靶向UCP-2基因siRNA慢病毒转染对胰腺腺泡细胞AR42J坏死、凋亡的影响及机制探讨

目的观察靶向解偶联蛋白2(UCP-2)基因小干扰RNA(siRNA)慢病毒转染对胰腺腺泡细胞AR42J坏死、凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法构建靶向UCP-2基因siRNA慢病毒载体,转染AR42J细胞(实验组),并设立阴性对照组及空白对照组。荧光显微镜镜检确定感染效率,实时定量PCR检测各组细胞的UCP-2 mRNA。以1×108mol/L的蛙皮素刺激AR42J细胞,采用Annexin V/PI双标流式细胞仪检测蛙皮素刺激后不同时间点AR42J细胞的坏死率和凋亡率,同时检测细胞内的ATP、活性氧簇(ROS)。结果成功构建了滴度为5×108TU/mL的UCP-2基因siRNA慢病毒载体;实验组细胞UCP-2 mRNA表达明显降低,各时间点AR42J细胞凋亡率及其ROS、ATP水平显著高于阴性对照组(P均<0.05),细胞坏死率则显著低于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向UCP-2基因siRNA慢病毒转染可抑制AR42J细胞的UCP-2基因表达,促进细胞凋亡,抑制细胞坏死,其作用机制与其增加AR42J细胞内ROS、ATP表达有关。     

HBsAg阳性原发性肝癌根治术后血清HBV DNA水平对肝癌复发的影响

目的 探讨HBsAg阳性原发性肝癌根治切除术后血清HBV DNA水平对肝癌复发的影响.方法 HBsAg阳性原发性肝癌72例行根治性切除并经病理证实,检测术后1,3,6月血清HBV DNA水平、肝功能、复发时间与临床病理资料,行并统计学分析.结果 术后不同时期血清HBV DNA水平变化差别无统计学意义(P>0.05);HBV DNA高水平、低水平、阴性组的术后2年复发率和中位复发时间分别为70%、45.57%、36.36%和14、34、41月,高水平与低水平、阴性组比较差别均有显著性统计学意义(P<0.01);多因素COX回归分析肝癌术后复发危险因素为门静脉分支癌栓、血清HBV DNA水平和肿瘤分化程度(P<0.05).结论 肝癌根治术后血清HBV DNA持续高水平是肝癌术后复发的危险因素.     

NOTCH4基因表达对肝细胞癌血管生成拟态形成的影响

目的研究NOTCH4基因表达对肝细胞癌血管生成拟态(VM)形成的影响。方法收集2010年-2014年间85例病理确诊为肝细胞癌的组织标本,免疫组织化学染色及PAS/CD31双染检测NOTCH4表达与VM的相关性;在体外三维细胞培养体系中靶向抑制肝癌细胞NOTCH4的表达,观察其对VM管状结构形成的影响。采用Mann-Whitney U秩和检验和单因素方差分析处理数据。结果 VM阳性的组织标本中NOTCH4高表达(P=0.019);siRNA组相对于阴性对照组及空白对照组,NOTCH4基因的mRNA表达(P值分别为0.007、0.003)及蛋白表达(P值均为0.000)均明显下调,差异具有统计学意义;靶向抑制NOTCH4的表达影响肝癌细胞在三维细胞培养体系中VM管状结构的形成。结论 NOTCH4基因表达影响肝细胞癌中VM的形成,可能成为肝细胞癌抗血管生成治疗的新靶点。     

HBV感染肝癌患者血清HBV DNA水平与手术近期疗效的关系

目的 探讨血清HBVDNA水平与HBV感染原发性肝癌手术治疗近期疗效的关系.方法 100例HBsAg 阳性手术切除的原发性肝癌病例,检测术前、术后1周血清HBVDNA,与各项临床指标,术后血ALT、TB峰值及肝功能恢复时间行统计学分析.结果 本组病例术前HBVDNA阳性率达79%,肝切除前后血清HBVDNA水平变化无显著性差异(配对t检验P=0.204);术前血清HBVDNA水平与肝癌切除后血清ALT峰值及肝功能恢复时间呈显著性正相关(P相似文献   

肝胆管结石合并肝胆管癌漏诊原因探讨

肝胆管结石合并肝胆管癌(hepatic cholangiocarcinoma associated with hepatolithiasis，HCCH)近年来有增多的趋势，确诊时多数已属晚期，总结其漏诊原因，对提高对该病认识及诊断具有一定的临床价值。     

