沉默视黄酸核受体α损伤大鼠原代海马神经元的钙兴奋性

目的:了解视黄酸核受体α (RARα)对大鼠神经元功能的必要性.方法:采用组织消化原代贴壁法分离培养大鼠原代海马神经元,利用腺病毒载体特异沉默RARα;利用Real-Time PCR分析沉默RARα对神经元视黄酸(RA)信号各受体以及神经细胞标志物的影响;利用活细胞钙影像分析沉默RARα对神经元钙兴奋性的影响.结果:免...     

全反式维甲酸抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化信号通路中Fosl1直接调控PPARγ2

目的:研究激活蛋白1(AP-1)在全反式维甲酸(ATRA)抑制大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化信号通路中的调控机制。方法:采用SD大鼠原代BMSCs,体外分离、培养和成脂诱导。油红O染色鉴定细胞脂滴形成情况。应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脂肪细胞形成相关蛋白脂肪酸结合蛋白(FABP)、脂蛋白脂肪酶(LPL)、脂肪酸转运蛋白(CD36)、脂滴包被蛋白(perilipin)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)以及AP-1家族各成员(Fosl1、Fosl2、c-Fos、c-Jun、Jun B、Jun D和Fos B)的mRNA表达水平。Western blot检测相关蛋白的表达水平。染色质免疫共沉淀(Ch IP)检测相关蛋白(RARγ和Fosl1)与PPARγ2基因是否存在相互作用。结果:油红O染色显示ATRA处理组中细胞脂滴数量明显减少。BMSCs成脂诱导12 d后,与对照组相比,1μmol/L ATRA处理组FABP、LPL、CD36、perilipin和PPARγ2的mRNA表达均显著降低。RT-qPCR检测AP-1家族各转录因子表达结果显示Fosl1在ATRA处理组成脂诱导第2天、第6天和第10天表达均显著升高。Westren blot结果表明ATRA处理组Fosl1蛋白表达水平显著升高,而PPARγ2蛋白表达降低。Ch IP-qPCR实验发现Fosl1蛋白可结合在PPARγ2基因启动子区域,而RARγ蛋白未直接结合在PPARγ2基因启动子区域。结论:ATRA可抑制BMSCs成脂分化及脂质代谢相关蛋白的表达,可能与其通过上调Fosl1直接结合PPARγ2基因启动子区域、下调PPARγ2表达有关。     

不同剂量维生素A强化饼干对3～6岁儿童维生素A营养状况的干预效果

背景:维生素A缺乏性疾病是一个世界性的儿童健康问题,中国西部及边远地区尤为严重,需要进行营养干预。目的:比较补充3种不同剂量强化维生素A饼干对3～6岁儿童维生素A营养状况的改善效果,探索预防维生素A缺乏性疾病的强化饼干的理想剂量。设计:随机对照观察。单位:重庆市卫生局卫生监督所、重庆医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室和重庆医科大学儿童医院儿童营养研究中心。对象:调查于2002-03/12完成,选择重庆市巴南区8个幼儿园的3～6岁儿童753名,监护人均知情同意。随机分为4组,即30%推荐摄入量组、100%推荐摄入量组、2万国际单位组及20万国际单位组。方法:①30%推荐摄入量组(177名)每日补充维生素A30%每日推荐摄入量(500IU)强化饼干1次。②100%推荐摄入量组(173名)每日补充维生素A100%每日推荐摄入量(1666IU)强化饼干1次。③2万国际单位组(209名)每周补充维生素A2万国际单位强化饼干1次。④20万国际单位组(194名)补充维生素A20万国际单位胶丸1次。所有儿童干预前及干预3个月时测定身高、体质量、血清视黄醇、前白蛋白、血红蛋白及视黄醇结合蛋白。30%推荐摄入量组中有87名儿童在补充9个月后再次复查以上指标。主要观察指标:①各组儿童干预前及干预3个月后维生素A缺乏性疾病检出率。②各组儿童干预前及干预3个月后血清视黄醇、血清前白蛋白、血清视黄醇结合蛋白、血红蛋白、身高和体质量。结果:因样本流失和检测技术的问题,复查仅得580名儿童的检测结果。①各组儿童维生素A缺乏性疾病检出率比较:补充3个月后,30%推荐摄入量组、100%推荐摄入量组、2万国际单位组及20万国际单位组儿童维生素A缺乏性疾病检出率均较治疗前显著下降[1.48%,1.42%,1.21%,2.16%;6.78%,6.54%,8.61%,8.25%(χ2=3.86～8.57,P<0.05～0.01)]。②各组儿童血清视黄醇、血清前白蛋白、血清维生素A、血红蛋白、身高和体质量比较:补充3个月后,自身对照除30%推荐摄入量组的前白蛋白和血红蛋白外,各组儿童其余各项指标均明显增加(t=2.52～37.44,P<0.05～0.01)。2万国际单位组血清维生素A的升高幅度明显大于其他组(F=4.62,P<0.01),30%推荐摄入量组血红蛋白、前白蛋白和身高的增长幅度明显小于其他组(F=5.0～7.78,P<0.01)。30%推荐摄入量组补充9个月后,血红蛋白和前白蛋白的升高明显大于其余组(F=11.62,10.21,P<0.01),血清视黄醇的升高仍低于2万国际单位组(F=4.21,P<0.01)。结论:补充3种不同剂量的维生素A强化饼干和20万国际单位维生素A胶丸,均可明显改善维生素A的营养状况和血红蛋白水平。其中30%推荐摄入量和100%推荐摄入量风险小、且每日补充能稳定维持体内维生素A水平,可能是更适于儿童的长期补充剂量,而30%推荐摄入最优于100%推荐摄入量。     

