应用光敏生物素标记DNA探针监测疟疾的研究

用光敏生物素标记含恶性疟原虫DNA片段的质粒pBF4探针，通过核酸分子杂交试验，探针的敏感性为20pg靶DNA和0．001％原虫血症；并可从多种疟原虫DNA标本中特异地检出恶性疟原虫DNA．显示该探针具有良好的特异性和敏感性。检测恶性疟病人血样，与镜检的符合率为95．4％（123／129），表明本探针有良好的应用价值。     

黄淮平原鲁南滨湖稻田区加强传染源检测与管理消灭疟疾的实验研究

本文通过在济宁市郊区唐口乡的现场实验观察,证明在黄淮地带以中华按蚊为媒介的间日疟流行区,依靠加强传染源检测与管理的措施,可能在几年的时间内达到控制与消灭疟疾之目的。     

应用DNA探针检测蚊体内丝虫幼虫的研究

本文用人工合成的寡核苷酸探针，经斑点杂交法检测蚊体内马来丝虫幼虫。可测到丝虫和微丝蚴２ｎｇ的ＤＮＡ量，不与其它动物丝虫标本发生交叉反应。将单个蚊直接压于硝酸纤维素膜上进行检测，感染蚊中含有１条感染期幼虫就可出现阳性反应。将一组蚊虫在裂解液中研磨集体检测时，在２０只蚊虫中有１只感染蚊即可检出。显示该探针可用于马来丝虫地区的蚊媒监测。     

刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达

目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。     

疝环充填式和平片式疝修补术治疗腹股沟疝疗效及预后分析

目的:分析疝修补术中平片式、疝环充填式两种术式分别用于腹股沟疝者治疗,患者临床预后与治疗效果。方法:以2014年1月至2017年12月期间于广州市增城区仙村镇卫生院行疝修补术治疗的120例腹股沟疝者作为观察对象,按入院时间分组,以2014年1月至2015年12月期间入院的58例患者为对照组(行疝环充填式),以2016年1月至2017年12月入院的62例患者为观察组(平片式修补术),比较不同术式临床疗效、预后差异,观察两种术式手术、术后恢复差异。结果:两组患者在预后(复发率、并发症发生率)、术后恢复情况(住院、下床、疼痛持续时间)、手术情况(手术时间、出血量)以及临床疗效比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:腹股沟疝者以平片式或疝环充填式修补术治疗,均能取得良好治疗效果,术后并发症少、患者恢复快。     

山东省间日疟原虫MSP-1和CSP等位基因型及同源性分析

目的分析山东省间日疟原虫MSP-1和CSP基因类型及其同源性,为病例溯源提供科学依据。方法采集2011年山东省报告的12例间日疟患者血样,提取疟原虫基因组DNA;分别根据间日疟原虫MSP-1和CSP基因序列设计引物,进行巢式PCR扩增、酶切、测序、序列比对及同源性分析。结果 12份间日疟患者血样MSP-1基因全部出现470bp扩增条带以及350、120 bp酶切片段,均为Sal-1型;MSP-1进化树分析显示,9份省内感染者样品序列同属一个分枝,1份印度感染者样品序列与印度分离株位于同一分枝。12份间日疟患者样品CSP基因均包含GDRA(D/A)GQPA序列,为PV-Ⅰ型,其中10份省内感染者和1份广东感染者样品CSP基因出现560~840 bp和150~230 bp两种扩增条带,为PV-Ⅰ型温带族,1份在印度感染者样品CSP基因仅出现560~840 bp条带,为PV-Ⅰ型热带族。CSP进化树表明,10份省内感染者及1份广东感染者样品序列同属一个分枝,1份在印度感染者样品序列与印度和印度尼西亚分离株位于同一分枝。结论山东省本地感染间日疟原虫MSP-1基因型均为Sal-1型,CSP基因型均为PV-Ⅰ型温带族,本地虫株具有较强的基因同源性。     

