彩色多普勒超声在高龄孕妇中对泌尿系统畸形胎儿的产前诊断价值分析

目的 分析不同类型泌尿系统畸形胎儿的彩色多普勒超声声像图的特征,评价彩色多普勒超声对高龄孕妇在产前诊断泌尿系统畸形胎儿的临床研究和诊断价值.方法 随机选择2014年3月至2016年2月本院接收的1 642例平均年龄为35.2岁且孕周为14~38周的孕妇,进行彩色多普勒常规检查,同时观测孕妇腹中胎儿的健康状况,收集对孕妇以及胎儿的临床资料和彩色多普勒超声声像特征并进行统计分析,并对怀疑为泌尿系统畸形的胎儿进行随访验证.对检测出泌尿系统畸形胎儿、疑似泌尿系统畸形胎儿和漏诊的病例,在分娩后进行彩色多普勒超声诊断和随访,将随访的结果与产前彩色多普勒超声检查的统计结果相对照.结果 通过彩色多普勒超声检测1 642例孕妇,对其超声声像特征的资料进行分析,根据超声声像图特征做出诊断.检测发现有42例泌尿系统畸形的胎儿,包含肾发育不良胎儿4例,占9.5%;多囊性发育不良8例,占19.04%;肾盂扩张15例,占35.7%;肾积水6例,占14.3%;肾缺如7例,占16.7%;巨膀胱1例,占2.4%;尿道下裂1例,占2.4%;进行产前彩色多普勒超声检测的诊断结果与分娩后检查和随访结果一致,其中一例被误诊,产妇分娩后病症消失.结论 产前对高龄孕妇进行彩色多普勒超声检查,诊断出泌尿系统畸形胎儿的准确率较高.利用彩色多普勒超声检测,使得泌尿系统畸形胎儿在产前即可作出诊断,为临床诊断、采取措施和预后评估提供了可靠且重要的依据.     

hMSC成骨分化相关lncRNA的筛选和初步鉴定

【目的】 筛选和初步鉴定人骨髓间充质干细胞(hMSC)成骨分化相关的长链非编码RNA (lncRNA)? 【方法】 利用Refseq, UCSC knowngenes, Ensembl ,H-invDB 7.0, RNAdb 2.0, NRED生物软件分析成骨基因相关的lncRNA,综合获得可能的成骨相关lncRNA;3例骨髓标本来源于行腰椎手术患者,密度梯度法分离扩增hMSC后,分成骨诱导组和对照组,地塞米松?维生素C?β-甘油磷酸钠诱导hMSC成骨分化,通过ALP测定及钙结节茜素红染色进行成骨诱导鉴定;qRT-PCR验证hMSC成骨分化前?后差异表达的lncRNA,以及成骨分化前?后差异表达的基因BMP1?MSX1?Runx2?Smurf-1?ALP?【结果】通过上述生物软件综合分析发现3个成骨基因MSX1?BMP1和Smurf1周围存在相关lncRNA?4个lncRNA (AK129811 ?AK024937 ?AK096529?uc003ups)与成骨基因Smurf-1相关;2个lncRNA(AF289591和uc003xbe)与成骨基因BMP1相关;1个lncRNA(AK056311)与成骨基因MSX1相关?ALP检测示:与对照组细胞相比,成骨诱导组细胞1周ALP值最高,达到(16.82 ± 1.64)nmol/min,随着诱导时间的延长,ALP值逐渐降低,3周降至(8.37 ± 1.01)nmol/min?钙结节染色显示hMSC成骨诱导分化2周后胞外开始出现少量钙结节,随着诱导时间延长钙结节数量逐渐增加,成骨诱导至第3周钙结节最多,定量测定钙质量浓度达(716 ± 49)mg/mL?RT-qPCR结果显示绝大部分lncRNA在hMSC成骨分化过程中表达均下调,其中2个与Smurf-1相关lncRNA (AK096529和uc003ups)与成骨诱导前相比,存在显著性下调?1个与MSX1相关的lncRNA(AK056311)与成骨诱导前相比,也存在显著性下调?同时,成骨分化基因Runx2?ALP表达显著性上调,MSX1?Smurf-1表达显著性下调?【结论】 结合既往研究结果分析:AK096529和uc003ups可能通过正向调控Smurf1,促使Smurf1下调,减少Runx2的降解,继而促进hMSC的成骨分化?     

