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1.
两种常见缺失型α-地中海贫血快速检测技术的研究 总被引:8,自引:3,他引:5
目的:建立简便快速准确可推广使用的检测α-地中海贫血(α-Thal)右侧失型(-α^3.7)和左侧缺失型(-α^4.2)的聚合酶链反应(PCR)方法。方法:自行研究设计两组引物。优化PCR反应条件。PCR反应产物用1%琼脂糖凝胶电泳分离,溴化乙啶染色,UVP凝胶成像仪下观察记录电泳图谱。结果:运用引物A′、B′、C3进行PCR,出现1700bp扩增带表示-α^3.7,出现1900bp扩增带表示α-珠蛋白基因正常或为野生型。二条扩增带同时出现表示是-α^3.7缺失杂合子。无任何扩增带表示是是东南亚型缺失纯合子。运用引物G′、E、F′进行PCR,根据出现1580bp扩增带和1180bp扩增带可诊断为-α^4.2,还可区分杂合子与纯合子。结论:本研究设计的两组引物及优化的PCR条件,可以简便准确地检测出α-Thal标本中有无-α^4.2和-α^3.7。 相似文献
2.
目的研究芪丹方对5/6肾切除所致慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏的保护作用及机制。方法 50只SD大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,卡托普利组(5 mg·kg-1),芪丹方高、低剂量组(12.34,6.17 g·kg-1),每组10只。采用5/6肾切除法制备CRF大鼠模型。考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量;HE染色观察大鼠肾脏组织病理学改变;流式细胞小球微阵列术(CBA)检测血清炎症因子白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-2(IL-2)的含量;免疫组化法检测肾脏组织CD68的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白及血清BUN、Scr、IL-1α、IL-2含量显著升高(P<0.05,P<0.01),肾组织CD68阳性表达显著增加(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠的24 h尿蛋白,血清Scr、IL-1α、IL-2含量,及肾组织CD68阳性表达均显著降低(P<0.05,P<0.01),芪丹方高剂量组的血清BUN显著降低(P<0.05)。结论芪丹方能有效改善CRF大鼠肾功能,减轻肾脏病理改变,其作用机制可能与通过减少肾脏巨噬细胞的浸润,下调IL-1α、IL-2等细胞因子表达相关。 相似文献
3.
缺失型α-地中海贫血的基因诊断新技术研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的建立诊断我国最常见的三种缺失型α-地中海贫血(α-地贫),即东南亚型缺失(--SEA)、右侧缺失(-α3.7)和左侧缺失(-α42)的PCR技术。方法设计三组PCR引物,优化PCR反应条件,运用PCR、琼脂糖凝胶电泳、UVP凝胶成像技术,根据电泳图谱检测并诊断三种缺失型α-地贫。结果成功地检测这三种缺失型的纯合子、杂合子或双重杂合子,结果与Southern blotting分析一致。完成42例α-地贫样本的基因诊断。结论本研究所建立的检测α-地贫缺失型的技术方法,准确、简便,重复性好,便于推广应用。 相似文献
4.
双波长薄层扫描法测定补阳还五丸中黄芪甲甙的含量 总被引:2,自引:0,他引:2
补阳还五丸为由传统古方补阳还五汤改变剂型而成的中成药 ,其由黄芪、归尾、赤芍、地龙、川芎、桃仁、红花等中药组成 ,具有补益元气 ,活血通络之功效 ,主治中风致半身不遂 ,口眼歪斜 ,口角流涎 ,大便干燥 ,小便频数 ,遗尿不禁、舌淡苔白 ,脉缓无力等症 ( 1)。方中主药为黄芪 ,其主要有效成份为黄芪甲甙 ,本文采用双波长薄层扫描法对该成份进行含量测定效果满意 ,报道如下。1 材料与仪器1 .1 实验材料 :药材为市售品 ,经鉴定均为 95年版中国药典一部收载的品种 ,样品为桂林生物化学厂研制品 ;黄芪甲甙对照品为中国药品生物制品检定所提供 … 相似文献
5.
目的:建立切实可行的诊断我国最常见的三种缺失型α-地中海贫血(简称α-地贫),即东南亚型缺失(--^SEA)、右侧缺失(-α^3.7)和左侧缺失(-α^4.2)的PCR技术。方法:设计三组PCR引物,优化PCR反应条件,运用优化的PCR条件,琼脂糖凝胶电泳,UVP凝胶成像仪,根据电泳图谱检测并诊断三种缺失型α-地贫。结果:运用本研究建立的PCR技术能够成功地检测这三种缺失型的纯合子、杂合子或双重杂合子,结果与Southern blotting分析一致。完成42例α-地贫样本的基因诊断。结论:本研究所建立的三种检测α-地贫缺失型的技术方法准确简便,可重复性好,便于推广应用。 相似文献
6.
