原位杂交检测HPV-16E6,-18E6在喉癌组织中的表达

目的 检测HPV L1和16/18DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用.方法 用原位杂交(ISH)检测123例喉癌组织及123例"正常人"的喉粘膜上皮组织中HPV-16/18 mRNA.结果 在123例喉癌标本中,ISH检出HPV-16E6的阳性率为46.34%,HPV-18E6的阳性率为35.77%.123例"正常人"的喉粘膜ISH结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高.对上述结果用SPSS 10.0软件进行case-control X2分析,HPV-16感染会增加喉上皮病变的风险(OR=14.58),感染HPV-18时,喉上皮病变的风险(OR=10.77).结论 HPV-16感染是重庆地区喉癌的重要发病因素;HPV-16感染后E6片段的保留并持续表达与喉组织的癌变进程密切相关;HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用.     

妊娠期糖尿病并发酮症酸中毒致胎儿死亡1例报道

妊娠期糖尿病并发酮症酸中毒属妊娠期严重的急性并发症之一,是以高血糖、高血酮、严重脱水、酸中毒为主要特点的一组症候群,对母儿危害较大,围产儿病死率高达35％～90％.妊娠期糖尿病并发酮症酸中毒临床少见,且因妊娠生理改变,表现不典型,极易误诊及延误治疗.现将重庆市急救医疗中心收治的1例妊娠期糖尿病并发酮症酸中毒致胎儿死亡的病例报道如下,并分析讨论该病的诊治及预防措施.     

喉癌中HPV不同亚型的检测及测序

目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用.方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA.同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,-18E6/E7阳性率都明显高于其他各型.123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高.结论:HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染.     

重庆市老年人口腔健康现状及影响因素分析

目的 了解重庆市老年人口腔健康现状及其影响因素,分析口腔健康现状对老年人生活的影响.方法 抽取重庆市部分区(县)432名65～74岁的老年人,应用老年口腔健康评价指数、口腔健康调查表和自制的口腔健康行为调查表进行调查.结果 收回有效问卷共428份,根龋209例,牙龈出血297例,牙周袋大于或等于4 mm共178例,人均存留牙数(20.69士3.02)颗.良好行为组和不良行为组根龋、牙龈出血和牙周袋大于或等于4 mm的发病率和人均存留牙数差异均有统计学意义(P＜0.05).有根龋的老年人的生理功能和疼痛与不适评分明显下降,与未患根龋的老年人比较,差异有统计学意义(P＜0.05);牙周袋大于或等于4 mm的老年人的生理功能、心理社会功能和疼痛与不适评分明显下降,与无牙周袋或牙周袋小于4 mm的老年人比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 良好的口腔健康行为可保障老年人的口腔健康,应促进老年人的良好口腔健康行为的形成.     

雾化吸入米力农在慢性阻塞性肺疾病合并肺动脉高压患者术中的应用研究

目的 评价雾化吸入米力农对慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺动脉高压(PH)患者手术中心功能和肺动脉压改善的临床效果.方法 选择2015年6月至2016年6月重庆市急救中心确诊为COPD合并PH的手术患者44例,其中胸部手术23例,腹部手术13例,下肢骨折手术8例.患者分为对照组与治疗组,各22例.对照组接受常规综合治疗;治疗组除接受常规综合治疗外,在全身麻醉前雾化吸入米力农.两组均右颈内静脉置入漂浮导管检测临床指标:心输出量(CO)、肺动脉收缩压(PASP)、肺动脉平均压(PAMP)、肺动脉毛细血管楔坎压(PCWP).结果 治疗组治疗后较治疗前CO明显增高(P＜0.05);PASP、PAMP、PCW明显降低(P＜0.05).对照组治疗前后CO、PASP、PAMP、PCWP无明显改善,比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 COPD合并PH患者在手术前雾化吸入米力农,可以有效改善患者的心肺功能.     

