MDS铁过载小鼠模型建立及鉴定

目的:建立一种MDS铁过载小鼠模型,研究铁过载对MDS的影响。方法:通过逆转录病毒,将外源突变基因RUNX1-S291fs插入小鼠骨髓单个核细胞基因组,然后移植给经60Coγ射线照射的C57BL/6小鼠。8周后,腹腔注射铁剂,建立MDS铁过载小鼠模型。移植24周后,取小鼠外周血、骨髓、股骨、肝脏和脾脏进行鉴定:对外周血和骨髓细胞行瑞氏染色观察形态特征;对股骨、肝脏和脾脏组织行HE染色检测病理变化;对肝脏、脾脏和骨髓行普鲁士蓝染色观察铁沉积情况;应用流式细胞术检测小鼠骨髓细胞抗原表达情况;对骨髓单个核细胞和脾组织蛋白行免疫印迹实验,确认RUNX1-S291fs基因转入并表达蛋白。移植后对小鼠定期监测血常规指标和移植细胞嵌合率。结果:相比空白质粒对照小鼠,RUNX1-S291fs突变小鼠外周血白细胞计数、血红蛋白水平和血小板计数均降低;外周血和骨髓细胞显示病态造血;肝脏和脾脏明显增大;在股骨、肝脏和脾脏可见组织结构异常;骨髓细胞表面抗原表达异常;骨髓细胞和脾组织有RUNX1-S291fs蛋白表达。相比生理盐水对照小鼠,铁剂注射小鼠普鲁士蓝染色可见骨髓、肝脏和脾脏组织有明显铁沉积。结论:注射铁剂的RUNX1-S291fs突变组小鼠合并有MDS和铁过载的病理特征,成功构建了MDS铁过载小鼠模型,为研究铁过载对MDS的影响奠定了基础。     

丹参多酚对铁过载引起的脐血造血细胞氧化应激损伤的抑制作用

目的探讨丹参多酚对铁过载引起的脐血造血细胞氧化应激损伤的保护作用。方法分离脐血单个核细胞,分为对照组、模型组、丹参多酚低、中、高剂量组。模型组及丹参多酚低、中、高剂量组以400μmol/L浓度的枸橼酸铁胺(FAC)建立铁过载细胞模型,丹参多酚低、中、高剂量组于培养第3天分别加入18、50、160μg/m L丹参多酚培养24 h;对照组不加FAC及丹参多酚。采用流式细胞术检测各组细胞的活性氧(ROS)水平、细胞凋亡率,计数各组细胞集落形成数量。结果模型组ROS水平高于对照组及丹参多酚各剂量组(P均<0.05)。模型组细胞凋亡率高于对照组及丹参多酚高剂量组(P<0.05)。模型组红系祖细胞集落形成单位(CFU-E)、粒—单核系祖细胞集落形成单位(CFU-GM)、爆式红系祖细胞集落形成单位(BFU-E)和混合祖细胞集落形成单位(CFU-mix)数量均低于对照组及丹参多酚高剂量组(P均<0.05)。结论丹参多酚可减轻氧化应激引起的细胞凋亡及其对造血细胞增殖、分化功能的抑制作用。     

铁过载对器官功能损伤及磁共振检测铁过载研究进展

铁过载可导致多器官功能损害。铁过载的病情隐匿,表现多样,进展缓慢,组织受累程度多变,常在组织和器官显著受损后才能作出诊断。及时进行铁螯合治疗能有效减轻损害程度。因此,及时检测器官铁过载至关重要。目前检测铁含量的指标包括肝活检检测肝铁浓度(liver iron concentration,LIC)、血清铁蛋白(serum ferritin,SF)和转铁蛋白饱和度(transferrin saturation,TS)及核磁共振成像(MRI)。由于MRI检测器官的无创性及可靠性,该技术越来越受到学者的重视。本文就铁过载引起各个器官的损害情况及MRI检测器官铁过载的结果做一综述。