基于氨基酸性质的EB病毒抗原MHC-Ⅰ类分子限制性表位的定量构效关系建模

目的建立EB病毒(EBV)抗原表位的理论计算模型并用于其定量预测,为肿瘤免疫的多肽疫苗设计提供理论基础。方法从表位数据库中收集33条EBV抗原表位,使用逐步回归(STR)方法筛选2个对平衡解离常数(KD)贡献较大的结构参数用于表位的结构表征,最后用多元线性回归(MLR)方法建立结构参数与KD的定量构效关系(QSAR)模型。结果该模型具有较好的稳定性(R2=0.637,Q2=0.581)与预测能力(R2test=0.501)。结论此方法可确定表位中各个氨基酸的物理性质对于平衡解离常数的贡献,为表位设计与改造提供直接线索;STR和MLR相结合建模方法具有物化意义明确、易于解释及操作简便易行等优点。     

HLA-I限制性CTL表位改造的研究进展

内源性抗原被宿主的APC类细胞加工及提呈后,以抗原肽-MHC-I类分子复合物的形式表达于细胞表面,供特异性CD8+T细胞识别。然而,一些天然CTL表位与MHC-I的亲和力较弱,也容易引起机体的免疫耐受,并且在体内易受蛋白酶的攻击水解。针对这些不足,国内外许多学者采用了不同的方法对天然CTL表位进行改造。本文就近些年来天然CTL表位改造的主要方法做一简单的综述。     

IL-6信号通路与肿瘤

IL-6(intedeukin-6)是迄今为止发现的功能最为广泛的细胞因子之一,参与调节免疫反应、血细胞的生成及多种细胞的增殖和分化.IL-6通过与其受体结合,继而活化胞内一系列信号蛋白分子,最终实现IL-6反应基因的表达.起初对IL-6的研究是将其作为一种炎性因子,后来又发现它与肿瘤的发生、发展及侵袭、转移密切相关.现对IL-6及其受体介导的信号通路及IL-6在肿瘤发生、发展中的作用及其机制作一简要综述.     

原位杂交检测HPV-16E6,-18E6在喉癌组织中的表达

目的 检测HPV L1和16/18DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用.方法 用原位杂交(ISH)检测123例喉癌组织及123例"正常人"的喉粘膜上皮组织中HPV-16/18 mRNA.结果 在123例喉癌标本中,ISH检出HPV-16E6的阳性率为46.34%,HPV-18E6的阳性率为35.77%.123例"正常人"的喉粘膜ISH结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高.对上述结果用SPSS 10.0软件进行case-control X2分析,HPV-16感染会增加喉上皮病变的风险(OR=14.58),感染HPV-18时,喉上皮病变的风险(OR=10.77).结论 HPV-16感染是重庆地区喉癌的重要发病因素;HPV-16感染后E6片段的保留并持续表达与喉组织的癌变进程密切相关;HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用.     

蛋白激酶抑制剂在类风湿性关节炎的研究进展

类风湿性关节炎（Rheumatoidarthritis,RA）的发病率高、患病人口多,目前抗风湿性关节炎疾病缓解药物（disease-modifyingantirheumaticdrug,DMARD）主要是针对关键细胞因子靶点的生物制剂,但生物制剂面临着患者需要反复注射、价格昂贵等不足而不能满足RA的治疗。新开发DMARD药物已有针对Janus激酶（Januskinase,JAK）、脾酪氨酸激酶（spleentyrosinekinase,Syk）、p38激酶的抑制剂进入临床试验研究,蛋白激酶抑制剂的研发将为RA的治疗带来新的方法。     

