PC12细胞蛋白质组学研究技术及二维电泳图谱的建立

目的：建立PC12细胞的蛋白质组学研究的技术体系,全面展示PC12细胞的蛋白质表达谱。方法：提取PC12细胞的蛋白质,建立固相pH梯度双向电泳图谱,应用图像扫描仪及ImageMaster 2D Evolution分析软件获得蛋白质点的数字化和匹配性信息,挑选匹配良好的高峰度蛋白点,进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）的鉴定。结果：成功构建出PC12细胞的双向电泳图谱,并用MALDI-TOF-MS成功鉴定出19种PC12细胞的蛋白质,分属于以下6类：分子伴侣及相关功能蛋白、细胞结构/骨架蛋白、代谢相关蛋白、凋亡相关蛋白、激素结合相关蛋白和神经内分泌相关蛋白。结论：PC12细胞样品的蛋白质样品双向电泳图谱重复性良好,初步建立了PC12细胞的蛋白质组学研究技术,证明以PC12细胞为模型的神经系统疾病蛋白质组学研究的可行性。     

肾小球系膜细胞一氧化氮合成酶细胞外基质合成影响的研究

目的研究体外培养的系膜细胞诱生型一氧化氮合成酶(iNOS)表达水平对细胞外基质成分(IV型胶原、纤维连接蛋白)含量的影响。方法胎肾培养原代系膜细胞，取Ⅲ代细胞进行实验。采用TRLzolRNA一步法提取系膜细胞总RNA。半定量逆转录聚合酶链反应法(RT—PCR)测定iNOSmRNA表达，以β-action为内对照。酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中细胞外基质成分IV型胶原、纤维连接蛋白(FN)的含量。硝酸还原酶法检测培养液中NO的含量。对照组为RPMI1640 10％小牛血清(FGS) 1mM左旋精氮酸(L-arginine)，实验组为1脂多糖(LPS)10ug／ml，观察24h。结果系膜细胞中iNOSmRNA的表达；在未刺激的MC中无iNOSmRNA表达；刺激后4小时可检测到iNOSmRNA表达，6小时明显增加，24小时达到高峰；至48hr，iNOSmRNA表达仍继续增加。上清中的NO：(1)6小时LPS组与对照组无明显差别，24小时后LPS组NO含量增加：(2)LPS诱导的NO含量的增加可被L—NAME抑制。上清IV型胶原，FN含量：(1)4小时、6小时、24小时、48小时LPS组与对照组比较含量降低(P(O，05)(2)I。PS诱导的IV型胶原、FN的降低被L—NAME明显抑制。结论我们的研究发现肾小球MC确含有iNOS，且在生理状态下呈稳定状态，病理状态下iNOS表达上调；MC分泌的ECM与i—NOS表达有关；NO可降低ECM的含量，提示iNOS诱导的NO在肾小球硬化的发生和发展中起到了重要作用；各种因素对iNOS影响的最终结果是NO的变化．能够引起iNOS表达变化的各种因素均可引起NO含量的变化，从分子水平进一步证实肾小球MC-氧化氮合成酶的表达水平与细胞外基质密切相关。     

大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎疗效分析

目的：观察大剂量丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎的疗效。方法安康市中心医院2012年6月至2014年9月收治的95例乙型脑炎患儿随机分成两组。对照组47例,给予常规综合治疗(抗病毒治疗+营养支持+对症治疗);研究组48例,在常规综合治疗的基础上,给予丙种球蛋白静脉输注1g·kg-1·d-1联合纳洛酮(0.01~0.02)mg/kg治疗。结果研究组患儿平均退热时间、抽搐时间及意识障碍持续时间较对照组明显缩短(t值分别为4.526、3.371、4.487,均P<0.01);研究组较对照组呼吸衰竭发生率明显降低(χ2=14.341,P<0.05);研究组治愈率显著高于对照组(χ2=19.234,P<0.01)。结论丙种球蛋白联合纳洛酮治疗乙型脑炎较单纯综合治疗更为有效,能够显著降低死亡率,提高治愈率,减少后遗症的发生,应在临床治疗中普遍推广及应用。     

易误诊为路易体痴呆的神经梅毒1例

<正>近年神经梅毒发病率逐渐增高,但因其仍较少见,临床表现具有不典型性和复杂多样性,极易误诊,为提高对本病的认识,现将本院收治的1例极易误诊为路易体痴呆的神经梅毒患者报道如下,并结合文献进行讨论。1临床资料男,54岁。因"四肢抖动、记忆力下降3月,行走不稳1周"于2015年7月5日入院。患者于3月来不自主四肢抖动、记忆力下降,近1周出现行走不稳。既往有高血压病史1     

