ROS影响有丝分裂时期细胞内线粒体的形态及分布

目的：利用稳定表达线粒体荧光信号的细胞系,检测活性氧（ reactive oxygen species,ROS）对有丝分裂时期细胞的线粒体形态及分布的影响。方法构建表达线粒体荧光信号的病毒表达载体,经测序鉴定和Western印迹检测正确后,通过病毒包装及感染的方法构建稳定表达线粒体荧光信号的HeLa s3细胞系HeLa s3-COX4tp-EGFP;进一步用免疫荧光法观察线粒体在ROS影响下形态及分布的变化。结果成功构建表达线粒体荧光信号的病毒表达载体及稳定细胞系,通过激光共聚焦显微镜观察,发现H2 O2处理能显著影响有丝分裂时期细胞线粒体的形态及分布。结论初步证明ROS可影响线粒体有丝分裂时期的形态及分布,为后续研究线粒体功能与细胞有丝分裂的调控奠定基础。     

直接数字X线摄影在尘肺病诊断中的应用价值

目的 探讨直接数字X线摄影(DR)在尘肺病诊断中的应用价值.方法 对随机抽取的298例接尘对象分批组织同期分别摄高仟伏和DR胸片,先由6名具有尘肺病诊断资质的医师随机均分甲、乙两组分别进行诊断,然后甲、乙两组合并阅片,使分组诊断不一致的结果得到统一.对DR和高仟伏两种胸片统一后诊断的胸片质量、小阴影的形态和大小、总体密集度、小阴影分布肺区数、尘肺分期等结果进行分析比较.结果 DR胸片质量等级集中在优片(97.99％),高仟伏胸片集中在良片(93.63％);DR胸片和高仟伏胸片小阴影的形态和大小、小阴影总体密集度、尘肺分期经一致性检验Kappa值分别为0.642、0.406、0.436,符合率分别为88.26％(263/298)、67.79％(202/298)、65.77％(196/298);小阴影分布肺区数在下肺区DR胸片明显多于高仟伏胸片.结论 DR胸片质量明显优于高仟伏胸片,可用于尘肺病的诊断.     

淋巴细胞抗原6E研究进展

淋巴细胞抗原6E(LY6E)是LY6/uPAR超家族成员之一,通过其C端的糖基磷脂酰肌醇锚定在细胞膜表面.LY6E在T细胞发育和活化、肿瘤细胞生长和迁移以及病毒感染中发挥着重要作用.LY6E广泛表达于人的多种组织器官中,但与正常细胞相比,其在多种癌细胞中的表达量均明显升高.因此,LY6E被视为治疗恶性肿瘤的潜在靶点,目前靶向LY6E的抗体药物偶联物DLYE5953A已完成临床I期试验.此外,LY6E能影响冠状病毒、人类免疫缺陷病毒、甲型流感病毒和登革热病毒等多种病毒感染,其第36位的亮氨酸在病毒感染过程中发挥着重要作用.对LY6E的深入研究,可为人类应对恶性肿瘤和病毒感染治疗提供新的策略.该文将对LY6E的生物学功能进行综述.     

铜陵有色金属（集团）公司尘肺发病规律及直接死因调查

铜陵有色金属（集团）公司是以矿山为基础的大型铜的采选、冶炼和加工联合企业，是我国有色金属工业八大重点基地之一。１９９６年在职职工２．８万人。主要产品有粗铜、电解铜、铜材、硫酸等。粉尘是其覆盖面最广、危害性最大的职业危害因素，４０．７４％的职工是接触粉...     