肿瘤抗原TRAG-3 HLA-A2.1限制性CTL表位的鉴定

目的寻找并鉴定TRAG-3来源的HLA-A2．1限制性CTL表位，为临床开展基于TRAG-3表位的特异性免疫治疗奠定基础。方法应用超基序和量化基序方案，预测TRAG-3 HLA-A2．1限制性CTL表位。用计算机分子模拟的方法，对预测表位进行分子模拟。用流式细胞仪分析测定各肽与HLA-A2．1分子的结合力。最后，应用HLA-A2．1阳性健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)对其体外诱导的CTL效应进行鉴定。结果应用超基序和量化基序方案，预测出4个候选表位肽，用计算机分子模拟发现其中只有TRAG-3（37-45)不符合HLA-A2．1限制性CTL表位的特点。在上述4个九肽中，TRAG-3(58-66)与HLA-A2．1分子的结合力最高。在进一步的CTL诱导实验中，发现TRAG-3(58-66)能够诱导健康志愿者PBMC产生特异性CTL。结论表位预测、计算机分子模拟、结合力分析和体外CTL诱导实验的一致性较好。4种方法一致认为，TRAG-3（58-66）(ILLRDA-GLV)为HLA-A2．1限制性CTL表位。该表位肽可望用于基于TRAG-3抗原多肽疫苗的临床实验。     

抗原NY-BR-1的HLA-A2限制性CTL表位的初步鉴定

目的：鉴定乳腺癌分化肿瘤抗原NY-BR-1的HLA-A2限制性CTL表位。方法：采用量化基序法初步预测NYBR-1的HLA-A2限制性CTL表位；分子动力学方法进一步筛选量化基序法中评分最高的3个表位肽；HLA-A2亲合力鉴定预测的结果。结果：分子动力学和HLA-A2亲合力实验均证明，在量化基序法预测的3个候选CTL表位中，NY-BR-11043-1051与HLA-A2亲合力最佳。结论：NY-BR-11043-1051可能为乳腺癌分化抗原NY-BR-1的HLA-A2限制性CTL表位。     

TRAG-3 HLA-A2.1限制性CTL表位的预测及结合力分析

目的：寻找并鉴定TRAG-3来源的HLA-A2.1限制性CTL表位，为临床开展基于TRAG-3表位的特异性免疫治疗奠定基础。方法：应用超基序和量化基序方案预测TRAG-3HLA-A2.1限制性CTL表位；采用标准Fmoc方案合成侯选表位，RP-HPLC纯化、分析多肽，质谱鉴定各肽；最后，用T2细胞株测定各肽与HLA-A2.1分子的结合力。结果：超基序和量化基序方案预测出了4个侯选表位肽；标准Fmoc方案合成的各肽经纯化后纯度大于90％，各肽的相对分子质量与理论值一致；在4个侯选表位肽中，ILLRDAGLV(58-66)九肽与HLA-2.1的结合力最强。结论：表位预测的结果与结合力分析实验结果一致性较好，两者联合应用初步认为ILLRDAGLV(58-66)九肽为TRAG-3HLA-A2.1限制性CTL表位的可能性最大。     

小鼠肥大细胞瘤基因疫苗的免疫治疗作用研究

目的：探讨α－病毒RNA复制酶对基因疫苗的免疫学效应的加强作用，寻找更好的基因疫苗形式。方法：将小鼠肥大细胞瘤P815的肿瘤特异抗原PIA基因克隆到含SFV的RNA复制酶的真核表达载体pSMART2a中，以此作为肿瘤基因疫苗，观察该疫苗对P815种植瘤的防治作用、特异细胞毒T淋巴细胞激活和抗体的生成情况。结果：该重组基因疫苗在体外有很好的表达，注射后CTL的最大杀伤率为60%，而普通载体疫苗形式pCI-neo/PIA则只有40%的杀伤活性；在观察期限内，前者的动物成瘤率和动物生存率分别为20%和40%。后者则分别为60%和20％。两种情况下都不能检测到任何特异抗体的产生。结论：α－病毒RNA复制酶对基因疫苗的免疫学效应有加强作用。     

喉癌中HPV不同亚型的检测及测序

目的:检测人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)各型DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用.方法:用PCR检测123例喉癌组织及123例喉粘膜上皮组织中HPV各型DNA.同时进行DNA测序,结果:在123例喉癌标本中,HPV-L1,-16E6/E7,-18E6/E7阳性率都明显高于其他各型.123例喉粘膜PCR结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高;HPV-L1的阳性率高于HPV-16E6、E7,随着组织病变程度加重,HPV-L1的检出率逐渐增高.结论:HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用;L1片段适合用于检测HPV感染.