中性粒细胞胞外诱捕网与肺疾病研究进展

正中性粒细胞在机体对抗病原的先天免疫中起着关键作用。在感染早期,中性粒细胞在蛋白水解酶、抗菌蛋白和活性氧(Reactive oxygen specie,ROS)帮助下迁移到感染部位,吞噬并杀死细菌。Brinkmann[1]于2004年发现,中性粒细胞在细胞外产生一种由组蛋白、DNA和蛋白酶(Elastinase,NE)组成     

红花黄色素氯化钠注射液联合普萘洛尔治疗冠心病心绞痛的临床研究

目的探讨红花黄色素氯化钠注射液联合普萘洛尔治疗冠心病心绞痛的临床效果。方法选取2015年10月—2018年12月资阳市人民医院收治的冠心病心绞痛患者92例,随机分成对照组(46例)和治疗组(46例)。对照组饭后口服盐酸普萘洛尔片,10 mg/次,3次/d。治疗组在对照组基础上静脉滴注红花黄色素氯化钠注射液,100 mL/次,1次/d,滴速应≤30滴/min。两组患者均连续治疗14 d。观察两组患者临床疗效和心电图疗效,同时比较治疗前后两组患者心绞痛发作情况、心电图参数、心肌耗氧指数(MOCI)值、血流变学指标、血小板最大聚集率(MAR)、血浆B型利钠肽(BNP)和C反应蛋白(CRP)水平。结果经治疗,对照组临床有效率和心电图疗效分别为82.6%和69.6%,均明显低于治疗组的95.7%和87.0%,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组心绞痛发作次数、持续时间和硝酸甘油用量均显著下降(P0.05),且治疗组心绞痛发作情况明显低于对照组(P0.05)。治疗后,两组心电图各项参数ST段下降导联数(NST)、ST段压低数值总和(∑ST)、心肌缺血时间及MOCI值均显著降低(P0.05),且治疗组心电图参数和MOCI值明显低于对照组(P0.05)。治疗后,两组WLV、WHV和PV值较治疗前均显著减小(P0.05),且治疗组WLV、WHV和PV值明显小于对照组(P0.05)。治疗后,两组患者MAR值和血浆BNP、CRP水平均显著降低(P0.05),且治疗组MAR值及BNP、CRP水平明显低于对照组(P0.05)。结论红花黄色素氯化钠注射液联合普萘洛尔治疗冠心病心绞痛,能有效控制心绞痛发作,改善患者心电图及心功能,减少心肌耗氧量。     

甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对肿瘤Walker256细胞的影响

目的：研究姜黄素及甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对Walker256细胞的影响。方法：不同浓度姜黄素与甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体处理Walker256细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;用流式细胞仪检测细胞吸收、细胞周期变化情况;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot检测Wnt及β-catenin表达水平。结果：姜黄素和甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体对肿瘤细胞Walker256均具有明显的抑制作用。与游离姜黄素相比,甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体明显增强细胞对姜黄素的吸收,显著增强对Walker256细胞的增殖抑制、凋亡、细胞周期G2期的阻滞作用,明显下调Wnt及β-catenin的表达。结论：甘草次酸修饰姜黄素阳离子脂质体比游离姜黄素具有更强的抗肿瘤Walker256细胞的作用。     

氟中毒大鼠骨、肾组织自由基水平的变化

目的观察氟中毒大鼠骨、肾自由基水平与钙营养的关系。方法给大鼠饮水投氟10周。利用氟离子电极法测骨氟含量，采用电子自旋共振(ESR)方法观察了不同钙营养条件下大鼠骨自由基水平，并应用流式细胞术检测肾组织细胞内活性氧含量。结果两组饮用含氟水大鼠的骨氟含量较对照组有显著性增高；饲低钙食两组大鼠骨自由基含量较常规食对照组明显升高，而常规食加氟组大鼠骨自由基含量明显比常规食对照组低；大鼠肾组织细胞内活性氧(ROS)在投氟组较之对照组有增多趋势，而这2个投氟组大鼠的红细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性较相应对照组偏低，细胞过氧化氢酶(cAT)的活性在低钙食投氟50nlg／L组较常规食100mgF^-／L组降低。结论氧化应激在氟中毒组织损害机制中的地位在骨与肾组织中是不同的，钙营养状况在氟中毒骨相损害中有着重要作用。