MDS铁过载小鼠模型建立及鉴定

目的:建立一种MDS铁过载小鼠模型,研究铁过载对MDS的影响。方法:通过逆转录病毒,将外源突变基因RUNX1-S291fs插入小鼠骨髓单个核细胞基因组,然后移植给经60Coγ射线照射的C57BL/6小鼠。8周后,腹腔注射铁剂,建立MDS铁过载小鼠模型。移植24周后,取小鼠外周血、骨髓、股骨、肝脏和脾脏进行鉴定:对外周血和骨髓细胞行瑞氏染色观察形态特征;对股骨、肝脏和脾脏组织行HE染色检测病理变化;对肝脏、脾脏和骨髓行普鲁士蓝染色观察铁沉积情况;应用流式细胞术检测小鼠骨髓细胞抗原表达情况;对骨髓单个核细胞和脾组织蛋白行免疫印迹实验,确认RUNX1-S291fs基因转入并表达蛋白。移植后对小鼠定期监测血常规指标和移植细胞嵌合率。结果:相比空白质粒对照小鼠,RUNX1-S291fs突变小鼠外周血白细胞计数、血红蛋白水平和血小板计数均降低;外周血和骨髓细胞显示病态造血;肝脏和脾脏明显增大;在股骨、肝脏和脾脏可见组织结构异常;骨髓细胞表面抗原表达异常;骨髓细胞和脾组织有RUNX1-S291fs蛋白表达。相比生理盐水对照小鼠,铁剂注射小鼠普鲁士蓝染色可见骨髓、肝脏和脾脏组织有明显铁沉积。结论:注射铁剂的RUNX1-S291fs突变组小鼠合并有MDS和铁过载的病理特征,成功构建了MDS铁过载小鼠模型,为研究铁过载对MDS的影响奠定了基础。     

紫外线照射自血回输治疗急性呼吸窘迫综合征

1　治疗方法　　采患者静脉血 10 0～ 4 0 0ｍＬ于血袋内 ,然后转移至石英玻璃瓶内 ,置血液量子治疗仪内 ,紫外线照射并通入氧气(3～ 5Ｌ/ｍｉｎ) ,震荡 8～ 10ｍｉｎ后取出石英玻璃瓶 ,将照射后的血液回输给患者 ,每日治疗 1次 ,连续数次 ,直至患者症状消失及血气分析恢复正常。2　病例报告　　例 1.男 ,5 9岁。因反复乏力、鼻衄、齿龈出血 3个月 ,加重 5ｄ于 1995 - 0 3- 0 9入院。入院诊断 :慢性再生障碍性贫血。给予雄激素、环孢菌素Ａ、强的松等治疗。入院 3个月后患者出现发热、呼吸困难、心慌。给予吸氧、抗感染、强心利尿等治疗 ,但…     

活性氧介导铁过载对正常及辐射损伤小鼠骨髓间充质干细胞的影响

目的 探讨铁过载对正常及病态骨髓间充质干细胞(MSCs)的损伤作用及其机制.方法 将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、铁剂组、照射组、及照射加铁剂组,给予铁剂4周.分离培养MSCs,普鲁士蓝铁染色检测MSCs内铁颗粒、流式细胞仪检测可变铁池(LIP)及活性氧(ROS)水平,CCK8检测MSCs增殖能力,油红-O染色检测MSCs成脂定向分化能力、茜素红染色检测成骨定向分化能力,实时定量-PCR(real-time PCR)检测成骨相关基因表达.结果 与对照组及照射组相比,铁剂组及照射加铁剂组MSCs内明显存在铁颗粒,LIP水平明显增高(P ＜0.05);ROS水平明显增加(P＜0.05);细胞增殖能力明显下降(P＜0.05);成骨分化能力下降(P＜0.05),向成脂细胞分化能力增强.结论 铁过载可介导ROS升高影响正常及病态骨髓MSCs的增殖、定向分化能力,降低其造血支持作用,并间接引起骨损害.     

中医药治疗手足口病80例临床观察

目的:观察自拟中药方治疗手足口病的疗效。方法:将160例手足口病随机分为两组,治疗组80例以自拟中药方治疗,对照组80例口服利巴韦林片治疗。结果:总有效率治疗组为93.8%,对照组为82.5%,两组疗效差异有统计学意义(P<0.05)。结论:自拟中药方治疗手足口病有较好的疗效,能够缩短病程,迅速减轻症状。     

Th1细胞在再生障碍性贫血发病机制中的作用

目的　探讨再生障碍性贫血 (再障 )患者Th1、Th2细胞的数量、比例、产生细胞因子的功能状态及其与造血衰竭的关系 ,判断Th1细胞在重型再障 (SAA)发病机制中的作用。方法　①采用甲基纤维素培养法扩增 11例SAA患者骨髓单个核细胞 (BMMNC)去除CD4+ 细胞前、后红系集落形成单位 (CFU E)、红系爆式集落形成单位 (BFU E)、粒 巨噬系集落形成单位 (CFU GM) ;②用流式细胞术检测经体外刺激后的 2 1例SAA患者及 17名正常人外周血单个核细胞 (PBMNC)中Th1、Th2细胞 ;③RT PCR检测 2 7例再障、2 6例非再障患者及 11名正常人未经体外刺激的BMMNC中Th1细胞的代表性细胞因子IFN γ和Th2细胞的代表性细胞因子IL 4的基因表达。结果　①去除CD4+ 细胞后 ,SAA患者BMM NC中的CFU GM、CFU E和BFU E产率都有显著提高 ;②SAA患者外周血Th1与Th2细胞比例明显失衡 ,Th1细胞显著增多 ;③SAA和慢性再障患者骨髓中Th1细胞产生IFN γ的功能异常增高 ,而Th2细胞产生IL 4的功能未发现明显异常。结论　再障患者的CD4+ T淋巴细胞亚群失衡、Th1细胞数量增多及功能亢进可能是导致SAA骨髓衰竭的重要环节 ,也是再障区别于其它全血细胞减少症的标志之一。     

