彭江云辨治强直性脊柱炎经验总结

目的总结彭江云教授辨治强直性脊柱炎的经验及诊疗心得。方法通过对彭江云教授临床诊治强直性脊柱炎病案的总结,来分析其在强直性脊柱炎疾病治疗上遣方用药特点及常用中医证型。结果彭江云教授论治强直性脊柱炎疾病以辨证论治为基本原则。彭江云教授诊疗强直性脊柱炎主要有以下几个证型:肾阳虚衰证、肝肾亏虚证、湿热蕴结证。在治疗时尤善用附子、细辛等辛温类药物。认为先天禀赋不足、后天失养、劳逸过度、病后失养等导致肝肾亏虚,督脉失养为发病的内在因素,风、寒、湿、热等邪气为发病的外在因素,内外之邪乘虚侵督脉而发病。早期诊断、早期治疗、积极锻炼,扶正祛邪是治疗疾病的基本原则。结论彭江云教授在风湿类疾病诊疗上具有较高的学术水平和丰富的临床经验。对强直性脊柱炎的治疗,临床效果甚佳,值得研究及临床学习。     

液态芯片技术检测抗人类白细胞抗原抗体抗主要组织相容性Ⅰ类相关链A位点抗体在移植肾围手术期急性抗体介导性排斥反应中的应用

目的探讨液态芯片技术(Luminex)检测移植肾受者围手术期发生急性抗体介导性排斥反应者抗人类白细胞抗原(HLA)抗体、抗主要组织相容性Ⅰ类相关链A位点(MICA)抗体水平与影响。方法选取我院器官移植研究所2008年1月至2013年6月肾移植术后围手术期患者106例为研究对象,采用Luminex技术检测接受同种异体肾移植手术并明确病理诊断肾围手术期急性抗体介导性排斥反应患者血清中抗HLA抗体、抗MICA抗体,并同步检测血肌酐、尿量及移植肾超声等临床指标。结果参照Banff 2007标准组织病理学诊断移植肾超急性排斥反应2例,急性抗体介导性排斥反应15例,同时应用Luminex方法检测抗HLA抗体、抗MICA抗体水平,HLA抗体检测结果15例阳性,阳性率为88%(15/17),检出PRAⅠ类和Ⅱ类阳性率分别为47%(7/15)和53%(8/15);MICA抗体2例阳性,阳性率为12%(2/17),其余89例其他病理类型检测未见抗HLA抗体、MICA抗体阳性,移植肾穿刺病理结果显示HLA抗体、抗MICA抗体阳性患者C4d沉积均为阳性。结论抗HLA抗体、抗MICA抗体可预测围手术期急性抗体介导性排斥反应发生及治疗效果,对于及时诊断及治疗排斥反应提供了一个重要指标,可影响移植肾的长期存活。     

HLA-G与肾移植术后急性排斥反应和巨细胞病毒活动性感染的相关性研究

目的 探讨HLA-G的表达水平与肾移植术后急性排斥反应(AR)和巨细胞病毒(CMV)活动性感染的相关性.方法 根据术后是否发生AR或CMV活动性感染,将132例初次肾移植受者分为肾功能稳定组、AR组和CMV组.另选择41例健康供者作为对照组.采用流式细胞术、酶联免疫吸附试验、蛋白质印迹法以及实时定量聚合酶链法检测各组HLA-G及其mRNA的表达,并采用免疫组织化学法观察移植肾组织中HLA-G的表达.结果 肾移植前后各组膜结合型HLA-G1 (mHLA-G1)的表达均处于较低水平,仅术后CMV组mHLA-G1+的中性粒细胞出现显著升高(P＜0.05).术前可溶性HLA-G5(sHLA-G5)的表达水平肾功能稳定组显著高于对照组(P＜0.05);术后sHLA-G5的表达水平CMV组显著高于肾功能稳定组(P＜0.05),而肾功能稳定组均高于对照组和AR组(P＜0.05),AR组与对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).术后CMV组sHLA-G5 mRNA的表达水平最高(P＜0.05),肾功能稳定组次之,对照组和AR组均较低.21例AR组移植肾组织活检样本中,17例HLA-G表达呈阴性,3例呈阳性,1例呈弱阳性;9例CMV组移植肾组织活检样本的HLA-G表达均为阳性.132例受者中,28例CMV感染者的AR发生率为7.1％(2/28),104例非CMV感染者的AR发生率为25.0％(26/104),二者间AR发生率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论 sHLA-G5可作为预测AR和CMV感染的生物标志分子;CMV感染和AR与受者体内的免疫平衡状况相关.     

