NGAL 及 MMP9在原发性肝癌患者血清中表达及意义

目的：探讨原发性肝癌（PHC）患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL ）及基质金属蛋白酶9（MMP9）的变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测47例 PHC 患者（PHC 组）及19例健康体检者健康血清中 NGAL 及 MMP9水平,并分析二者与临床病理的联系,同时使用 ROC 曲线分析二者对 PHC 的诊断价值,Kaplan-Meier 生存曲线分析不同 NGAL 、MMP9水平的生存差异。结果 PHC 组 NGAL 、MMP9水平明显高于健康体检者对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）;NGAL 及 MMP9的水平在Ⅲ～Ⅳ期组高于Ⅰ～Ⅱ期,差异有统计学意义（P ＜0．05）;血清 MMP9、NGAL 检测灵敏度分别为70．2％和83．0％。二者联合检测可提高灵敏度至94．9％。 Kaplan-Meier 生存分析发现血清 NGAL 水平高患者预后差。结论 PHC 患者血清 NGAL 及 MMP9与 PHC 的发生、发展密切相关;联合检测血清水平 NGAL 及 MMP9可明显提高敏感度,对 PHC 诊断及预后指标有一定的价值。     

CD13+CD133+和CD13-CD133-肝癌细胞的生物学差异及临床意义

目的 比较HuH7细胞系CD13+CD133+和CD13-CD133-肝细胞癌(HCC)细胞的生物学差异,并探讨其临床意义.方法 通过对CD13+CD133+ HCC细胞增殖情况、细胞周期、培养10d分化情况、裸鼠体内成瘤能力,以及对5-FU和吡柔比星等化疗药物的敏感性等生物学特征的研究,分析CD13+CD133+HCC细胞亚群的临床意义.结果 CD13+CD133+HCC细胞增殖速度明显快于CD13-CD133-HCC细胞,78.45％的CD13+CD133+HCC细胞处于G0/G1期,2.19％处于G2/M期,19.36％处于S期;62.18％的CD13-CD133-HCC细胞处于G0/G1期,11.88％处于G2/M期,25.95％处于S期.在裸鼠体内,1×103个CD13+CD133+HCC细胞即可成瘤,而1× 105个CD13-CD133-HCC才可成瘤.CD13+CD133+HCC细胞对5-FU和吡柔比星具有抵抗特性,而其他3种亚群较易被杀灭.FACS分选的CD13+CD133+HCC和CD13-CD133-HCC细胞经过10d培养后,CD13+CD133+HCC亚群的CD13、CD133标志表达与HuH7细胞系相近,而CD13-CD133-HCC细胞不具有此能力.结论 CD13+CD133+HCC细胞具有肿瘤干细胞的特征,可能与临床肝癌复发和转移有关,是临床治疗过程中尤其需要杀灭的细胞.     

白藜芦醇对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及其与Sirt1-p53通路的关系

目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的保护作用及其具体分子机制.方法 雄性6周龄SD大鼠20只[体质量(200 ±20)g]随机数字法分为4组(n=5):假手术组、缺血再灌注组、RES预处理组、RES预处理+抑制剂组.建立大鼠肝脏70％热缺血再灌注模型(缺血1h,再灌注6h),并提前1h给予RES及Sirt1抑制剂(EX527).建模后检测血清标本中ALT活力及肝组织SOD活性,HE染色观察肝组织病理损伤,TUNEL法检测肝细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测肝组织Sirt1、乙酰化p53、Bax表达水平.结果 RES能够显著降低由HIRI引起的ALT活力升高(P＜0.01)并增加SOD活性(P＜0.01),显著缓解由HIRI引起的肝脏病理学改变(P＜0.01)和减少肝细胞凋亡(P＜0.01),显著提高Sirt1和Bax mRNA表达水平(P＜0.01,P＜0.01),提高Sirt1和Bax蛋白表达水平(P＜0.01,P＜0.01)并降低乙酰化p53蛋白表达水平(P＜0.01).结论 RES能减轻缺血再灌注诱导的肝脏损伤,该保护作用部分是通过激动Sirt1-p53通路实现.     

