1504-siRNA对EphA3表达肿瘤细胞HCT116的抑制作用研究

目的研究原癌基因EphA3的小干扰RNA(small interfering RNA)1504-siRNA对高表达结肠癌细胞HCT116的增殖抑制作用。方法将1504-siRNA质粒用Vigofect转染试剂瞬时转染HCT116细胞,36～48 h后,收集蛋白,用Western印迹检测EphA3及AKT信号通路中的蛋白分子表达,收集细胞,进行噻唑蓝(MTT)实验、平板克隆形成实验和软琼脂克隆形成实验。结果 1504-siRNA能抑制HCT116细胞的EphA3蛋白水平,抑制其增殖、平板克隆和软琼脂克隆的形成,抑制pmTOR、p-c-Raf、pAKT、p-4ebp1等信号分子的表达。结论 1504-siRNA抑制HCT116细胞的增殖、存活能力和恶性程度,这可能是通过抑制AKT信号通路来实现,它有望作为肿瘤治疗的候选药物。     

PC-1基因功能研究：PC-1蛋白兔多克隆抗体制备的改进和应用

目的：获得高效价PC-1蛋白的兔多克隆抗体，用于PC-1功能的实验。 方法：实验于2004-02／08在解放军军事医学科学院生物工程研究所完成。以纯化后的PC-1蛋白及其N端46个氨基酸与GST的融合蛋白（GST—PC-1和GST-PC-1-46）为抗原，通过一种经腘淋巴结注射、免疫家兔的改进的免疫方法制备兔多克隆抗体。应用ProteinA亲和层柝纯化抗体。以酶联免疫吸附和Western-blot及免疫组化法鉴定所得抗体。 结果：①2个兔多克隆抗体的效价分别为1：12800和1：51200。②PC-1在高恶性前列腺癌细胞C4—2中高表达，在低恶性前列腺癌细胞LNCaP中有少量表达。③经免疫组化染色后，含有PC-1蛋白的C4—2及LNCaP细胞均呈阳性反应，细胞质中可见明显着色，而空泡状的胞核则没有着色，提示PC-1蛋白主要分布在细胞浆中。结论：用一种改进的免疫方法，获得高效价的、可应用于酶联免疫吸附和Western—blot及免疫组化实验的PC—1蛋白兔多克隆抗体。     

老年男性体脂分布类型与代谢相关性疾病的关系研究

目的：探讨老年男性体脂分布类型与代谢相关疾病的关系。方法：群体随机抽查上海地区海军离退休干部356人，根据体重指数(BMI)和腰围(WC)进行体脂分型分组，统计各组TC、LDL—C、HDL-C、TG、FBG值和糖尿病、高血压病、高脂血症、冠心病与高尿酸血症患病率，及其并存病种效。结果：老年男性各项检测值异常率、代谢相关性疾病患病率以及共存二种疾病以上的百分比，以中心型超重组为最高，非中心型非超重组(正常组)最低，中心型非超重组、非中心型超重组居中；无代谢相关性疾病百分比以非中心型非超重组(正常组)最高，中心型超重组最低。结论：体脂分布是影响与代谢有关疾病发病率的重要因素。     

华发令抗凝治疗的影响因素和副作用

华发令(Warfarin)能够干扰维生素K的环化及2、3环氧化物生成,抑制依赖维生素K的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ的产生,促进抗凝蛋白C和S的合成,从而发挥抗凝作用。20世纪80年代进行的几个大型随机对照临床试验结果显示,华法令降低脑卒中危险率68％,阿司匹林降低21％,均明显优于安慰剂组,华法令比阿司匹林更有效(降低危险率相差40％)。目前华发令正被日益广泛地应用,但是华发令的量效关系个体差异很大,影响因素较多,应用不当也会产生严重副作用。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察高压氧(HBO)作用下脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况,进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法沙土鼠20只,采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0.15MPaHBO治疗组、0.25MPaHBO治疗组,0.25MPa压力空气(hyperbaricair,HBA)对照组,每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型,缺血20min后再灌注3d,并用0.15MPa和0.25MPa压力的高压氧治疗(60min/d,连续3d)后,应用免疫组化LSAB方法,观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白,并且神经元发生凋亡,未见神经元表达Bcl-2蛋白;高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白,并且0.25MPa高压氧治疗组比0.15MPa高压氧治疗组变化更显著,而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化,但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白,对Bax蛋白表达则无明显作用,使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高,从而起到保护神经元的作用,这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

