通过矿化提高蛋白疫苗稳定性的研究

目的:通过原位矿化的方式制备肺炎链球菌蛋白质的磷酸钙矿化颗粒,并评价其在蛋白酶和热处理后的稳定性。方法:通过分子克隆技术表达并纯化蛋白野生型溶血素(WT-PLY)和其无溶血活性突变体(ΔA146PLY),在富含Ca~(2+)和PO_4~(3-)的弱碱性溶液(pH=7.5)中进行生物矿化,制备磷酸钙矿化的蛋白颗粒;通过TEM、FESEM、EDS等分析矿化颗粒的大小、形貌及表面成分;通过抗蛋白酶K降解实验、溶血实验等分析矿化疫苗的稳定性;通过体外细胞实验和体内动物实验评估热处理后矿化蛋白疫苗的保护效应。结果:在1 ml矿化体系中含有360μg蛋白、8.8μmol Ca~(2+)、8.8μmol Mg~(2+)和5.28μmol PO_4~(3-)的条件下,均可制备出WT-PLY和ΔA146PLY的矿化颗粒,BCA检测其包封率分别为44.4%和52.2%;矿化颗粒WT-PLY@CaP和ΔA146PLY@CaP在蛋白酶K处理15 min内其抗酶解活性高于其可溶性蛋白;矿化颗粒WT-PLY@CaP在55℃处理5 min和45℃处理60 min后,其溶血活性较其可溶性蛋白高;矿化颗粒ΔA146PLY@CaP在55℃处理5 min和45℃处理60 min后仍保持与未处理蛋白一致的免疫活性。结论:生物矿化有助于提高蛋白稳定性。这为疫苗蛋白及其他蛋白制品稳定性的提高提供了一种简便易行的矿化方法。     

小儿肺炎合并心力衰竭211例临床分析

小儿肺炎合并心力衰竭（以下简称肺炎心衰）是肺炎常见和严重的并发症；是肺炎患儿致死的重要原因之一。近年来国内外对肺炎心衰的基础与临床研究又有不少新进展，肺炎心衰的治愈率有了明显提高。现将2001年1月至12月住院治疗的211例结合文献并讨论如下：     

急性一氧化碳中毒继发脑梗塞1例

患者男，６５岁。因神志模糊２小时急诊入院。患者于入院前当日中午使用煤气灶后入睡，２小时后，家人发现患者呕吐、神志模糊、面色潮红、出汗。屋内闻到煤气味，检查煤气灶开关未完全关闭。既往有“高血压”病史。查体：Ｔ３６５℃，Ｐ１１０次／分，Ｒ２５次／分，Ｂ...     

小儿急性上消化道出血37例临床分析

小儿上消化道出血并非少见,但由于发病急,病情变化快,表现不如成人典型.迅速确定出血的病因、部位、及时抢救对预后有重要意义.现将2000年6月-2003年9月本院收治的37例上消化道出血患儿资料分析如下.     

2012—2020年广州地区肺炎链球菌耐药趋势增高及聚集性多重耐药模式

目的：分析2012—2020年广州地区肺炎链球菌抗菌药物耐药性的分布情况及聚集性多重耐药模式。方法：收集2012—2020年肺炎链球菌感染的临床数据；采用VITEK 2 Compact和MALDI?TOF/TOF MS进行初步鉴定，并用奥普托欣试验和胆汁溶血试验再次验证；采用VITEK 2 Compact和K?B法进行药敏谱分析，结果判读参照CLSI2020标准，数据采用WHONET5.6和SPSS23.0软件进行统计分析。结果：共收集1 110株肺炎链球菌，纳入分析753株非重复分离株，主要来源于痰液标本（73.7%）。感染患者中，男性偏多（69.7%），年龄段主要集中在≤5岁的婴幼儿及儿童（53.9%），科室分布以重症监护室为主（51.4%）。多重耐药的肺炎链球菌占总分离数的75.3%（567/753），多重耐药株分离率从2012年的66.7%（44/66）上升至2020年的93.9%（46/49），呈上升趋势（P < 0.001）。美罗培南耐药率从27.9%（17/61）上升至58.7%（27/46），出现明显增长趋势（P < 0.001）；青霉素耐药率从70.0%（7/10）降低至18.4%（9/49），出现明显下降趋势（P < 0.001）；头孢噻肟从9.1%（1/11）上升至32.6%（15/46）（P=0.063），但其上升趋势不可忽略，需进一步监测；红霉素和四环素耐药率一直较高。多重耐药模式出现聚集性，最主要为A模式：四环素?复方磺胺甲恶唑?红霉素同时耐药，占27.3%（155/567），其他耐药模式均在A模式的基础上进一步发展。结论：多重耐药肺炎链球菌呈逐年递增趋势，美罗培南和头孢噻肟为重点监测药物，青霉素出现耐药减少趋势，可作为经验性治疗用药。聚集性耐药模式提示经验用药可能失败，地区性合理使用抗菌药物并定期进行耐药监测是长期任务。