DA或HA方案治疗难治、复发性阵发性睡眠性血红蛋白尿症的初步观察

目的　观察DA[柔红霉素 (DNR) 4 0mg第 1,2天 ,2 0mg第 3天 ;阿糖胞苷 (Ara C) 10 0mg d ,共 5d]或HA[高三尖杉酯碱 (HHT) 2～ 3mg d ,共 5d ;Ara C 10 0mg d ,共 5d]联合化疗方案治疗难治、复发性阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者的疗效及不良反应。方法　 3例使用DA方案 ,5例应用HA方案治疗难治、复发性PNH患者 ,分析疗效及不良反应。结果 8例患者化疗均有效 ,所有患者肾上腺糖皮质激素的用量较化疗前减少 6 6 %～ 10 0 % (中位数 75 % )。 6例检查PNH克隆患者治疗后 5例PNH细胞比例明显减少 ,1例无变化。 6例溶血指标明显好转。 8例患者经治疗后 2例进步 ,6例明显进步。 7例依赖输血者中 6例脱离输血。未发现严重的不良反应。结论DA或HA方案是治疗难治、复发性PNH较为安全、有效的方法。     

输血依赖性疾病多脏器铁沉积MRI量化分析

目的 探讨MRI T2^*Map评价输血依赖性疾病患者多脏器铁沉积的价值。方法 收集输血依赖性疾病患者30例,按输血量分为未输血组(n=7)、少量输血组(3年内累计输血量1~150 U,n=13)和大量输血组(3年内输血量>150 U,n=10);收集同期健康志愿者28名(正常组)。采用3.0T MR多回波梯度回波序列获得肝脏、心脏、胰腺的T2^* Map,比较组间同器官T2^*值,分析不同器官T2^*值的相关性及T2^*值与血清铁蛋白(SF)、输血量的相关性。结果 正常组和未输血组肝脏T2^*值高于少量输血组(q=13.23、12.29)与大量输血组(q=13.10、12.23);正常组和未输血组胰腺T2^*值高于少量输血组(q=4.23、3.63)与大量输血组(q=7.14、5.88),少量输血组高于大量输血组(q=2.54);正常组、未输血组心脏T2^*值高于大量输血组(q=2.29、3.11);差异均有统计学意义(P均<0.05)。心脏与胰腺T2^*值呈正相关(r=0.542,P=0.017),心脏、胰腺与肝脏T2^*值均无明显相关性(r=0.32、0.65,P>0.05)。肝脏T2^*值与SF呈中度负相关(r=-0.503,P=0.028),心脏、胰腺T2^*值与SF无明显相关性(r=-0.30、-0.61,P>0.05);肝脏、胰腺T2^*值与3年内输血量呈中度负相关(r=-0.528、-0.793,P均<0.01),心脏T2^*值与3年内输血量无明显相关性(r=-0.252,P=0.246)。结论 输血依赖性疾病患者铁最早沉积于肝脏,胰腺、心肌次之;MRI T2^* Map可直接、可靠地检测各器官的铁沉积水平。     

骨髓增生异常综合征向急性白血病转化的研究

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)向急性白血病(AL)转化(转白)的规律.方法动态观察151例MDS患者的转白情况及转白患者(postMDS-AL)的临床表现、血常规、骨髓象、染色体核型、细胞免疫表型及治疗反应、预后特点.结果8年7个月内,151例MDS患者转白21例(13.91%),中位转白时间5(1～23)个月.RA、RAEB、RAEB-t间转白率差异无显著性,逐步转白和直接转白病例均可见.影响MDS转白的因素有年龄≤40岁;三系血细胞减少;骨髓原始细胞比例≥O.150;复杂染色体核型异常;联合化疗.postMDS-AL21例皆为急性髓系白血病(AML),以M2、M4和M5为主.其中2例(9.52%)有白血病细胞浸润表现;10例(47.62%)外周血白细胞计数减少,14例(66.67%)外周血中性粒细胞计数减少,14例(66.67%)骨髓增生活跃或明显活跃.8例(47.06%)转白前后异常染色体核型发生了改变.骨髓单个核细胞髓系不成熟抗原CD33(49.83±24.50)%、CD13(36.38±33.84)%,单核细胞相关抗原CD14(38.50±24.60)%及早期造血细胞标志抗原CD34(34.67±30.59)%,也可共表达淋巴细胞系抗原CD5、CD7、CD9、CDi9.postMDS-AML的诱导化疗完全缓解率为31.25%,中位生存时间6(1～28)个月.结论MDS是一类高风险向AML转化的疾病,转化方式可渐进也可突变;postMDS-AML有独特的生物学表现,且预后差.     

骨髓增生异常综合征造血细胞凋亡的研究进展

骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）是一组恶性克隆性造血干细胞疾病,以血细胞的质、量异常,骨髓病态造血及高风险发展为急性白血病为主要特征。大部分ＭＤＳ患者在髓内造血活跃的同时,却伴有外周血细胞减少。这一矛盾现象被称为ＭＤＳ骨髓和“无效造血”。不少研究表明,过...     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症治疗的研究进展

阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）是一种获得性克隆性造血干细胞疾病。近年来，PNH的治疗取得了一些新的进展，如肾上腺皮质激素、肝素和低分子量肝素、GPI锚链蛋白、补体受体治疗PNH溶血发作；免疫抑制剂、造血生长因子低增生PNH、低剂量联合化疗、骨髓移植、基因对PNH的根治性治疗。本文叙述了PNH的治疗进展及机制。