不同频率脉冲电磁场诱导人骨髓间充质干细胞成骨分化的研究

目的探讨脉冲电磁场(PEMF)诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化的适合频率。方法选用场强1．1mT，频率分别为5，25，50，75，100和150Hz的PEMF作用于MSCs，每日30min，连续作用2ld，光镜下观察细胞形态变化，电镜下观察细胞超微结构，酶化学法和放免技术检测细胞的碱性磷酸酶(ALP)含量和骨钙素(OC)表达情况。结果不同频率PEMF作用组均能诱导MSCs向成骨细胞分化；从5～50Hz频段，PEMF的成骨诱导作用随着频率的增加而增强；从50～150Hz频段，PEMF的成骨诱导作用随着频率的增加而减弱。结论频率是PEMF诱导MSCs成骨分化的重要影响因素之一，50Hz可能为诱导MSCs体外成骨分化的适合频率。     

体外培养人骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的流体剪切应力参数

目的:流体剪切力是骨骼组织中骨骼细胞所感受到的主要应力刺激,可促进骨骼细胞的增殖、分化及保持细胞正常的生理功能。应用流体剪切力刺激体外培养的人骨髓间充质干细胞,观察其向成骨细胞分化的可行性。方法:实验于2004-04/12在第三军医大学西南医院完成,骨髓来源于正常志愿献髓者。进行人骨髓间充质干细胞的分离培养,实验组应用平行平板流动腔对自愿捐献的人骨髓间充质干细胞给予强度为0.3Pa的流体剪切力刺激30min,对照组不加此干预,两组物理环境相同。应用流式细胞仪检测细胞周期,应用透射电镜观察细胞超微结构,检测细胞内碱性磷酸酶含量。评估其向成骨细胞分化和具备功能的特征。放免法检测培养上清液骨钙素含量。评估其是否向成骨细胞成熟晚期分化。并与静态培养对照组作对比。结果:①实验组经流体剪切力作用后,细胞胞体变大,突起较多,多角形细胞较对照组增多;透射电镜观察可见细胞胞浆丰富、核浆比例小,有较多的内质网,高尔基体发达,核仁明显,呈成熟细胞表现。②实验组细胞S期(DNA合成期)比例较对照组明显增高[(13.53±1.47)%,(7.56±2.54)%,P<0.01]。③实验组细胞内碱性磷酸酶含量第9天开始增高,且随时间延长,增高速度加快。④第12天及第24天检测的上清液骨钙素含量两组无明显差别(t=0.263,-0.406,P>0.05)。结论:本实验发现强度为0.3Pa作用30min的流体剪切力可以使人骨髓间充质干细胞早期的细胞内碱性磷酸酶含量增高,细胞开始向成骨细胞分化,但未能促使晚期的骨钙素表达升高,说明此强度的流体剪切力不能成功促进人骨髓间充质干细胞最终实现向成骨方向分化。需要继续探索能够促进人骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的流体剪切力的更有效的参数。     

PBL教学法在解剖学课程中应用模式的探索和思考

正恩格斯说没有解剖学就没有医学,精辟地论述了解剖学在医学中的重要地位。可见,学好解剖学为后续医学课程的学习奠定必要的基础尤为重要,但是由于人体解剖学内容繁多纷杂,偏重记忆,学生听起来索然无味,记起来尤为困难,记忆效果差,导致一些学生学习劲头不足,甚至出现厌学现象,[1]因而成绩不佳,严重影响了教学质量。这种传统的以教师教授为主的教学方法,让处于被动地位的学生无法提高分析和解决问题的能力,已经无法满足     

创伤性脑损伤后核因子E2相关因子2在星形胶质细胞中的表达

目的:探讨创伤性脑损伤后核因子E2相关因子2(Nrf2)在星形胶质细胞中的表达变化。方法:雄性昆明小鼠随机分成假手术组、创伤性脑损伤后1、4、7d组。采用免疫印迹检测脑损伤后Nrf2的表达,免疫荧光染色法检测Nrf2在星形胶质细胞中的定位表达。结果:免疫印迹结果显示脑损伤后Nrf2在4d时表达最高;免疫荧光染色结果显示在假手术组中Nrf2在细胞质中有少量表达,损伤后1d组Nrf2在细胞质和细胞核均有表达,4d时表达显著增高。结论:损伤后Nrf2表达升高并入核可能与对星形胶质细胞的活化有关。     

钙与大豆异黄酮的联合作用对去卵巢大鼠骨生物力学特性的影响

目的 探讨钙和大豆异黄酮的联合作用对去卵巢大鼠骨生物力学特性的影响.方法 将160只12月龄SD清洁级雌性大鼠随机分为4组,分别为假手术对照(蒸馏水)组、骨质疏松模型(蒸馏水)组、大豆异黄酮(10 mg/ml,染毒容量为3 ml/kg)组、雌激素(0.1 mg/ml,染毒容量为0.1 ml/kg)组,每组再按照加钙(1...     

