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| HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化 | |
| 引用本文： | 彭方毅,姜海蓉,陈远翔,陈盛珍,林治华,彭方亮,赵卫兵,陈保德.HPV 16L1基因的原核表达及表达条件的优化[J].浙江大学学报(医学版),2010,39(4). |
| 作者姓名： | 彭方毅 姜海蓉 陈远翔 陈盛珍 林治华 彭方亮 赵卫兵 陈保德 |
| 作者单位： | 1. 重庆理工大学,药学与生物工程学院,重庆,400050 2. 重庆市第四人民医院,妇产科,重庆,400014 3. 重庆市第四人民医院,麻醉科,重庆,400014 4. 浙江大学医学院,附属第一医院,浙江,杭州,310003 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，国家自然科学基金重点项目，重庆市科委自然科学基金，重庆市教委科学技术研究项目，教育部科学技术研究重点项目 |
| 摘 要： | 目的:构建HPV 16L1基因的原核表达质粒,并优化其表达条件.方法:根据GeneBank中的HPV序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有HPV全长基因片段重组质粒为模板,经PCR扩增出1 500 bp 的DNA片段.将所得片段与pGEX-KG 载体连接,转化JM109大肠杆菌,筛选阳性克隆.其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-HPV16L1已构建成功.提取pGEX-KG-HPV16L1质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG 诱导后收集菌体,进行SDS-PAGE,Western Blot鉴定.结果:在大肠杆菌中获得HPV16L1基因融合表达,融合蛋白的相对分子量为83kDa;表达的蛋白能与抗HPV 16L1抗体发生特异性反应.结论:HPV 16L1基因在大肠杆菌中获得高效表达,为HPV16L1疫苗的研制奠定了基础. |
| 关 键 词： | 病毒蛋白质类/生物合成 病毒蛋白质类/遗传学 大肠杆菌/遗传学 基因表达 克隆 分子 乳头状瘤病毒 人/遗传学 原核表达 融合蛋白 疫苗 |
Prokaryotic expression of HPV 16L1 and optimization of expression conditions |
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| PENG Fang-yi,JIANG Hai-rong,CHEN Yuan-xiang,CHEN Sheng-zhen,LIN Zhi-hua,PENG Fang-liang,ZHAO Wei-bin,CHEN Bao-de.Prokaryotic expression of HPV 16L1 and optimization of expression conditions[J].Journal of Zhejiang University(Medical Sciences),2010,39(4). | |
| Authors: | PENG Fang-yi JIANG Hai-rong CHEN Yuan-xiang CHEN Sheng-zhen LIN Zhi-hua PENG Fang-liang ZHAO Wei-bin CHEN Bao-de |
| Abstract: | |
| Keywords: | HPV16L1 GST |
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