山东省胶东地区居民肠道寄生虫感染及相关认知行为状况调查

目的 目的 了解山东省胶东地区肠道寄生虫感染及相关认知行为现状, 为制定现阶段相应的防治策略提供科学依 据。方法 方法 按照分层抽样法, 选择胶东地区6个县的18个村作为调查点。采用改良加藤厚涂片法 （Kato?Katz） 检测调查点 ≥ 3岁常住居民粪便中的常见肠道寄生虫虫卵, 12岁以下儿童以透明胶纸肛拭法检查蛲虫卵。每调查点随机抽取50户家 庭, 采用结构式问卷调查家庭基本情况及居民寄生虫病防治知识知晓和卫生行为形成情况等。结果 结果 粪检6 163人, 肠道 寄生虫总感染率6.91%, 其中鞭虫、 蛔虫、 钩虫感染率分别为6.56%、 0.62%、 0.21%; 12岁以下儿童蛲虫感染率为0.51%; 未检 测到华支睾吸虫、 带绦虫等其他虫卵。人群寄生虫病防治知识知晓率为49.54%; 饭前洗手、 便后洗手、 生吃瓜果蔬菜洗净、 下地干农活不光脚、 不喝生水等健康行为形成率分别为97.78%、 91.95%、 88.81%、92.42%、 86.48%。结论 结论 胶东地区人群 肠道寄生虫感染水平较低, 但地区间差异较大; 寄生虫病防治知识知晓率不高, 但卫生行为形成情况较好。应加强健康教 育及重点人群服药, 积极推进农村改水改厕工程, 尽快降低肠道寄生虫病的危害。     

弓形虫微线蛋白16抗原表位区的预测及酵母表面展示

目的应用生物信息学软件预测弓形虫微线蛋白16(TgMIC16)B/T细胞抗原表位并对抗原表位区进行酿酒酵母菌的表面展示。方法利用DNAStar和IEDB对TgMIC16进行B细胞抗原表位预测,利用SYFPEITHI和BIMAS预测其T细胞抗原表位。参照预测结果,采用pCTCON2/EBY100展示系统对抗原表位区进行酵母表面展示,利用间接免疫荧光(IFA)和流式细胞仪检测表达情况。结果 TgMIC16存在潜在的B/T细胞抗原表位且集中在aa343-625区域;该抗原表位区成功展示到酵母细胞表面,最佳诱导时间为24~36h。结论为下一步酵母载体疫苗的研制及疗效评价奠定基础。     

228例脑囊虫病患者血清特异IgG4临床分析

目的 评价检测 清特异ＩｇＧ４指导临床应用的价值。方法 检测血清特异ＩｇＧ４并与患者脑组织内囊尾蚴感染程度，临床表现、杀虫反应等进行比较分析。结果 血清特异ＩｇＧ４水平与患者无绦虫史无明显关系。脑型合并皮下结节患者血清特异ＩｇＧ４阳性率和阳性强度明显高于单纯型脑囊虫病，而单纯型脑囊虫病患者与皮下结节消失的脑囊虫病患者之间血清特异ＩｇＧ４水平无明显差异。患者脑组织内囊尾蚴感染程度和抗囊疗效以及服药后     

猪囊虫短程抗体快速ELISA检测试剂盒的建立和初步应用

目的：建立猪囊虫特异IgG4快速检测试剂盒，并初步探讨其应用价值。方法：采用辣根过氧化物酶标记的抗人IgG4单克隆抗体为探针，结合商品化的酶联免疫吸附试验制成快速检测试剂盒，检测现症囊虫病病人，其它寄生虫病病人和健康对照血清中的特异IgG4。结果：44例现症囊虫病病人特异IgG4阳性42例，阳性率为95.5%，21例正常人及27例其它寄生虫病人检测全部阴性（阴性100%，包虫除外）。结论：本试剂盒操作简单、快速，结果鲜明便于目测判断，适于推广用作猪囊虫病的诊断及近期疗效考核。