X线照射致胚胎大鼠皮质内结构异常

目的探讨胚胎期X线照射引起大鼠皮质内异常结构的形成机理。方法选取妊娠14日(E14)大鼠接受X线(剂量为1.0Gy)照射。采用HE染色、Fluoro Jade B染色及增殖细胞核抗原(PCNA)抗体免疫组化染色观察胚脑的皮质构筑。结果HE染色观察到E14大鼠接受X线照射后大量细胞脱落入侧脑室并在2日后完全清除,Fluoro Jade B染色显示此脱落细胞为阳性。E16及E18的皮质内出现玫瑰环样结构及脑室区的凹陷,且PCNA阳性细胞表达于玫瑰环样结构及脑室区凹陷的细胞株。结论E14大鼠受X线照射可引起广泛的大脑皮质细胞构筑异常和细胞增殖。     

骨组织中细胞外间隙液流对骨骼细胞的作用

骨骼的骨量和正常生理状态的维持有赖于对骨骼施加适当的应力刺激,这种机械应力(mechanical stress)与骨骼形成的关系最初由Wolff于1892年提出,并被命名为Wolff骨骼改适定律(Wolff's law of bone transformation)[1].在体内环境中,作用在骨骼上的应力可以有几种不同的形式,如压应力、拉应力、弯曲应力、扭转应力、及剪切应力等.通过骨骼细胞的力学信号转导功能,将这些物理信号加工整合,转化为相应的骨骼结构变化.许多研究发现,在作用于骨骼细胞上的各种机械应力中,骨骼基质形变引起的细胞外液体流动所形成的流体剪切应力是骨骼细胞能感受到的主要应力作用[2].     

降解纤维蛋白原可减少创伤性脑损伤后胶质瘢痕与纤维瘢痕的形成

目的 探讨通过降解纤维蛋白原减少创伤性脑损伤后胶质瘢痕与纤维瘢痕的形成的可能性。方法 选用8周龄昆明小鼠按照川野的方法制备小鼠黑质纹状体通路损伤模型。小鼠经腹腔注射麻醉后固定在脑立体定位仪上。在前囟点右后方1.5mm处用牙钻打开一长方形缺口,用自制宽度2.0mm的刀片从大脑表面垂直插入6.0mm。然后缓慢拔出刀片,止血缝合。24只昆明小鼠随机分成对照组与实验组。实验组于手术后1h立即注入巴曲酶注射液,连续3d。术后第4、7、14天取脑行水平位冠状浮游切片。应用胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)及GFAP抗体特异性识别损伤区域纤维瘢痕及星形胶质细胞的表达。应用双标免疫荧光法观察损伤部位的瘢痕组织形成。 结果 在伤后第4天,对照组的损伤部位出现ColⅣ 沉着,周边出现由反应性星形胶质细胞形成的境界膜,第7天后损伤中心形成纤维性瘢痕,第14天后瘢痕更明显,周边同样有星形胶质细胞包围;而实验组在第4天的损伤部位周边不易形成星形胶质细胞的境界膜,第7天及第14天纤维性瘢痕几乎不存在,但周边仍被星形胶质细胞所围绕。双重免疫荧光显示,对照组的损伤中心有纤维连接蛋白（FN）沉着,形成纤维性瘢痕;而实验组在损伤7d后FN沉着明显减少,14d后几乎消失;两组在损伤周边都有GFAP免疫阳性反应阳性细胞围绕。 结论 在脑损伤后,注入巴曲酶可通过降解纤维蛋白原减弱纤维性瘢痕及胶质瘢痕的形成。     

动力性三维培养大尺寸组织工程骨的方法学研究

目的:大段的骨缺损需要在体外构建大尺寸的组织工程骨,需要解决如何保证支架材料内部的种子细胞充分的物质交换及保持种子细胞正常生理功能等问题。对组织工程骨体外构建技术进行综述,寻求适合构建大尺寸组织工程骨的方法。资料来源:检索时间为1991-01/2004-09。检索词为组织工程、生物反应器、细胞培养、支架材料等。检索手段包括电子检索和手工检索等。检索范围:Medline、中国期刊网CNKI数字图书馆(中国期刊全文数据库)、中文期刊数据库(VIP)及sciencedirect数字图书馆中期刊35种。选择关于组织工程骨体外构建的120篇相关文献进行分析、总结。资料选择:对资料进行初审,选取包括组织工程骨的随机对照临床试验(RCT)研究相关文献,筛除明显不随机临床试验的研究文献。数据提炼:排除重复的同一研究和Meta分析研究,符合本研究标准21篇。资料综合:对各种组织工程骨的体外构建的技术方法进行比较分析,并了解其在实验及临床应用中的效果。现有的各种体外构建组织工程骨的方法中,动力性三维培养在提供有利于种子细胞生长的微环境,优化种子细胞在支架材料内部的分布等方面有较大的优势,但各种利用动力性三维培养的实验中,其构建的组织工程骨的尺寸都还比较小,无法满足临床大尺寸骨缺损修复对组织工程骨的要求。结     

切开复位内固定治疗成人陈旧性肱骨小头-滑车冠状面骨折

目的探讨切开复位内固定治疗成人陈旧性肱骨小头-滑车冠状面骨折的临床疗效。方法回顾分析自2011-02—2018-12采用切开复位内固定治疗的9例成人陈旧性肱骨小头-滑车冠状面骨折,观察骨折愈合时间、术后并发症情况以及末次随访时肘关节屈伸活动度。结果9例均顺利完成手术并获得随访,随访时间12~48个月,平均14.5个月。9例骨折均获得骨性愈合,骨折愈合时间8~12周,平均10周。术后1例DubberleyⅢA型骨折出现关节僵硬,1例ⅢB型骨折出现异位骨化,1例ⅢB型出现肱桡关节关节炎,未出现肘关节内外翻失稳、内固定松动或断裂、肱骨小头缺血性坏死等并发症。末次随访时肘关节活动度伸展0°~15°,平均8°;屈曲95°~125°,平均110°;按Mayo肘关节功能评分评价疗效:优5例,良3例,可1例。结论成人陈旧性肱骨小头-滑车冠状面骨折依据Dubberley分型选择手术入路和内固定方式,易于临床操作,通过积极的手术治疗和早期有效的功能锻炼能获得较好的肘关节功能。