新型人源化抗CD20单克隆抗体的表达和活性检测

目的：制备新型人源化抗CD20单克隆抗体并检测其与CD20抗原的亲和力和抗肿瘤活性。方法通过计算机模建技术,在蛋白质结构数据库中找到与利妥昔单抗（ rituximab）空间结构最相近的人IgG1为骨架,将利妥昔单抗的互补决定区（ complementarity determining region ,CDR）进行移植和改造,通过重叠PCR方法,扩增出目的基因片段。分别将轻链（L）、重链（H）基因片段克隆到载体pcDNA3．3、pOptiVEC质粒上。瞬时转染至293F细胞,收取细胞上清,用rProteinA亲和层析法纯化目的抗体,并用十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）检验抗体的纯度和表达量,采用Fortebio技术检测抗体与抗原的结合能力,最后通过裸鼠移植瘤生长抑制实验检测抗体的抗肿瘤活性。结果构建了3种抗CD20人源化抗体。抗体在还原SDS-PAGE中表现为两条相对分子质量约为25×103和55×103的条带,与预计条带大小相符;Fortebio实验结果表明,3组抗体与抗原具有良好的亲和活性：利妥昔单抗、L4H7抗体、L5H5抗体和L5H7抗体的Kd值分别为6．48×10－9、1．91×10－9、7．35×10－10和1．91×10－9 mol／L。裸鼠移植瘤生长抑制实验表明,L5H7抗体的抗肿瘤活性优于利妥昔单抗。结论成功构建并表达了3种抗CD20人源化抗体,其中L5H7抗体具有良好的抗原结合能力和抗肿瘤活性。     

以抗原半乳糖苷酶融合蛋白为酶结合物检测丙型肝炎抗体

目的　为了降低检测丙型肝炎（ 丙肝） 病毒（ＨＣＶ） 抗体的假阳性,建立基于双抗原夹心法的酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ） 系统。方法　利用基因工程手段,在大肠杆菌中表达ＨＣＶ 嵌合抗原（ 含核心、Ｃ３３ｃ ,ＮＳ４ 及ＮＳ５ 抗原） 与大肠杆菌β半乳糖苷酶的融合蛋白,以该融合蛋白为酶结合物进行ＥＬＴＳＡ。结果　构建了重组质粒,并在大肠杆菌中表达了融合蛋白,融合蛋白具有ＨＣＶ 抗原的抗原性,并且保持了的酶活性。以重组融合蛋白为酶结合物,用于检测抗ＨＣＶ 抗体时,阳性检出率和阴性特异性均接近使用辣根过氧化物酶系统的水平。灵敏度接近以辣根过氧化物酶为标记酶的ＥＬＩＳＡ 系统。结论　重组ＨＣＶ 抗原β半乳糖苷酶融合蛋白可以用作酶结合物,应用于ＨＣＶ 感染的诊断。     

严重急性呼吸综合征患者恢复期血清的中和反应及抗体滴度变化

2002年11月以来，严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome，SARS)，首先在广东省佛山市出现，迅速在全球30多个国家和地区传播，给人民的身体健康造成严重危害，在发病早期，大部分病例表现为家庭聚集性和医院聚集性。为进一步了解SARS家庭聚集病例的流行病学特点和探讨其恢复期血清的中和反应及抗体滴度变化，对14例SARS家庭聚集性患者进行连续8个月的追踪观察。     

外伤性膝关节脱位2例报告

例1 男,39岁,煤矿工人,因塌方砸伤右膝部两小时就诊.查体见右膝关节肿胀,胫骨上端前移,呈30°位屈曲畸形,小腿外旋,膝关节活动度完全丧失,足背动脉博动良好,足背感觉正常.X线报告为右膝关节前脱位.急诊腰麻下稍加牵引复位成功.手术前查前后抽屉试验均强阳性,诊断前后交叉韧带断裂,采用膝内侧“S”切口探查膝关节,术中发现前后交叉韧带均断于股骨踝止点处,后关节囊破裂,半月板,内外侧副韧带均无损伤.在踝间窝交叉韧带的止点分别向内外髁用粗克氏针穿两孔备用,在前后交叉韧带的断端用10号丝线缝合分别自内外髁骨孔引出,膝关屈曲30°位,收紧结扎.术后长腿石膏托固定膝关节30°位四周.伤口一期愈合,术后3年膝关节活动度屈伸为100°～20°,无痛,无不稳定症状,前后抽屉试验均阴性.