肾移植排斥反应中细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的作用

背景：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4是新近发现的共刺激分子,在肿瘤及自身免疫性疾病中研究较多,在肾移植领域缺少研究。 目的：探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植排斥反应中的作用。方法：纳入肾移植患者50例,根据移植后肾功能分为2组,急性排斥组20例,移植肾功能稳定组30例。同时选择30例健康查体者作为健康对照组。分别抽取外周静脉血,采用ELISA法及流式细胞术检测观察对象血清及外周血淋巴细胞中的细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4水平。 结果与结论：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植后急性排斥组、肾功能稳定组及健康对照组血清中的表达水平差异有显著性意义（F=70.0081,P=0.0000）。肾功能稳定组显著低于健康对照组（P=0.0000）,急性排斥组显著低于健康对照组（P=0.0000）,急性排斥组显著低于肾功能稳定组（P=0.0000）。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植后急性排斥组、肾功能稳定组及健康对照组淋巴细胞中的表达水平差异无显著性意义（F=1.8656,P=0.1617）。提示细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4在肾移植患者发生排斥反应时血清中表达减低,具有一定的相关性,可能参与了排斥反应的发生。     

慢性移植物肾病患者外周血淋巴细胞细胞因子表达的研究

目的探讨慢性移植物肾病（chronic allograft nephropathy,CAN）患者外周的血淋巴细胞细胞因子的表达情况。方法选取2004年7月至2005年8月在中国人民解放军第309医院器官移植研究所就诊的15例CAN和22例移植’肾功能正常的肾移植受者,分别列为CAN组和非CAN组。所有患者均签署知情同意书,符合医学伦理学规定。两组患者分别抽取空腹外周血4ml,分离外周血淋巴细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应比较两组患者外周血淋巴细胞细胞因子白介素（IL）-2、IL-10、干扰素（IFN）-1及转化生长因子（TGF）-β1的信使核糖核酸（messengerRNA,mRNA）表达的差异。结果与非CAN组比较,CAN组的IL-2和IL-10mRNA表达差异无统计学意义（均为P〉0．05）,IFN-γ、TGF-β1mRNA表达明显较高,差异有统计学意义（分别为P〈0．05、P〈0．01）。结论IFN-γ、TGF—β1mRNA的高表达可能与CAN的发生、进展有关。     

器官移植受者术后巨细胞病毒感染的监测

目的:评价外周血巨细胞病毒pp65抗原检测在器官移植受者移植术后巨细胞病毒感染监测中的价值,并与巨细胞病毒抗体检测进行对比.方法:选择2005-05/2006-08解放军总医院第二附属医院器官移植中心器官移植受者43例,于移植术后两三个月取外周血检测巨细胞病毒抗原和抗体.①巨细胞病毒早期抗原pp65检测:取5～7 mL外周血加入EDTA抗凝,采用间接免疫荧光方法进行,以每2×105个白细胞中发现1个或以上阳性细胞定为阳性.②巨细胞病毒特异性IgG,IgM抗体检测:取3 mL外周血,不抗凝,以间接ELISA法检测.结果:43例受试者均进入结果分析,无脱落.①43例中术后外周血巨细胞病毒早期抗原pp65阳性9例,均在检测同时或2～10d后出现明显的巨细胞病毒感染症状.②巨细胞病毒抗体IgG均为阳性,仅能说明受试者有过巨细胞病毒感染史.③巨细胞病毒抗体IgM阳性2例,检出率低于pp65抗原阳性者.结论:应用间接免疫荧光方法检测巨细胞病毒pp65抗原具有快速、特异、更易于接受的优点,适用于器官移植术后巨细胞病毒感染的监测,而巨细胞病毒抗体的检测仅能作为辅助参考.     

更昔洛韦对原位肝移植术后巨细胞病毒感染的预防和治疗:19例临床资料回顾

目的:巨细胞病毒感染是器官移植后的一个严重并发症,回顾性分析肝移植术后患者巨细胞病毒感染的诊断和防治方法.方法:①回顾分析2005-05/2006-08解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心收治的19例肝移植受者的临床资料,供者均为健康献肝者.供者、受者对治疗方案均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.②术后1个月检测1次巨细胞病毒血清抗体,预防和治疗巨细胞病毒感染均采用静脉注射更昔洛韦.术后采用三联免疫抑制疗法,根据术后血药浓度及肝功能改变调整免疫抑制药物用量.③采用酶联免疫吸附法检测患者血中巨细胞病毒抗体巨细胞病毒IgG、巨细胞病毒IgM.结果:19例受者中6例发生巨细胞病毒感染,均无临床症状,并全部治愈.结论:更昔洛韦能够有效治疗肝移植术后巨细胞病毒感染.积极预防、早期治疗肝移植术后患者巨细胞病毒感染是治疗成功的关键.     