如何开展现场调查研究

现场调查研究作为一种研究手段或方法,广泛用于许多领域的科技活动之中,特别是在预防医学领域,现场调查更是作为一种常用的研究手段与方法被广泛应用.     

重庆市铜梁地区重金属污染对2岁幼儿神经心理发育的影响

目的探讨重庆市铜梁地区燃煤电厂关闭前后环境污染物(重金属铅、镉、汞)对儿童早期神经心理发育的影响。方法采用前瞻性队列研究方法,纳入122对(关闭前2年)和118对(关闭后2年)健康母子,分别检测母血和脐血血清铅、镉、汞水平,并测试幼儿2岁时的神经心理发育水平。结果该地区电厂关闭前2年出生婴儿脐血汞水平与其2岁时运动、语言、个人-社会及平均发育商存在负相关(β=-0.202,β=-0.202,β=-0.231,β=-0.250,P<0.05);关闭后2年出生婴儿脐血汞水平与其2岁时语言、个人-社会及平均发育商存在负相关(β=-0.136,β=-0.241,β=-0.182,P<0.05)。关闭前后出生婴儿脐血铅高水平组(>34.0μg/L,>34.6μg/L)各能区发育商均低于脐血铅低水平组(≤34.0μg/L,≤34.6μg/L),其中适应和个人-社会发育商均有统计学差异(P<0.05)。结论该地区存在铅、镉、汞重金属污染,且铅、汞污染对2岁儿童神经心理发育造成损害。     

atRA抑制大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化

目的探讨高浓度全反式视黄酸(all-trans retinoic acid,atRA)抑制大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrowmesenchymal stem cells,BMSCs)向脂肪细胞分化的机制。方法体外分离、培养和诱导大鼠BMSCs;在成脂诱导液中加入0.1、0.5、1.0、5.0μmol/L atRA,光学显微镜下观察细胞形态及油红O染色变化;油红O染色提取法分析不同浓度atRA对BMSCs成脂分化的影响;real-time PCR测定细胞视黄酸受体(RARα、RARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CEBPα)及过氧化物酶体增殖激活受体γ2(PPARγ2)mRNA水平的变化。结果细胞形态及油红O染色观察发现,在0.1、0.5、1.0、5.0μmol/L atRA作用下大鼠BMSCs向脂肪细胞分化受到抑制,且呈浓度依赖性;油红O染色提取法半定量测定结果显示,随着atRA浓度升高,分化细胞内脂肪含量降低(P<0.01);real-time PCR检测显示与血清组(未加atRA)相比,加入atRA后,大鼠BMSCs的CEBPα和PPARγ2表达显著降低(P<0.05),RARα表达无显著差异[血清组vs 1.0μmol/L atRA组:(0.008 4±0.001 9)vs(0.009 1±0.001 3),P>0.05],但RARγ表达显著增加[血清组vs 1.0μmol/L atRA组:(0.022 6±0.001 2)vs(0.053 1±0.002 3),P<0.01]。结论 0.1、0.5、1.0、5.0μmol/L atRA可抑制大鼠BMSCs向脂肪细胞分化,其机制可能与RARγ的上调及CEBPα、PPARγ2的下调有关。     