原发性肝癌术后HBV活跃复制者拉米呋啶治疗对肿瘤复发的影响

目的 探讨肝癌根治术后HBVDNA活跃复制病人应用拉米呋啶治疗对肿瘤复发的影响.方法 将41例原发性肝癌根治性切除术后血清HBVDNA＞105 copies/ml病人随机分2组:治疗组21例(手术切除+拉米呋啶),对照组20例(单纯手术切除);同期22例肝癌根治术后HBVDNA ＜500 opies/ml病人作阴性组.观察各组术后血清HBVDNA、ALT水平、e抗原表达、复发时间作统计学分析.结果 治疗组和对照组术后1年HBVDNA清除率为76.2%和15%(P＜0.01),e抗原转阴率为45.5%和22.2%(P＞0.05);治疗组、对照组、阴性组术后1年肝癌复发率分别为28.98%、50%、22.73%,治疗组显著低于对照组(P=0.022),与阴性组无差异(P=0.508);治疗组与对照组术后中位复发时间分别为20个月和11个月(P=0.043).结论 肝癌根治术后HBV活跃复制者应用拉米呋啶治疗可提高HBVDNA清除率,有助于延长肿瘤复发时间.     

肝胆管结石胆肠吻合术后再手术原因浅析

目的探讨肝胆管结石胆肠吻合术后再手术的原因。方法对近13年来19例胆肠吻合术后再手术的肝胆管结石患者临床资料进行回顾性分析。结果再手术发现肝内胆管结石18例,胆肠吻合口狭窄5例、左肝管口狭窄11例、右肝管口狭窄6例、左肝外叶萎缩7例、右肝后叶萎缩2例。原肠肠吻合口呈T形5例、倒Y形2例。上行肠袢30、60cm各1例、居于结肠前位4例。合并胆管癌3例。结论严格掌握手术适应症,选择正确的术式,并注意提高手术操作技术是预防肝胆管结石胆肠吻合术后再手术的关键。     

肝胆管结石合并肝胆管癌的病理改变及Ki-67抗原的表达

近年来,随着肝胆管结石合并肝胆管癌病例的增多,两者在病因学上的关系日益受到重视。研究[13]表明,肝胆管结石与肝胆管癌之间有密切的内在联系。本组通过研究肝胆管结石合并肝胆管癌的病理形态学特点及细胞增殖动力学的改变(Ｋｉ67抗原表达),探讨肝胆管癌发生与肝胆管结石的关系。材料与方法1.材料:本组34例肝胆管结石并肝胆管癌,男女之比为1∶113,平均年龄50±8岁,平均患结石病史13±6年;其中23例有胆管手术史,32例有反复胆管感染病史,仅2例无明显临床表现。肿瘤部位:左肝24例,右肝6例,左右肝均累及4例;组织学类型:管状腺癌21例,乳头状腺癌…     

大鼠CCL19体外表达及趋化树突状细胞的功能研究

目的 构建大鼠趋化因子CCL19表达慢病毒,建立CCL19体外表达模型.方法 以CCL19亚克隆载体为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增和双酶切连接构建CCL19慢病毒包装载体,采用第3代慢病毒包装系统制备CCL19慢病毒颗粒,定量PCR方法检测病毒滴度,Western blot法检测CCL19在IEC6细胞中的表达.分离大鼠树突状细胞,并采用侵袭小室(Transwell)实验检测慢病毒感染的IEC6细胞对树突状细胞趋化功能的影响.结果 PCR和测序结果表明326 bp的CCL19基因表达序列连人慢病毒表达载体,质粒构建正确,定量PCR检测结果表明病毒包装滴度达到2×109 TU/ml.荧光显微镜观察表明慢病毒体外感染IEC6获得80％以上的阳性表达率.Western blot 检测验证了CCL19蛋白在表达慢病毒感染的IEC6细胞中高表达.Transwell检测表明过表达CCL19的IEC6细胞可以提高树突状细胞的净迁移率达4倍以上.结论 成功制备高滴度的CCL19表达慢病毒,并在IEC6细胞中检测到CCL19蛋白高表达,体外条件下CCL19的IEC6细胞可以提高树突状细胞趋化性.