山东济宁骚扰库蚊对常用杀虫剂的抗性研究

目的 对山东济宁发现的骚扰库蚊进行鉴定,研究其对5种常用杀虫剂的抗性水平。方法 在某小区半地下车库积水中采集库蚊幼虫,对收集到的库蚊进行初步形态学和分子生物学鉴定,确定库蚊的种类。采用幼虫浸渍法研究其对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯、苏云金杆菌以色列变种(Bti)5种杀虫剂的抗性。结果 采集到的库蚊幼虫是骚扰库蚊,为山东省首次报道,其对DDVP、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯、Bti的抗性倍数分别为117.34、53.47、113.50、140.00、2.71。结论 骚扰库蚊作为山东省新出现的蚊种,有必要对其生物学行为和流行病学意义进行深入研究。     

不同品系淡色库蚊各发育阶段的非特异性酯酶和乙酰胆碱酯酶活力变化

研究并探讨非特异性酯酶（NSE）和乙酰胆碱酯酶（AChE）活力在不同品系淡色库蚊（Cules pipiens pallens）各发育阶段的变化，为应用生物化学方法检测蚊虫抗药性及科学合理地进行蚊虫化学防治提供依据。用微量滴定板法测定单个蚊虫NSE和AChE活力，结果显示，敏感品系、DDVP抗性品系和残杀威抗性品系淡色库蚊NSE活力水平在不同发育阶段有变化，I－Ⅲ龄幼虫较低，Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄雌成蚊较高，在各发育阶段均是DDVP抗性品系NSE活力最高，残杀威抗性品系次之，敏感品系最低，其中Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄雌成蚊阶段三个品系间NSE活力差别更明显；三个品系淡色库蚊AChE活力在I－Ⅳ龄幼虫和蛹期较低，3日龄雌成蚊较高，三个品系间AChE活力稍有差异，从高到低依次为残杀威抗性品系、DDVP抗性品系和敏感品系。测定蚊虫NSE活力判断抗药性可选择Ⅳ龄幼虫、蛹和3日龄未吸血雌成蚊；测定蚊虫AChE不敏感性判断抗药性可选择3日龄未吸血雌成蚊；蚊虫化学防治中应选择低龄幼虫阶段施药。     

淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的　获取淡色库蚊CYP4家族新基因。　方法　根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR的方法 ,从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T/A克隆方法 ,将获得的基因片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,经PCR鉴定重组成功 ,测序并进行比对。　 结果　共克隆出 3 6个阳性克隆 ,将其中 9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析 ,表明为CYP4家族中 9个新的cDNA序列 ,由GeneBank登录上网 ;经国际细胞色素P45 0命名委员会鉴定 ,属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P45 0的多样性及其与抗药性的关系打下基础。　结论　克隆 9个淡色库蚊基因部分序列 ,被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。     

济宁地区淡色库蚊幼虫对苏云金杆菌的抗性水平研究

通过苏云金杆菌对采集的几株野外淡色库蚊种群幼虫的灭杀作用,分析不同环境下,该蚊对苏云金杆菌抗药性的差异.采用幼虫液浸法,测定不同淡色库蚊种群幼虫对苏云金杆菌的LC50.结果显示,苏云金杆菌BTH-14对采集的几株淡色库蚊种群幼虫有不同的灭杀效果,其中采集于苇坑种群的试虫对苏云金杆菌表现出一定程度的抗性,但到F2代,该种...     

刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达

目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。     

人囊虫病T淋巴细胞亚群及血清IgE的变化

应用直接ＳＰＡ菌花环法对２７例囊虫病患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群进行检测，同时用ＥＬＩＳＡ法测定血清ＩｇＥ水平。发现患者ＣＤ３＋，ＣＤ４＋细胞的百分率明显降低，ＣＤ４／ＣＤ８比值明显下降，血清ＩｇＥ含量显著升高。经分析，患者ＣＤ４细胞、ＣＤ４／ＣＤ８比值与ＩｇＥ对数值呈负相关。揭示囊虫病患者Ｔ细胞亚群比例失调，免疫功能紊乱。本文对可能的免疫调节机制和发病机理进行了探讨。     

