| 抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究 |
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| 引用本文： | 何卓,汪世平,周帅锋,秦永华,高冬梅,汪希雅,李林,余路新,徐绍锐.抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26-28kDa单链抗体与EGFP的融合表达及靶向性研究[J].中国人兽共患病杂志,2008,24(8). |
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| 作者姓名： | 何卓 汪世平 周帅锋 秦永华 高冬梅 汪希雅 李林 余路新 徐绍锐 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医学院,长沙410078 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划)，湖南省十一·五重大专项基金，湖南省十一·五重点学科建设专项基金 |
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| 摘 要： | 目的 体外观察抗日本血吸虫生殖功能分子SIEA26～28kDa单链抗体与日本血吸虫各阶段的靶向部位,探讨单链抗体在抗血吸虫病疫苗研究中的应用价值.方法 扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,克隆至PET32a/SIEA26～28kDa-scFv质粒,构建PET32a/EGFP-scFv质粒.转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,并诱导表达单链抗体融合蛋白,分析单链抗体融合蛋白与SIEA26～28kDa的结合特异性.单链抗体融合蛋白与日本血吸虫成虫、虫卵切片孵育,荧光显微镜下观测GFP信号,确定特异性单链抗体的靶向性.结果 重组质粒PET32a/EGFP-scFv构建成功,Trx-EGFP-scFv融合蛋白高效表达,与SIEA26～28kDa特异性结合.GFP信号主要集中在未成熟卵卵胚,雌虫卵巢、卵黄腺及与生殖系统邻近的肠腔组织.结论 SIEA26～28kDa单链抗体与血吸虫未成熟卵胚胎及雌虫生殖系统具有较强的靶向性,具有潜在抗卵胚发育、抗雌虫生殖作用,为SIEA26～28kDa单链抗体在抗日本血吸虫病疫苗免疫靶向方面的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 日本血吸虫 未成熟卵可溶性抗原(SIEA) 单链抗体(scFv) 增强型绿色荧光蛋白(EGFP) 靶向性 |
Fusion expression and targeting ability of the single-chain Fv antibody against the anti-fecundity immunity molecule, soluble immature egg antigen SIEA26-28kDa from Schistosoma japonica |
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| HE Zhuo,WANG Shi-ping,ZHOU Shuai-feng,QIN Yong-hua,GAO Dong-mei,WANG Xi-ya,LI Lin,YU Lu-xin,XU Shao-rui.Fusion expression and targeting ability of the single-chain Fv antibody against the anti-fecundity immunity molecule, soluble immature egg antigen SIEA26-28kDa from Schistosoma japonica[J].Chinese Journal of Zoonoses,2008,24(8). |
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| Authors: | HE Zhuo WANG Shi-ping ZHOU Shuai-feng QIN Yong-hua GAO Dong-mei WANG Xi-ya LI Lin YU Lu-xin XU Shao-rui |
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