幽门螺杆菌lpp20基因的克隆与表达

目的克隆及表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)lpp20基因,为探索高效的防治幽门螺杆菌感染的疫苗抗原和诊断抗原奠定基础.方法用PCR方法从幽门螺杆菌的染色体DNA上扩增出lpp20基因片段,将目的基因插入的表达载体pMAL-C2X中,用重组质粒转化大肠杆菌(E.coli TB1),并在E.coli TB1中进行表达.用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析.结果用PCR方法扩增的lpp20基因长度约为540 bp;经酶切、PCR和测序分析,插入到载体的基因片段与文献报道的基因序列一致;SDS-PAGE的结果显示,目的基因表达产物的相对分子质量为18k1Da,融合蛋白的表达量占全菌总蛋白的34%.结论本研究中构建的pMAL-C2X与lpp20基因重组质粒在E coli TB1中能够高效表达目的基因.该重组子的构建为幽门螺杆菌lpp20基因的研究建立了重要的基础.     

华支睾吸虫病动物感染和实验治疗的研究进展

华支睾吸虫病(Clonorchiasis)是由华支睾吸虫(Clonorchis sinensis,C.sinensis)寄生在人或动物肝胆管内所引起的以肝胆病变为主的一种人兽共患寄生虫病,也称肝吸虫病。该病主要流行于东南亚的日本、朝鲜、菲律宾、越南、泰国、老挝、中国和我国台湾地区等,我国23个省、市、自治区都有本病存在。在国内华支睾吸虫病是重要的寄生虫病之一,1908年已有华支宰吸虫病的报道,但在此后很长一段时期内除有少量流行病学调查和临床资料外,并未进行深入研究。从1970年代后期以来,我国寄生虫学和寄生虫病工作者对华支睾吸虫病     

补虚祛瘀利湿法治疗糖尿病肾病疗效研究

目的观察补虚祛瘀利湿法治疗糖尿病肾病的临床疗效。方法将93例糖尿病肾病患者随机分成两组。治疗组54例采用补虚祛瘀利湿法辨证施药；对照组39例采用西医常规治疗。30天为1个疗程，两个疗程后观察两组患者的临床综合疗效、中医证候疗效、治疗前后肾功能和血清生化指标改善情况及不良反应。结果治疗组临床疗效明显优于对照组（P〈0．05）。结论补虚祛瘀利湿法治疗糖尿病肾病具有较好疗效。     

幽门螺杆菌1pp20基因在大肠杆菌TB1中诱导表达方法的研究

目的 :研究影响幽门螺杆菌lpp2 0基因在大肠杆菌TB1中表达的因素 ,探索高效表达的条件 ,为幽门螺杆菌疫苗抗原的纯化和生产奠定基础。方法 :用PCR方法从幽门螺杆菌的染色体DNA上扩增出lpp2 0基因片段 ,将目的基因插入的表达载体pMAL c2X中 ,用重组质粒转化大肠杆菌 (E .coliTB1)。采用不同的诱导时间、IPTG浓度和诱导温度进行诱导表达 ,应用SDS PAGE方法对表达产物进行分析。结果 :在诱导 1～ 4h之间 ,融合蛋白的表达量变化较为显著 ,而 4～ 8h之间则无显著变化 ;IPTG终浓度低于 0 .2mmol/L或高于3 .2mmol/L均能显著减少融合蛋白的表达量 (P <0 .0 5 ) ,而IPTG终浓度在 0 .4～ 2 .4mmol/L之间时 ,对融合蛋白的表达量并无显著影响 ;诱导温度在 3 0℃～ 40℃之间变化对融合蛋白的表达量无显著影响 ,超出此范围可使表达量显著减少 (P <0 .0 5 ) ;在优化诱导条件后 ,融合蛋白的表达量可达全菌总蛋白的 3 4%。结论 :通过调整诱导时间、IPTG浓度和诱导温度 ,lpp2 0基因与载体pMAL c2X的重组质粒在E .coliTB1中能够高效表达。     