山东省沿海地区淡色库蚊感染沃尔巴克氏体的初步调查研究

目的 了解山东省沿海地区淡色库蚊种群中沃尔巴克氏体（Wolbachia）的感染情况及其分型，为蚊媒疾病防治提供新的研究方向和理论基础。方法 2022年6月—2023年8月，利用灯诱法采集山东省的烟台市莱州市、烟台市龙口市、青岛市黄岛区、青岛市崂山区、日照市五莲县、日照市东港区、东营市河口区及东营市东营区共8个采样点的蚊媒样本，采用形态学和分子学相结合的方法鉴定出淡色库蚊自然种群样本。然后利用沃尔巴克氏体的表面蛋白（Wolbachia surface protein, wsp）基因序列建立的PCR检测方法，对上述8个采样点的淡色库蚊样本进行沃尔巴克氏体感染率的检测。同时，从GenBank数据库中下载沃尔巴克氏体的代表株系，利用Mega5.2软件对所获基因序列进行系统发育分析以分型。结果 山东省4个沿海城市均发现有沃尔巴克氏体的感染，平均感染率为80.8%(261/323)；其中烟台市的感染率最高，为100%(46/46)；日照市五莲县的感染率最低，为60.6%(20/33)。共计发现12种wsp单倍型，其中Hap1的感染率为92.5%,Hap2的感染率为70.0%，而其他单倍型的感染率则...     

医院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌的分布及同源性分析

目的对医院ICU多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Ab)的分布及同源性进行分析,为临床MDR-Ab感染的控制与治疗提供参考。方法采用纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)对本院2009年7月～2011年7月培养出的78株鲍曼不动杆菌(Ab)进行药敏试验,从中挑选出MDR-Ab,应用脉冲场凝胶电泳(PFDE)进行同源性分析,对同源性MDR-Ab感染者所在的床单元进行多部位取样培养及药敏试验,确定其感染来源、途径及分布特点。结果 1)共培养出的78株Ab,其中44株(56.4%)来自呼吸道标本;2)78株Ab对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦及米诺环素的耐药率相对较低,共分离出8株MDR-Ab,A型4株,B型3株,C型1株;3)医护人员的手及清理床旁仪器的抹布MDR-Ab检出率为66.7%。结论本研究培养出的A、B型MDR-Ab有同源性且存在交叉感染现象;医务人员的无菌观念及无菌操作技术薄弱,手部卫生状况差是医院ICU MDR-Ab流行的重要因素。     

间接荧光抗体试验用于基本消灭丝虫病地区人群抗体水平的监测

本文报告了用马来丝虫成虫冰冻切片抗原作 IFAT 检测班氏丝虫微丝蚴血症者抗体阳性率为88.89％;非流行区健康居民抗体阳性率为3.92％。基本消灭丝虫病后8年的地区原微丝蚴血症者和阴性居民抗体阳性率分别为13.54％和10.84％;基本消灭后15年原微丝蚴血症者和阴性居民抗体阳性率分别为6.45％和5.16％;基本消灭后24年原微丝蚴血症者和阴性居民抗体阳性率分别为3.67％和3.96％。基本消灭丝虫病后15年的地区人群抗体阳性率已降到非流行区健康人群水平(X~2=0.48 P>0.05)。因此认为 IFAT 可作为我省丝虫病防治后期和基本消灭丝虫病后流行病学监测的主要方法之一。此外,观察到微丝蚴血症者血清抗体阳性率和阳性 GMRT 与微丝蚴密度无相关性。     

巴西藁杆双脐螺对3株曼氏血吸虫的敏感性

人工湖等水利工程可能成为淡水螺的孳生地 ,增加人类及动物感染血吸虫的机会。作者在人工湖周围地区藁杆双脐螺的发生和分布的流行病学调查的基础上 ,研究了藁杆双脐螺对曼氏血吸虫毛蚴的敏感性。根据最近两年来螺的种群研究结果 ,选择湖区周围曼氏血吸虫病主要流行的地区进行调查。实验所需的 1 9个藁杆双脐螺种群中 ,大部分在流行区获得 ,另外两个对照种群来自于其它地区。螺分别暴露于 5个曼氏血吸虫毛蚴 (从 3株曼氏血吸虫分离获得 ,分别为CM、EC和PB株 )。观察感染的阳性率和尾蚴前期发育时间。暴露 6 0d后 ,尾蚴未逸出但仍然存活的…