人LMP-1基因腺病毒重组体的构建及其在骨肉瘤细胞U2OS中的表达

目的：构建表达人 LIM矿化蛋白-1（LIM mineralization protein-1,LMP-1）基因的腺病毒重组体,体外感染骨肉瘤（Osteosarcoma,OS）细胞系 U2OS,并鉴定LMP-1基因在U2OS中的表达。方法：以K562细胞的cDNA为文库,采用PCR方法对 LMP-1进行扩增,通过TA克隆与 pGEM-T载体连接并DNA测序。双酶切后并将目的基因插入至腺病毒穿梭质粒 pAdtrack-CMV,对腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV-LMP-1行双酶切和 DNA测序鉴定,并通过荧光显微镜、RT-qPCR和Western blot检测pAdtrack-CMV-LMP-1在HEK-293T细胞中的表达。线性化pAdtrack-CMV-LMP-1,在 BJ5183菌内完成与骨架质粒 pAdeasy-1的同源重组,构建重组腺病毒质粒 Ad-LMP-1。通过脂质体介导,在 HEK-293A细胞内包装出复制缺陷的重组腺病毒 Ad-LMP-1,大量扩增、纯化并测定滴度。用 Ad-LMP-1感染OS细胞系 U2OS,通过荧光显微镜、RT-qPCR和 Western blot检测 LMP-1在 U2OS 细胞中的表达。结果：双酶切和DNA测序鉴定穿梭质粒 pAdtrack-CMV-LMP-1构建成功,荧光显微镜证实转染了 pAdtrack-CMV-LMP-1质粒的 HEK-293T细胞内有绿色荧光蛋白表达,RT-qPCR 和 Western blot 验证了LMP-1基因的表达量明显高于对照组。通过扩增、纯化,Ad-LMP-1滴度达到1.5×109 pfu/ml。荧光显微镜下观察重组腺病毒感染的 U2OS内有绿色荧光蛋白表达,RT-qPCR和 Western blot 检测发现重组腺病毒感染U2OS后,LMP-1的 mRNA和蛋白表达量明显高于对照组。结论：成功构建了人 LMP-1基因腺病毒重组体,为进一步的实验研究奠定了基础。     

人胚胎视皮质发育的厚度测量分析

取１４例刮宫术、人工流产胎儿，胎龄１２～４０周，对其视皮质发育进行形态学观察及厚度测量。结果发现，胎儿视皮质在发育过程中总的厚度和各层厚度均逐渐增加。这表明在大脑皮质发育过程中新生物的产生与原有物质消除之间的平衡关系中以新生物的产生占优势。     

LIM矿化蛋白1促进成骨的研究现状

目的 LIM矿化蛋白1（LIM mineralization protein-1,LMP-1）是一种细胞内非分泌蛋白,通过调节BMPs信号通路而促进成骨分化。近年来,研究表明LMP-1作为成骨信号途径的上游信号分子级联放大下游成骨信号,增加成骨细胞对BMPs的敏感性,招募众多的成骨因子共同参与成骨,最终促进细胞成骨分化和诱导骨形成。本文就LMP-1的结构特点、诱导成骨机制、LMP-1用于基因治疗的种子细胞及载体的选择等研究现状作一综述。     

肌骨超声联合X线对老年膝骨关节炎的诊断分析

目的:分析肌骨超声(简称MUSU)+X线对老年膝骨关节炎(简称KOA)的诊断价值。方法:本研究主体为2017年5月-2019年5月间来院治疗的40例KOA患者。所有患者分为A组和B组,每组均20例,分别行MUSU+X线诊断与X线单纯诊断,对比两组诊断效果。结果:除关节腔面以下骨囊性变外,A组的各征象检出率均高于B组;以磁共振成像(简称MRI)诊断为金标准,A组的诊断敏感度为92.9%,特异度为83.3%,准确率为90.0%,B组敏感度、特异度和准确率分别为60.0%,20.0%和50.0%,A组准确率高于B组(P<0.05)。结论:为KOA患者行MUSU+X线的诊断准确率更高,可检出疾病征象,具有较高的推广价值。     