利用生物信息学分析幽门螺杆菌Lpp20蛋的化学和免疫学分子特征

目的分析幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)郑州分离株MEL-HP27Lpp20蛋白的主要化学和免疫学分子特征,为Hp基因工程疫苗和诊断抗原的研究奠定基础。方法根据本研究室克隆的HpMEL-HP27lpp20基因的核苷酸序列推导出该基因表达产物(Lpp20)的氨基酸序列,应用生物信息学软件Omiga2.0、Anthepro4.5和GenBank数据库对Lpp20分子的主要化学特征和抗原活性进行分析。结果MEL-HP27Lpp20蛋白的氨基酸序列长度为175aa,Lpp20蛋白的分子量为19.122kDa,等电点为9.950,pH7.0时带电荷为9.035,280nm摩尔消光系数为12210,280nm吸光度为0.639,具有2个有抗原活性的结构域。结论MEL-HP27Lpp20蛋白分子具有典型抗原分子的结构特征,有希望成为新的Hp疫苗候选抗原。     

浅议中西医结合

中医中药是我国劳动人民几千年来同疾病作斗争的经验总结,具有奉富的基础理论和宝贵的治疗方法。我们西医学习中医的目的,就是把中医中药的知识同西医西药的知识结合起来,更好地为广大群众的健康服务。现就怎样进行中西医结合,提出一点浮浅的看法。 1 辨证与辨病相结合,按辨证全面分析以辨病 中压的“证”是根据中医理论得出来的,而西医的     

旋毛虫病的流行病学、临床学、血清学及分子生物学研究

旋毛虫病 (ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌｏｓｉｓ)是一种严重的人兽共患寄生虫病 ,因生食或半生食含有旋毛虫幼虫囊包的猪肉或其它动物肉类而感染 ,临床上主要表现为在急性期有发热、眼睑水肿、皮疹等过敏反应 ,继之出现肌肉剧烈疼痛等症状 ,若未及时治疗 ,病人死亡率可达 3 %～ 3 0 %。至 1999年底 ,已在我国 12个省市区发生了 5 48起本病暴发 ,发病 2 3 0 0 4例 ,死亡 2 3 6人 ,而 3 5 40例散发病人则见于全国 17个省市区 ;猪旋毛虫病则分布于我国 2 6个省市区[1,2 ] 。河南省自 80年代初发现人体旋毛虫病以来 ,已发生多起本病的散发和暴发流行 ,…     

桔梗-莪术药对对口服纳米粒细胞摄取的影响及体外抑制乳腺癌转移作用的研究

基于对肿瘤细胞及肿瘤微环境发挥联合作用抑制转移,该文将抑制肿瘤细胞增殖和转移的桔梗-莪术中药药对与调控肿瘤微环境的中药活性成分水飞蓟宾纳米粒联合,研究该药对对纳米粒细胞摄取的影响及体外抑制乳腺癌增殖迁移的作用,为促进纳米粒口服吸收及增强药效提供实验基础。采用纳米沉淀法制备载水飞蓟宾脂质聚合物纳米粒(NPs),透射电镜观测纳米粒形态。该纳米粒呈球形或类球形,具有壳核结构,其平均粒径为107.4 nm, Zeta电位为-27.53 mV。采用体外Caco-2/E12共培养细胞模型和激光共聚焦显微镜观察结果表明药对可增强对纳米粒的细胞摄取。利用激光共聚焦逐层扫描研究小鼠在体纳米粒肠细胞摄取,药对可增强肠绒毛细胞对纳米粒的摄取。分别利用小鼠乳腺癌4T1细胞以及共培养4T1/WML2细胞模型考察纳米粒对乳腺癌4T1细胞增殖和迁移的抑制作用。CCK8法测定细胞增殖实验研究结果表明含药对NPs可增强对4T1乳腺癌细胞增殖抑制作用。细胞划痕实验结果表明含药对NPs可增强对4T1乳腺癌细胞迁移抑制作用。该文丰富了中药纳米载体的口服吸收研究,也为更好地发挥中医药优势抑制乳腺癌转移提供了新思路。     

栀子茵陈汤治疗急性胆囊炎

急性胆囊炎是临床上常见病。其发病与胆囊管梗阻，胆囊局部缺血，胆汁淤积，细菌感染，代谢障碍，神经因素等有关。中医学认为与肝胆疏泄不畅，湿热蕴结有关。在此期如治疗不善则易转化成慢性。自1995年6月至2004年5月，笔者用自拟的栀子茵陈汤治疗急性胆囊炎38例，收到了满意的疗效，现报告如下。