药模式。方法：收集2012—2020年肺炎链球菌感染的临床数据；采用VITEK 2 Compact和MALDI?TOF/TOF MS进行初步鉴定，并用奥普托欣试验和胆汁溶血试验再次验证；采用VITEK 2 Compact和K?B法进行药敏谱分析，结果判读参照CLSI2020标准，数据采用WHONET5.6和SPSS23.0软件进行统计分析。结果：共收集1 110株肺炎链球菌，纳入分析753株非重复分离株，主要来源于痰液标本（73.7%）。感染患者中，男性偏多（69.7%），年龄段主要集中在≤5岁的婴幼儿及儿童（53.9%），科室分布以重症监护室为主（51.4%）。多重耐药的肺炎链球菌占总分离数的75.3%（567/753），多重耐药株分离率从2012年的66.7%（44/66）上升至2020年的93.9%（46/49），呈上升趋势（P < 0.001）。美罗培南耐药率从27.9%（17/61）上升至58.7%（27/46），出现明显增长趋势（P < 0.001）；青霉素耐药率从70.0%（7/10）降低至18.4%（9/49），出现明显下降趋势（P < 0.001）；头孢噻肟从9.1%（1/11）上升至32.6%（15/46）（P=0.063），但其上升趋势不可忽略，需进一步监测；红霉素和四环素耐药率一直较高。多重耐药模式出现聚集性，最主要为A模式：四环素?复方磺胺甲恶唑?红霉素同时耐药，占27.3%（155/567），其他耐药模式均在A模式的基础上进一步发展。结论：多重耐药肺炎链球菌呈逐年递增趋势，美罗培南和头孢噻肟为重点监测药物，青霉素出现耐药减少趋势，可作为经验性治疗用药。聚集性耐药模式提示经验用药可能失败，地区性合理使用抗菌药物并定期进行耐药监测是长期任务。     

镶嵌状penA X基因在淋球菌中对头孢曲松敏感性的作用研究

目的:探讨pen A X基因在淋球菌中对头孢曲松敏感性的影响。方法:构建重组质粒p ET-28apen A X,将重组质粒转化到淋球菌WHO P标准株,通过PCR进行鉴定。采用琼脂稀释法测定菌株对头孢曲松的最小抑菌浓度(MIC),观察转化了p ET-28a-pen A X质粒的淋球菌对头孢曲松敏感性的变化。结果:成功构建p ET-28a-pen A X重组质粒,并成功转化了淋球菌WHO P标准株。药敏结果显示转化了p ET-28a-pen A X质粒的淋球菌比对照株(p ET-28a-pen A和p ET-28a转化株)对头孢曲松的MIC值提高了3.75倍。结论:pen A X基因降低了淋球菌WHO P标准株对头孢曲松的敏感性。     

梅毒反向筛查和ECDC筛查在恶性肿瘤患者中的应用

<正>梅毒是由苍白密螺旋体(treponema pallidum,TP)主要通过性活动传播,其诊断依靠临床表现及病史,但血清学检测仍是主要的诊断依据。梅毒血清学试验分为两种:非梅毒螺旋体试验(NTT)如快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),梅毒螺旋体试验(TT),如梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、时间分辨荧光     

体外诱导沙眼衣原体持续性感染对宿主细胞凋亡的调控北大核心CSCD

目的探讨阿奇霉素诱导持续性感染下沙眼衣原体对Hela229细胞凋亡的调控作用。方法沙眼衣原体感染Hela229细胞22h后,加入含0．08mg／L阿奇霉素的DMEM培养液继续培养至感染48h,构建持续性感染细胞模型,以不含阿奇霉素的DMEM培养液培养构建急性感染细胞模型。感染48h后,去除阿奇霉素继续培养进行沙眼衣原体复活试验。免疫荧光和电镜检测技术验证持续性感染模型。将沙眼衣原体急性感染和持续性感染的Hela229细胞用星状孢子素处理4h诱导凋亡后,用Hoechst33258染色和膜联蛋白V-碘化丙锭流式细胞仪检测宿主细胞凋亡,以未感染Hela229细胞为对照。结果加入阿奇霉素后,沙眼衣原体感染的细胞内形成异形包涵体,其内为畸形网状体。去除阿奇霉素继续培养至96h,沙眼衣原体包涵体内见具有感染性的原体。Hoechst染色显示,经星状孢子素诱导细胞凋亡,持续性感染的细胞染色质疏松,而无沙眼衣原体感染的细胞染色质浓缩。在感染24h时诱导凋亡,持续性感染组和急性感染组细胞凋亡率分别为45．567％±2．631％和38．567％±1．701％,两者差异有统计学意义（t=2．686,P=0．028）,持续性感染组与未感染组（69．800％±2．835％）差异有统计学意义（t=8．187,P〈0．001）。在感染48h时诱导凋亡,持续性感染和急性感染组细胞凋亡率分别为46．700％±5．257％和61．767％±1．815％,两者差异有统计学意义（t=5．781,P〈0．001）;持续性感染组与未感染组（68．667％±3．156％）差异有统计学意义（t=7．421,P〈0．001）。结论阿奇霉素诱导沙眼衣原体持续性感染可调控宿主细胞凋亡,且作用持久至48h。