多排探测器CT成像技术 总被引:2,自引:3,他引:2
多排探测器XT代表着CT技术的突破,它不仅有优秀的容积数据3D显示,而且从一个横断面技术转变成一个真正的可以任意切面的3D成像。在性能上,多层CT扫描仪可减少扫描时间,降低层面的准直,显著增加扫描范围。 相似文献
7.
低氧训练对大鼠心、肝、肾、海马组织细胞凋亡的影响及其机制研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察低氧训练对大鼠心、肝、肾、海马组织细胞凋亡及HIF-1α、Bax、Bcl-2表达的影响,探讨低氧训练的适应机理。方法:70只SD大鼠按体重随机分为7组,每组10只,即正常对照组(A)、高住8 h组(B)、高住12 h组(C)、常氧运动组(D)、8 h高住低练组(E)、12 h高住低练组(F)和一次力竭运动组(G)。D、E、F组大鼠每天在坡度为0的动物跑台上,以25 m/min的速度训练1 h。训练后,分别将B、E组和C、F组依次放入氧浓度为12.5%(相当于海拔4000 m)的低氧舱内8 h和12h。5 d/周,实验期4周。最后一次训练,B、C、D、E、F、G组以25 m/min的速度训练至力竭,24 h后大鼠均实施速眠新II腹腔麻醉后心脏取血致死,取材。采用HE染色、原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)及蛋白免疫组织化学法检测大鼠心、肝、肾、海马组织细胞凋亡和HIF-1α、Bcl-2、Bax表达。结果:(1)随时间延长,高住组大鼠心、肝、肾、海马组织出现棕褐色凋亡细胞;12 h高住低练组大鼠心、肝、肾组织可见细胞肿胀、间隙明显增大,凋亡细胞核随时间延长明显增多,而海马组织凋亡细胞核明显减少;常氧运动组可见较多凋亡细胞核,一次力竭运动组可见大量凋亡细胞核。(2)高住组、常氧运动组、高住低练组、一次力竭运动组心、肝、肾细胞凋亡指数、Bax、HIF-1α表达显著高于正常对照组(P<0.05),而高住12 h组、常氧运动组、一次力竭运动组海马区细胞凋亡指数、Bax、HIF-1α显著高于正常对照组(P<0.05)。12 h高住低练组心、肝、肾凋亡指数、Bax及HIF-1α表达显著高于常氧运动组(P<0.05),而高住低练组海马区细胞凋亡指数、Bax及HIF-1α表达显著低于常氧运动组(P<0.05)。高住组、常氧运动组、8 h高住低练组心、肝、肾、海马细胞凋亡指数、凋亡发生率及Bax、HIF-1α表达显著低于一次力竭运动组(P<0.05);12 h高住低练组心、肝、肾凋亡发生率、凋亡指数及Bax、HIF-1α表达显著高于高住组和常氧运动组(P<0.05),而高住组和常氧运动组及一次力竭运动组海马组织凋亡发生率、凋亡指数及Bax、HIF-1α表达显著高于高住低练组。(3)各实验组心、肝、肾Bcl-2蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.05);与一次力竭运动组相比,高住8h组、常氧运动组有下降趋势,但无统计学意义;随着低氧暴露时间延长,高住组心、肝、肾Bcl-2蛋白表达增加不明显,高住低练组Bcl-2蛋白表达随低氧暴露时间延长而增加;而高住组、高住低练组海马区Bcl-2蛋白表达随低氧暴露时间延长而降低。结论:(1)耐力运动、8 h和12 h的4000 m低氧暴露、8 h高住低练可提高大鼠有氧代谢能力。(2)低氧、耐力运动、高住低练、一次力竭运动诱导大鼠心、肝、肾、海马组织HIF-1α、Bcl-2及Bax蛋白表达,细胞凋亡率与凋亡指数及损伤与低氧刺激和大强度运动有关,12 h高住低练及一次力竭运动对运动能力影响最明显。(3)Bcl-2与Bax参与调控心、肝、肾、海马组织细胞凋亡,HIF-1α表达可能协同Bcl-2家族调控凋亡相关因子的表达,在低氧训练导致的组织细胞凋亡中发挥双重效应。(4)低氧刺激对不同组织影响不一,对心、肝、肾影响较大,海马组织相对稳定。 相似文献
8.