维生素A复合其他微量营养素对3～6岁儿童营养状况的影响

目的观察维生素A复合其他微量营养素对儿童营养状况的影响。方法采用分层与整群抽样相结合的方法,在重庆市近郊7所幼儿园中随机选取3所,将所有3～6岁、符合纳入标准的350名学龄前儿童作为受试对象。按分层随机的方法,将350名受试儿童随机分成单独补维生素A组(A组)、补维生素A加锌组(AZ组)及补维生素A与多种微量营养素复合物组(AMM组)。3组受试儿童同时连续补充6个月。干预前后分别测量儿童身高、体质量,计算儿童体格发育Z评分,评价儿童营养不良的发生率;检测血清维生素A、锌、铁、钙和血红蛋白水平;在营养素干预前采用问卷方式调查儿童的一般情况、家庭状况及饮食习惯等;在营养素干预期间采用24h膳食回顾法调查受试儿童膳食营养素摄取情况。结果 24h膳食回顾调查结果显示,该地区3～6岁儿童膳食中维生素A、锌和钙摄入不足。营养素干预6个月后,3组儿童血清锌和铁水平较干预前差异均有统计学意义(P均<0.01),AZ组血清锌水平的升高幅度高于AMM组(P<0.05)。AZ组及AMM组干预后血清维生素A水平分别升高了(0.05±0.23)μmol/L及(0.09±0.28)μmol/L(P<0.05,P<0.01);单独补充维生素A组血清维生素A水平升高了(0.03±0.27)μmol/L,但差异无统计学意义(P>0.05)。AMM组儿童血清维生素A水平升高幅度高于A组和AZ组(P均<0.05);AMM组儿童血红蛋白水平升高幅度高于A组(P<0.05)。A组、AZ组及AMM组中儿童营养不良的比例均有不同程度的下降,但3组间变化值差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论复合多种微量营养素的补充对3～6岁儿童营养状况的作用较两种微量营养素的补充未见显著性差异,儿童微量营养素的补充应根据其存在的主要营养问题选择最优营养素组合,以改善儿童营养健康状况。     

妊娠期妇女贫血及体内相关微量营养物水平的调查和分析

目的对妊娠期妇女贫血及相关微量营养物水平进行调查,分析妊娠期不同阶段贫血对新生儿体格指标的影响。方法选取重庆市铜梁县299名孕妇作为调查对象,抽取空腹静脉血样,对血红蛋白及贫血相关微量营养物进行检测,并对妊娠结局及新生儿体格指标进行随访。结果299名孕妇中,维生素A缺乏、边缘性维生素A缺乏、铁缺乏和维生素B．,缺乏的发生率分别为11．O％（33／299）、43．8％（131／299）、5．7％（17／299）和0．3％（1／299）;妊娠贫血的发生率为24．5％（62／253）。孕早期贫血组孕妇血浆维生素A和铁浓度显著低于非贫血组（P〈0．05）;孕晚期贫血组新生儿出生体质量显著低于非贫血组（P〈0．05）。结论重庆市铜梁县妊娠贫血及妊娠期维生素A和铁缺乏的发生率较高,需加强孕期营养饮食指导,及时治疗,以保证母婴健康。     

孕期边缘性维生素A缺乏对新生大鼠VA营养及LRAT的影响

目的:探讨孕期边缘性维生素A缺乏(Marginal vitamin A deficiency,MVAD)对胎鼠维生素A(Vitamin A,VA)营养及VA储存关键酶:卵磷脂视黄醇酰基转移酶(Lecithin retinol acyltransferase,LRAT)的影响.方法:16只健康成年雌性Wistar大鼠(260～300 g)随机分为正常对照(Control)组和MVAD组,每组8只,成功制备上述模型后,与正常雄性Wistar大鼠合笼.收集孕鼠和胎鼠血清、肝脏组织.采用高效液相色谱法测定VA含量;分别采用RT-PCR和Western blot技术检测肝脏LRAT在mRNA水平和蛋白水平上的变化.结果:MVAD组孕鼠,胎鼠血清VA,肝脏VA明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.001);同时,相对于Control组,MVAD组LRAT mRNA和蛋白水平明显下调(P<0.00).结论:孕期MVAD,胎鼠的血清维生素A水平明显下降,不能满足肝脏VA储存.血清VA水平不能很好地反映机体VA营养的真实水平,肝脏VA含量更能准确反映机体VA含量.LRAT在维生素A储存过程中起着关键作用.     

重庆市渝中区7岁以下儿童体格生长状况调查及分析

目的:了解重庆市渝中区7岁以下儿童体格生长现状,为进一步改善儿童生长发育水平提供依据.方法:利用2008年8月至2009年6月重庆市渝中区7岁以下儿童共10251例体格资料进行描述性分析,将其分别与2005年中国九市标准及WHO标准比较,对儿童体格发育进行评价.结果:男女儿童体格生长符合体格生长规律,男童生长状况优于女童,男女童体重在1岁以前较2005年中国九市标准低,在1岁以后接近该标准;各年龄段男女童身高均低于2005年中国九市标准及WH0标准;头围与上述标准差别不大.3岁以下儿童总体低体重发生率约1.52%,生长迟缓1.73%,消瘦0.13%,超重/肥胖7.65%.结论:重庆市渝中区儿童身高生长水平总体偏低;相对于营养不良的体格指标,超重肥胖危险发生率较高,需尽早采取干预措施.