淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的　获取淡色库蚊CYP4家族新基因。　方法　根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物 ,采用RT PCR的方法 ,从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T/A克隆方法 ,将获得的基因片段克隆入 pGEM Teasy载体 ,经PCR鉴定重组成功 ,测序并进行比对。　 结果　共克隆出 3 6个阳性克隆 ,将其中 9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析 ,表明为CYP4家族中 9个新的cDNA序列 ,由GeneBank登录上网 ;经国际细胞色素P45 0命名委员会鉴定 ,属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P45 0的多样性及其与抗药性的关系打下基础。　结论　克隆 9个淡色库蚊基因部分序列 ,被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。     

二维凝胶电泳技术在病原生物学中的应用

1　背景蛋白质组分析的三大主要步骤是 :(1)分离复杂的蛋白质混合物 ;(2 )鉴定分离出的多肽 ;(3)数据库比对。与此相对应的三大核心技术分别是二维凝胶电泳技术、质谱技术、生物信息学。对于分离复杂的蛋白质混合物 ,二维凝胶电泳是目前惟一能同时分辨上千乃至上万种蛋白质的技术 ,由于它的高通量和高分辨率 ,虽然这项技术还有很多值得改进的地方 ,但仍被广泛地应用于生物学研究的各个领域。2　二维凝胶电泳技术简介二维凝胶电泳技术在 1975年由O’Farrell〔1〕以及Klose和Scheele等人发明 ,它的原理是基于蛋白质的两个完全独立的物理性质…     

淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的获取淡色库蚊CYP4家族新基因。方法根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT-PCR的方法，从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T／A克隆方法，将获得的基因片段克隆入pGEM-Teasy载体，经PCR鉴定重组成功，测序并进行比对。结果共克隆出36个阳性克隆，将其中9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析，表明为CYP4家族中9个新的cDNA序列，由GeneBank登录上网；经国际细胞色素P450命名委员会鉴定，属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P450的多样性及其与抗药性的关系打下基础。结论克隆9个淡色库蚊基因部分序列，被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。