诊断用苛求芽孢杆菌尿酸酶的剂型与储存方法

目的：考察重组苛求芽孢杆菌尿酸酶作为诊断试剂的剂型和储存方法。方法：将此重组尿酸酶制成干粉和液体剂型于-18℃和4℃储存,定期测定酶活性;在干粉制剂时加入保护剂于-18℃储存,在液体制剂时加入防腐剂于4℃储存,间隔适当时间监测酶活性。聚丙烯酰胺凝胶电泳分离此尿酸酶四聚体和二聚体,染色检测蛋白和酶活性。结果：此尿酸酶干粉和液体制剂在4℃储存28 d后对应的剩余酶活性分别为12%和100%,在-18℃冻存28 d后对应的剩余酶活性分别为24%和92%。在干粉制剂时加海藻糖、蔗糖或甘露醇作为保护剂于-18℃储存56 d后,剩余酶活性对应分别为100%、76%和43%。加叠氮钠或苯甲酸的液体制剂,在4℃储存56 d后对应的剩余酶活性分别为99%和82%。在-18℃储存至无活性的冻干粉制剂经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,发现此尿酸酶主要以无活性二聚体存在而活性四聚体很少。结论：此尿酸酶作为诊断试剂,可加入叠氮钠制成液体剂型在4℃储存。     

HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化

目的:构建HPV 16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件.方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp 的DNA片段.将所得片段与pGEX-KG 载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆.其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功.提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG 诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定.结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV 16L1抗体发生特异性反应.结论:HPV 16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础.     

中医药疗法对睡眠障碍相关性心血管疾病的干预作用进展综述

近年来越来越多的研究指出睡眠障碍可作为心血管疾病风险的独立预测因子,发现睡眠障碍通过增加心血管疾病的危险因素,影响机体的各个方面而诱发或加重心血管疾病。在中医的理论指导下,中医药对二者的治疗疗效显著,多途径作用于心血管疾病的危险因素,可改善睡眠与心血管症状,为以后防治心血管疾病提供新思路。     

肺弹性蛋白降解肽段人工抗原的合成与鉴定?

目的：制备和鉴定肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,为进一步研制慢性阻塞性肺疾病(COPD)免疫检测试剂盒打下良好基础。方法以 Sulfo-SMCC 为偶联剂,钥孔血蓝蛋白(KLH)为载体蛋白制备免疫原;经紫外扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)电泳鉴定偶联情况;以免疫原免疫 Balb/c 小鼠制备特异性抗体,间接竞争酶联免疫吸附实验(ELISA)法评价抗血清效价及特异性。结果紫外扫描和 SDS-PAGE 电泳确认了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原合成成功,其蛋白浓度为1.181 mg/mL,抗血清效价高于1∶64000,IC50为13.7 ng/mL,抗血清与无关肽段无交叉反应。结论本实验成功制备了肺弹性蛋白降解肽段人工抗原,其具有较好的免疫原性,为建立快速准确检测 COPD 免疫检测方法奠定基础。     

HP1188-IgY对感染幽门螺杆菌BALB/c小鼠的治疗作用

目的:评价抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)HP1188蛋黄抗体(HP1188-immunoglobulin yolk,HP1188-Ig Y)对BALB/c小鼠胃内H.pylori感染的治疗效果。方法:建立H.pylori感染BALB/c小鼠的动物模型,将建模成功的80只小鼠随机分为8组,每组10只。第1组(抗生素治疗组)、第2组(1 mg HP1188-Ig Y)、第3组(1 mg HP1188-Ig Y+30%硫糖铝)、第4组(5 mg HP1188-Ig Y)、第5组(5 mg HP1188-Ig Y+30%硫糖铝)、第6组(PBS对照组)和第7组(30%硫糖铝对照组)分别连续治疗10 d,每天1次;第8组间隔48 h皮下注射2.5 mg HP1188-Ig Y,共2次;另10只正常小鼠为第9组(健康对照组)。处理完成2周后取各组小鼠胃组织作H.pylori培养、快速尿素酶试验、PCR检测H.pylori特异性vac A和cag A及病理组织学检查,观察H.pylori清除情况并进行评分。结果:在小鼠体内,灌胃(1 mg HP1188-Ig Y+30%硫糖铝)即可有效治疗H.pylori感染引起的胃黏膜损害,其治疗效果与抗生素相似。结论:成功构建了H.pylori感染的BALB/c小鼠模型,选择30%硫糖铝为抗体保护剂,经口服HP1188-Ig Y可抑制小鼠胃内H.pylori感染。