抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究

目的 体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位,探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值.方法 扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,克隆至PET32a/SIEA26～28kDa-scFv质粒,构建PET32a/EGFP-scFv质粒.转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,并诱导表达单链抗体融合蛋白,分析单链抗体融合蛋白与SIEA26～28kDa的结合特异性.单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育,荧光显微镜下观测GFP信号,确定特异性单链抗体的靶向性.结果 重组质粒PET32a/EGFP-scFv构建成功,Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达,与SIEA26～28kDa特异性结合.GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚,雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织.结论 SIEA26～28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性,具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用,为SIEA26～28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础.     

抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的研究

抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的研究是血吸虫疫苗研究的重要策略之一。本研究探讨了未成熟卵等不同抗原免疫诱导宿主生产抗日本血吸虫生殖及卵胚发育免疫的效果。研究证明ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖和卵胚发育成熟的免疫力。与对照组比较，ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ抗原免疫鼠减虫虽不明显，但肝组织内每雌产卵数、成熟卵数和粪卵数（ＥＰＧ）分别减少４８．１％、８３．６％、８７．３％，死亡卵数     

抗日本血吸虫未成熟虫卵部分纯化抗原免疫血清的制备及定位观察

抗日本血吸虫未成熟虫卵部分纯化抗原免疫血清的制备及定位观察汪世平周汨波曾庆仁赵慰先日本血吸虫卵不同发育时期抗原性存在明显差异。来源于不同发育阶段的虫卵可溶性抗原所诱导的宿主免疫应答明显不同。因此，制备针对未成熟虫卵可溶性抗原（ＳＩＥＡ）的免疫血清，对...     

日本血吸虫DNA疫苗pcDNA3/SjSDISP的安全性评价

目的评价日本血吸虫DNA疫苗pcDNA3/SjSDISP的安全性。方法同体左右侧自身对比法对3只家兔进行局部肌肉刺激实验,22只豚鼠随机分为4组:A组为无菌生理盐水阴性对照组,B组为牛血清白蛋白阳性对照组,C组为pcDNA3/SjSDISP低剂量组,D组为pcDNA3/SjSDISP高剂量组,进行全身过敏实验。结果日本血吸虫DNA疫苗pcDNA3/SjSDISP对家兔局部肌肉刺激反应轻微,对豚鼠无全身过敏反应。结论日本血吸虫DNA疫苗pcDNA3/SjSDISP在该实验条件下安全。     

反向疫苗技术在感染性疾病疫苗研发中的应用

反向疫苗技术是指利用基因组序列信息和生物信息学技术,快速识别和鉴定疫苗候选分子的一种新型疫苗研制技术.该技术已被成功用于筛选B型脑膜炎双球菌疫苗候选抗原,且在其他重要的人体病原体疫苗候选分子的筛选中也得到了成功的应用,提示反向疫苗技术在新型疫苗研发中具有广阔的应用前景.     

血吸虫病的诊断检测技术及研究进展

血吸虫病的诊断检测技术在血吸虫病的防治中具有极其重要的作用。近年来除了病原学诊断技术的改进,免疫学诊断技术也因为其良好的敏感性、特异性和实用性,成为当前血吸虫病的常用诊断手段,而且随着分子生物学、免疫化学、免疫传感器等新技术的渗入．极大地促进了血吸虫病诊断方法和检测技术的改进和发展。     

人体血吸虫病免疫调节与感染度的关系 Ⅱ.自然杀伤细胞活性和体外淋巴细胞的增殖

作者观察了41例感染曼氏血吸虫和埃及血吸虫儿童的自然杀伤(NK)细胞抗K-562靶细胞的活性,以及淋巴细胞对刀豆球蛋白A(Con A)、白细胞间介素Ⅱ(IL_2)、Con A+IL_2的增殖反应。     

日本血吸虫未成熟虫卵26／28kDa抗原诱导抗雌虫生…

目的：探讨日本血吸虫未成熟虫的２６／２８ｋＤａ抗原（ＳＩＥＡ２６－２８ｋＤａ）诱导小鼠产生抗雌虫生殖免疫的效果。方法：采用纯化的ＳＩＥＡ２６／２８ｋＤａ抗原以及ＳＩＥＡ－Ｉ抗原，分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，于攻击感染后４６ｄ进行粪卵，组织内虫卵定量。结果：证明ＳＩＥＡ２６／２８ｋＤａ抗原能诱导小鼠产生抑制雌虫生殖的免疫力。与对照组比较，ＳＩＥ２６／２８ｋＤａ抗原免疫鼠减虫虽不明显，但肝组织内总卵数、     

日本血吸虫SIEA26-28kDa的抗雌虫生殖免疫作用--HGPRT是否是主要的靶抗原

目的观察日本血吸虫SIEA26—28kDa抗原的抗雌虫生殖作用。方法用AcA柱层析纯化日本血吸虫早期胚卵中的SIEA和SIEA26—28kDa成分。并以此纯化产物免疫BALB／c小鼠。将小鼠分为三组，分别用SIEA、SIEA26—28kDa和免疫佐剂免疫动物，然后进行尾蚴攻击感染。46天后剖杀动物，冲虫，然后作虫荷测定及虫卵分类计数。结果SIEA26—28kDa免疫组雌虫子宫内减卵率为54．8％。与对照组比较有极显著性差异；该实验组动物肝脏和小肠组织内的虫卵数比对照组分别降低了48.07％和77.41％，且以成熟虫卵数的下降较为显著，分别降低了83．6％和93．3％；粪卵数的下降幅度最为显著，达87．26％。结论SIEA26—28kDa可作为一种抗卵胚发育及抗雌虫生殖的候选抗原分子。     

日本血吸虫SjCa8基因的原核表达及其免疫学特征分析

目的表达和纯化日本血吸虫钙结合蛋白(SjCa8),研究其免疫学特征。方法重组质粒pET32a ( )-SjCa8经诱导表达后,获取纯化蛋白SjCa8,利用ELISA、Western-blot和动物保护性实验检测SjCa8的免疫学特征。结果成功获取了纯化蛋白SjCa8,该蛋白能免疫识别血吸虫感染小鼠血清和血吸虫病患者血清。SjCa8免疫Balb/c小鼠可获得较高滴度的特异性抗体,诱导宿主产生35．31%的减虫率和35．68%的减卵率。结论纯化蛋白SjCa8具有良好的免疫原性和免疫反应性,具有作为血吸虫病免疫诊断和疫苗候选分子的研究价值。