调节性树突细胞对皮肤移植小鼠IL-10+调节性B细胞的影响

目的 探讨吞噬了供者凋亡淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)对皮肤移植受体小鼠外周血IL-10+CD19+调节性B细胞(Breg)比例及移植物存活时间的影响.方法 以C57BL/6小鼠作为受者,BALB/c小鼠为供者,建立小鼠皮肤移植模型.分离C57BL/6小鼠骨髓细胞,经小鼠重组白细胞介素4(IL-4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)共同诱导,制备并培养imDC.分离BALB/c小鼠脾淋巴细胞(SP),经光化学照射方法(PUVA)处理,得到供者小鼠脾淋巴细胞(PUVA-SP).在体外将PUVA-SP与C57BL/6小鼠骨髓来源的imDC共同培养,得到PUVA-SP DCs.根据受体小鼠术前接受的静脉输注成分将其随机分为4组(n=14):PUVA-SP DC组、imDC组、成熟树突细胞(maDC)组和PBS对照组.于手术前7d分别从尾静脉注入1×106个(0.2ml)PUVA-SP DC、imDC、maDC或0.2ml PBS.于移植术后观察受体小鼠的移植物存活时间、外周血IL-10+CD19+ Breg比例及IL-10的表达情况.结果 移植术后,受体小鼠外周血IL-10+CD 19+Breg细胞占CD19+B细胞的比例在PUVA-SP DC组为7.48％,明显高于imDC组(4.12％)、maDC组(3.01％)和PBS对照组(2.37％).PUVA-SP DC组小鼠血清中IL-10表达水平为58.2±0.9ng/ml,与maDC组(20.1±1.6ng/ml)、imDC组(26.2±1.3ng/ml)及PBS对照组(19.0±0.6ng/ml)比较显著升高(P＜0.01).PUVA-SP DC组移植物存活时间为62.3±2.6d,显著长于maDC组(20.7±1.9d)、imDC组(12.1±1.0d)和PBS对照组(11.0±1.3d,P＜0.01).结论 移植术前输注PUVA-SP DCs可显著延长移植物存活时间,增加受者体内IL-10的表达水平,诱导产生较多分泌IL-10的调节性B细胞.     

浆细胞聚集性浸润在移植肾丢失中的作用：40例切除移植肾标本中CD138的表达*★

目的：CD138是浆细胞表面特有的细胞标记，移植肾中浸润的浆细胞群是否分泌抗体参与体液排斥反应导致移植肾预后效果不佳？检测切除移植肾组织中CD138的表达，分析浆细胞在移植肾组织中聚集性浸润与移植肾存活时间的关系。 方法：选择1989-06/2006-12解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心收治的因难治性排斥致移植肾切除患者40例作为移植肾切除组，移植术后因移植肾功能异常行常规穿刺活检患者20例为对照组，所有患者对治疗及实验方案均知情同意，且得到医院伦理道德委员会批准。应用CD138多克隆抗体对肾组织标本石蜡切片行免疫组织化学染色，检测CD138在两组中的表达情况；同时记录移植肾切除组患者移植肾的存活时间，分析CD138的表达与移植肾存活时间的关系。 结果：①移植肾切除组的移植肾组织中CD138阳性23例，占57.5%；对照组穿刺移植肾标本中CD138阳性3例，占15.0%，两组CD138阳性率差异存在显著性意义（P= 0.004 3）。②移植肾切除组中CD138阳性患者的移植肾存活时间低于CD138阴性患者（P= 0.033 8）。 结论：浆细胞在移植肾组织中聚集性浸润是影响移植物长期存活的危险因素。     

HLA-G5在健康人和肝肾移植受者体内的表达分析

目的了解国内健康人和器官移植受者体内人类白细胞抗原-G5(HLA-G5)的表达情况,并探索其表达的时间规律。方法分别采集30例健康人(健康查体正常)、50例肝移植受者(肝移植术后3个月且肝功能稳定)、50例肾移植受者(肾移植术后3个月且肾功能稳定)的外周血各3ml,并采集33例肝肾移植受者术前及术后1周、4周、12周、1年的外周血各3ml。提取血清,采用酶联免疫法(ELISA)检测HLA-G5水平。结果30例健康人中,28例HLA-G5的A值低于0.5,根据标准曲线含量为0.0ng/ml,2例分别为8、9ng/ml。50例肝移植受者HLA-G5表达阳性者16例,阳性率为32%,其中4例含量高于30ng/ml。50例肾移植受者HLA-G5表达阳性者10例,阳性率为20%,有1例含量为25ng/ml。健康人、肝移植、肾移植3组血清中HLA-G5平均含量分别为0.56±0.20、8.34±1.50和3.26±0.25ng/ml。对33例肝肾移植受者进行动态检测显示,有1例患者术前和术后1周HLA-G5呈阳性,4例术后4周阳性,12例术后12周阳性,追踪至术后1年有11例阳性。结论HLA-G5在健康人体内低表达,与器官移植免疫耐受有一定相关性。在移植后移植物接受良好的情况下,HLA-G5有不同水平的表达,肝移植受者的HLA-G5表达量高于肾移植受者。33例肝肾移植受者的动态结果证实了HLA-G5的表达从mRNA转录到蛋白表达的时间为15~60d的观点,HLA-G5的表达在第60天到达高峰,并具有稳定性。