背景:低氧训练时,机体既要承受运动负荷,同时处于外界的低氧环境,此时, 心组织将如何适应其变化?其机制研究国内外较少。
目的:观察低氧与低氧训练对大鼠心肌细胞凋亡及Bax及Bcl-2表达的影响。
方法:SD大鼠共60只随机分为6组,常氧组、低氧8 h组、低氧12 h组、常氧训练组、低氧8 h训练组和低氧12 h训练组,每组10只。后3组大鼠每天在坡度为0的动物跑台上以25 m/min的速度训练1 h。训练完后,将低氧8 h组、低氧8 h训练组和低氧12 h组、低氧12 h训练组放入氧体积分数为12.5%(相当于海拔4 000 m)的低氧舱内8 h和12 h。实验期为4周,5 d/周。最后1次实验结束后24 h,大鼠均实施速眠新Ⅱ腹腔麻醉后取材,采用苏木精-伊红染色、原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法及蛋白免疫组织化学法检测各组大鼠心肌细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达。
结果与结论:①与常氧组相比, 低氧12h组、常氧训练组、低氧训练组心肌细胞凋亡指数均显著增加 (P < 0.05) ;低氧12 h训练组心肌细胞凋亡指数显著多于常氧训练组和低氧8h训练组(P < 0.05) 。②与常氧组比较,其他各组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax均显著性增高(P < 0.05) ;常氧训练组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax表达显著高于低氧 8 h组,显著低于低氧12 h训练组(P < 0.05) ;低氧12 h训练组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax表达比低氧12 h组、低氧8 h训练组显著增加(P < 0.05)。提示低氧、低氧训练可诱导大鼠心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达, 运动时低氧刺激与细胞凋亡率、凋亡指数及病理损伤有关,其中以低氧12 h后运动训练组最明显,心肌细胞的凋亡调控与Bcl-2和Bax相关。 相似文献
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Bcl-2蛋白家族和p53基因在细胞凋亡中的调控效应 总被引:11,自引:0,他引:11
目的:细胞凋亡是个体发育过程中由一系列基因控制的细胞主动死亡过程。在多数细胞类型中,原癌基因Bcl-2蛋白家族与p53是重要的细胞凋亡调节因子,在细胞凋亡中相互联系,相互作用,从而调控细胞凋亡。文章探讨Bcl-2蛋白家族和p53基因对细胞凋亡的调控机制。资料来源:引用计算机检索1995/2006PubMed、Springer link的相关文章,检索词“apoptosis,Bcl-2protein family,p53”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索1995/2006中国期刊全文数据库或万方数据库的相关文章,检索词为“凋亡,Bcl-2,Bax”,限定文章语言种类为中文。并手工检索《细胞凋亡基础与临床》。资料选择:对资料进行初审,被选文献符合以下标准:①Bcl-2蛋白家族与凋亡的关系。②p53基因与凋亡的关系。③细胞凋亡基因调控的研究。④Bcl-2蛋白家族、p53基因调节细胞凋亡的机制研究。排除重复研究。资料提炼:共收集到70篇相关文献,中文文献均为全文,大部分外文文献为全文,其他为摘要。入选关于Bcl-2蛋白家族、p53基因与凋亡的关系及机制,细胞凋亡基因调控的相关文献32篇。资料综合:①Bcl-2蛋白家族是细胞凋亡相关基因研究得最多的一类蛋白质。包含抑制和促进细胞凋亡两类功能相反的蛋白质。Bcl-2蛋白家族及其家族成员共同构成一个异常复杂的相互作用网络,调控细胞凋亡。其调节细胞凋亡的机制可能于Bcl-2蛋白家族与线粒体、Bcl-2蛋白的相互作用、细胞内Ca2 ;及氧自由基有关。②p53基因对防止细胞增生和保持DNA受损基因组的完整性有重要作用。p53调控细胞凋亡包括对外源性凋亡途径的调节和内源性凋亡途径的调控,p53基因究竟通过什么样的途径调控细胞凋亡?不同的实验因为不同的遗传学背景和微环境而不同。③目前主要有3种实验方法来研究p53基因对细胞凋亡的调控作用:第1种方法是通过识别p53激活的基因组的DNA断片,或者是启动所包含的依赖p53激活的因子。第2种方法是系统地识别受p53基因分别调控的基因组(或DNA组)。第3种方法是识别受p53调控的基本凋亡因子。结论:大量的凋亡因子是依赖p53激活调节细胞凋亡的,细胞凋亡中Bcl-2蛋白家族、p53基因的调控机制的分析,充分发挥细胞凋亡对机体有利的方面,对治疗各种癌症和心血管疾病具有广阔的应用前景。 相似文献
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血管紧张素原基因M235T多态性与肥厚型心肌病及高血压性心肌肥厚的关系 总被引:5,自引:0,他引:5
血管紧张素原 (AGT)基因的多态性与心血管疾病的关系日益引起重视。在中国人群中 ,高血压性心肌肥厚 (HCH)和肥厚型心肌病 (HCM)在AGT基因多态性方面有何异同的研究尚少 ,本研究旨在探讨AGT基因M2 35T多态性与HCM及HCH的关系。1.资料与方法 :( 1)研究对象 :HCM组 ,40例 ,汉族 ,男2 2例、女 18例 ,平均年龄 ( 5 3 4± 19 8)岁 ,诊断符合临床和超声心动图标准 ,除外家族性遗传及高血压病、瓣膜病、先天心脏病等所致心肌肥厚 ;HCH组 ,5 0例 ,汉族 ,男 2 8例、女2 2例 ,平均年龄 ( 6 0 8± 14 5 )岁 ,高血压诊断标准符合 1978年WH… 相似文献