腰椎后路椎间自体骨移植Cage融合联合万向椎弓根螺钉内固定治疗腰椎峡部裂性滑脱

目的:观察腰椎后路椎间自体骨移植Cage融合联合万向椎弓根螺钉内固定治疗腰椎峡部裂性滑脱的临床疗效和安全性。方法:2015年10月至2017年9月,采用腰椎后路椎间自体骨移植Cage融合联合万向椎弓根螺钉内固定治疗腰椎峡部裂性滑脱患者21例。男8例,女13例。年龄24~69岁,中位数43岁。L4滑脱10例,L5滑脱11例。按照Meyerding腰椎滑脱分度标准,Ⅰ度8例、Ⅱ度13例。所有患者均有不同程度的腰痛、腰骶部坠胀及下肢疼痛,其中9例伴有间歇性跛行;均无大小便失禁。病程2~10年,中位数6年。术后随访观察滑脱椎体复位、椎间植骨愈合、椎间高度恢复、腰椎功能恢复及并发症发生情况。结果:所有患者均获随访,随访时间6~15个月,中位数11个月。腰椎滑脱均获得解剖复位或接近解剖复位。20例术后6个月椎间植骨融合,1例术后12个月椎间植骨融合。术前和术后1个月、6个月,21例患者Oswestry腰椎功能障碍指数分别为(57.6±10.4)%、(21.4±11.2)%、(20.1±11.4)%,椎间隙高度(腰椎侧位X线片上前、中、后椎间盘高度的平均值)分别为(6.5±1.0)mm、(12.3±1.2)mm、(11.5±2.0)mm,滑脱距离(腰椎侧位X线片上滑脱椎体后壁至下位椎体后壁的距离)分别为(15.0±2.1)mm、(1.5±1.0)mm、(1.2±0.5)mm。所有患者腰痛、腰骶部坠胀及下肢疼痛症状较术前均有所好转,间歇性跛行减轻,均恢复日常生活和工作。1例发生浅表感染,通过换药后感染得到控制;所有患者均未发生硬膜撕裂、神经根损伤、脑脊液漏、椎间隙感染、椎弓根螺钉松动、椎体再滑脱、假关节形成等并发症。结论:采用腰椎后路椎间自体骨移植Cage融合联合万向椎弓根螺钉内固定治疗腰椎峡部裂性滑脱,复位效果好,植骨融合率高,椎间高度和腰椎功能恢复好,并发症少,值得临床推广应用。     

唑来膦酸、伊班膦酸钠及阿伦膦酸钠防治绝经后骨质疏松症的疗效对比研究

目的对比研究唑来膦酸、伊班膦酸钠及阿伦膦酸钠对绝经后骨质疏松症的疗效。方法 180名绝经后妇女随机分为唑来膦酸治疗组(ZOL组)、伊班膦酸钠治疗组(IBA组)和阿伦膦酸钠治疗组(ALN组);ZOL组给予唑来膦酸治疗,IBA组给予伊班膦酸钠治疗,ALN组予以阿伦膦酸钠治疗。治疗前后分别检测3组受试者腰椎及髋部骨密度、血清骨代谢指标、视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)改变及研究期间药物不良反应和骨折发生率。结果药物治疗12个月后3组腰椎(L1~4)及左侧股骨颈骨密度明显增加,显著高于治疗前(P0.05),而3组间比较差异无统计学意义(P0.05),3组治疗有效率比较差异无统计学意义(P0.05)。药物治疗12个月后3组患者的VAS评分均显著降低,显著低于治疗前(P0.05),而3组间比较差异无统计学意义(P0.05)。干预12个月后两组血清I型胶原交联羧基末端肽和抗酒石酸酸性磷酸酶-5b水平均显著降低,显著低于治疗前(P0.05),而3组间比较差异无统计学意义(P0.05)。3组间药物不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论唑来膦酸、伊班膦酸钠及阿伦膦酸钠对绝经后骨质疏松症的治疗安全有效,可以显著改善骨密度及骨代谢异常。     

尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白B淋巴细胞表位的预测及鉴定

目的:预测及鉴定尤文肉瘤EWS-FLI1融合蛋白的B淋巴细胞表位。方法:采用综合法预测EWS-FLI1蛋白的二级结构及B淋巴细胞表位,运用标准Fmoc方案合成预测的表位肽,HPLC和MS进行表位肽的纯度分析及分子量鉴定,ELISA法检测表位肽的抗原性,并测定表位肽特异性免疫血清效价,Western blot鉴定免疫血清与EWS-FLI1蛋白亲合力。结果:通过综合法预测得到3个高分值的B淋巴细胞表位,HPLC分析合成的表位肽纯度>85%,MS鉴定表位肽的分子量无误,ELISA法检测证实3个B淋巴细胞表位肽均可获得强的抗原抗体反应,其中表位肽P2的抗原性最强,在1∶40时A450=2.46,达到最高,1∶10 240稀释后抗原抗体反应仍呈阳性;用这3个B淋巴细胞表位肽免疫新西兰兔也能获得理想的抗体效价,其中表位肽P2获得的抗体效价最高,1∶512 000稀释时A450=1.11;Western blot鉴定表位肽P1、P2免疫血清能够结合EWS-FLI1蛋白。结论:尤文肉瘤EWS-FLI1蛋白的B淋巴细胞表位肽P1、P2具有潜在的抗原性和免疫原性。