HuH7细胞系CD13~+CD133~+HCC细胞分选及CSCs特性分析

目的探讨CD13、CD133双荧光标志流式细胞术(fluorescence activated cell sorter,FACS)分选人肝癌HuH7细胞系CD13+CD133+HCC细胞方法及癌干细胞(cancer stem cells,CSCs)特征。方法 CD13、CD133双标志,采用FACS从人肝癌HuH7细胞系分选出CD13+CD133+HCC、CD13+CD133-HCC、CD13-CD133+HCC、CD13-CD133-HCC等4种细胞亚群;通过CD13+CD133+HCC细胞生长曲线,细胞周期,形成肿瘤球和裸鼠体内成瘤能力,及对5-FU、吡柔比星化疗药物的敏感性研究,分析CD13+CD133+HCC细胞是否具有CSCs生物学特征。结果人肝癌HuH7细胞系CD13+CD133+HCC细胞占23.8%,3.1%分选为CD13+CD133+HCC细胞,78.45%的CD13+CD133+HCC细胞处于G0/G1期;CD13+CD133+HCC细胞增殖明显快于其他3个细胞亚群;在裸鼠103个CD13+CD133+HCC细胞就可以成瘤,而1.0×105个CD13-CD133-HCC只有2只成瘤(2/5),干细胞培养CD13+CD133+HCC细胞8～15 d形成肿瘤球;CD13+CD133+HCC细胞对5-FU和吡柔比星具有抵抗特性,而其他3个亚群较易于杀灭。结论 CD13、CD133双标志FACS从HuH7分选的CD13+CD133+HCC细胞具有CSCs特征,可能成为HCC治疗靶细胞。     

125例低位直肠癌保留肛门括约肌手术分析

目的：探讨低位直肠癌保留肛门括约肌手术的安全性、适应证及术后并发症的防治。方法：对125例低位直肠癌患者施行保留肛门括约肌手术进行回顾性总结。结果：125例患者术后无手术死亡病例，无肠瘘、盆腔积液、肠坏死、肠回缩等并发症发生。局部复发3例(2.4％)，乙状结肠粘膜脱出4例(3.2％)，肛门狭窄3例(2.4％)。患者随访率77.6％(97/125)，平均随访4.3年。结论：保留肛门括约肌手术既可以避免结肠造口，又可以有效防止吻合口瘘，是一种安全有效的保肛术式。     

回盲部癌并发阑尾周围脓肿8例分析

回盲部癌并发阑尾周围脓肿在临床中比较少见，回顾我院在1992～2003年间共收治回盲部癌并发阑尾周围脓肿并行手术治疗8例，现报告如下：     

胰腺癌基因治疗靶点研究现状

胰腺癌具有高发病率和高死亡率的特点,并且是最难治疗的癌症之一。因此,迫切需要开展新的治疗方法。自1990年首次基因治疗临床试验以来,伴随分子生物学技术的进步,基因疗法得到了巨大的提高和空前的发展。在胰腺癌基因治疗过程中常采用外源基因的导入、表达,变异基因的修复,抑制转录,破坏癌变基因等方法来达到治疗目的,其中最关键的就是治疗靶点的选择。就近年胰腺癌基因治疗靶点研究成果与存在问题作一综述。     

回盲部癌并发阑尾周围脓肿8例分析

回盲部癌并发阑尾周围脓肿在临床中比较少见,回顾我院在1992～2003年间共收治回盲部癌并发阑尾周围脓肿并行手术治疗8例,现报告如下:1临床资料1.1一般资料本组8例,其中男性5例,女性3例,年龄41～73岁,平均56岁,均以右下腹疼痛就诊;B超提示:右下腹不均质肿块内有液性暗区,伴周围炎性渗出。入院诊断:急性阑尾炎合并阑尾周围脓肿形成。经抗感染、补液及局部硫酸镁湿热敷等保守治疗5～7d,B超复查提示:阑尾周围脓肿包块明显缩小,有类同心圆征,考虑回盲部肿瘤;3例直接行剖腹探查术;5例先行纤维结肠镜活检,经病检报告为回盲部癌,均行右半结肠切除术…     

乳腺癌肿大腋窝淋巴结中BCSCs相关基因表达与肿瘤复发、转移的关系

目的：探索乳腺癌干细胞（BCSCs）相关基因CD44、Twist1、OCT4在乳腺癌患者癌组织、腋窝肿大淋巴结中的表达与乳腺癌转移及复发的关系。方法以免疫组化法和组织免疫荧光聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测乳腺癌患者癌组织、腋窝淋巴结中BCSCs相关因子CD44、CD24、Twist1和OCT4的基因和抗原表达。结果在术前和术中确诊为乳腺癌的14例患者中均有癌细胞腋窝淋巴结转移。免疫组化法测得乳腺癌癌组织、腋窝肿大淋巴结BCSCs相关因子CD44、Twist1和OCT4抗原阳性过表达,而CD24呈低表达;RT-PCR检测乳腺癌组织、腋窝淋巴结中BCSCs相关因子CD44、Twist1和OCT4的基因表达增强（P＜0.05）,CD24基因低表达（P＞0.05）。结论乳腺癌伴腋窝淋巴结肿大者BCSCs相关因子CD44、Twist1和OCT4的基因、抗原表达明显增高,可能表明BCSCs相关因子与乳腺癌细胞易早期转移、复发有关。