高压氧治疗对急性脑创伤后血脑屏障损伤大鼠MMP-9 mRNA表达的影响

目的 观察高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)治疗对急性脑创伤后血脑屏障损伤大鼠MMP-9 mRNA表达的影响,探讨高压氧治疗急性脑损伤的机制.方法 选取40只SD大鼠,采用自由落体打击法制备急性脑创伤模型.造模成功后采用数字表法随机分为4组,每组10只.分别为正常对照组:动物置于加压舱内,模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件.急性颅脑损伤24 h组:动物颅脑打击后1h,置于加压舱内,模拟除压力和氧浓度以外的其他实验条件,于伤后24 h断头取材.急性颅脑损伤高压氧治疗24h组:动物颅脑打击后1h和12 h,置于高压氧舱内,在0.25 MPa HBO下各停留40 min,于伤后24 h断头取材.急性颅脑损伤常氧高氮治疗24 h组:动物颅脑打击后1h和12 h,置于高压氧舱内,在0.25 MPa常氧高氮环境下各停留40 min,于伤后24 h 6只断头取材行含水量及RT-PCR测定,4只行脑组织伊文蓝(Evans blue,EB)测定.结果 急性颅脑损伤伤侧和非伤侧脑组织含水量为77.39 mg和72.25 mg,与急性颅脑损伤HBO治疗24 h组(70.83 mg、70.27 mg)比较差异有统计学意义(P＜0.05).急性颅脑损伤经0.25 MPa HBO治疗后,脑组织含水量较未治疗组下降(P＜0.01),高压氧治疗组半球及海马EB均显著增加(P＜0.05,P＜0.01).急性颅脑损伤经0.25 MPa HBO治疗后,损伤侧和非损伤侧半球及海马EB较未治疗组下降(P＜0.0,1),急性颅脑损伤组及0.25 MPa常氧高氮组损伤侧半球及海马EB多于非损伤侧(P＜0.05),0.25 MPa HBO治疗组损伤侧半球及海马EB高于非损伤侧(P＜0.05).急性颅脑损伤经0.25 MPa HBO治疗后,损伤侧和非损伤侧半球及海马MMP-9 mRNA较未治疗组下降(P＜0.0,1).急性颅脑损伤组、0.25 MPa常氧高氮组及0.25 MPa HBO治疗组损伤侧半球及海马MMP-9mRNA高于非损伤侧(均P＜0.05).结论 HBO治疗急性脑创伤可以保护血脑屏障,从而减轻脑水肿,机制之一是HBO治疗减少了MMP-9 mRNA表达.     

高血压药物治疗达标新理念

<正>高血压治疗的最终目的是延缓或逆转患者潜在动脉粥样硬化进程,最大限度地降低其心、脑、肾和血管等靶器官损害及其病残率和病死率。为此,近年在高血压药物治疗中普遍强调降压达标。但是,日益增多的研究证明,对于高血压预后的影响,不仅限于血压的高低,还在于对其节律异常的有效控制以及对其预后具有协同作用的多种危险因素的合理治疗。这里,统称其为高血压药物治疗达标新理念,并予扼要介绍。     

基因诊断技术临床应用及研究进展

近年来,随着以基因工程为核心的现代生物工程的巨大进步,尤其是“人类基因组计划”的完成,为整个医学界带来了良好的发展契机。不论是人类的器质性疾病还是功能性疾病,都可以从基因上去探究病因,寻找防治方法,人类的疾病或者健康状况都与特定的基因有关。因此基因技术在各种疾病的诊断与治疗中应用广泛。     

电化学发光免疫分析技术与临床应用

本文将对电化学发光免疫分析技术的工作原理和在临床中的应用进行讨论。     

永久性心脏起搏引起上腔静脉综合征的发病原因及其治疗

永久性经静脉心内膜起搏可引起上腔静脉综合征(PSVCS)，其发病的直接原因是上腔静脉内血栓形成和(或)纤维性狭窄，同时无有效的例枝循环建立，导致上腔静脉阻塞，治疗方法有抗凝治疗、溶栓治疗、上腔静脉形成术及支架置入术、手术治疗，根据其病程和发病原因，采用不同方法积极治疗则预后良好。