抗中性粒细胞胞浆抗体荧光核型与靶抗原不符的特殊情况分析

目的分析血清中胞质型抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)和核周型抗中性粒细胞胞浆抗体(pANCA)荧光模型与靶抗原不相符的情况,探讨其临床意义。方法用间接免疫荧光法(IIF)检测抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)荧光模型cANCA、pANCA,用ELISA法检测靶抗原髓过氧化物酶(MPO)、蛋白酶3(PR3)。将pANCA合并MPO阳性、cANCA合并PR3阳性以外ANCA荧光模型以及靶抗原同时有阳性的其他特殊情况定义为ANCA荧光模型与靶抗原不相符,分析2017年4月至2019年4月北京协和医院ANCA荧光模型与靶抗原不相符患者的临床资料。结果 pANCA合并PR3阳性的患者组中,年龄(44.20±17.25)岁,诊断为溃疡性结肠炎(UC)的占56.8%,ANCA相关性血管炎占15.2%,其中诊断为UC与非UC的患者的年龄分布差异有统计学意义(χ~2=13.42,P=0.001)。pANCA合并MPO、PR3阳性的患者组中,年龄(58.20±14.05)岁,诊断为ANCA相关性血管炎的最多,占48.3%。cANCA合并MPO阳性患者组中,年龄(56.06±20.39)岁,诊断为ANCA相关性血管炎的占61.8%,间质性肺炎以及甲状腺亢进各占8.8%。结论 pANCA、PR3阳性可作为UC的敏感性指标,pANCA、MPO、PR3阳性及cANCA、MPO阳性也可作为ANCA相关性血管炎的指标。     

2013年全国175家临床实验室检测抗中性粒细胞胞浆抗体的比对分析

目的通过全国多中心实验室自身抗体检测比对活动,了解国内抗中性粒细胞胞浆抗体的检测水平现状,以提高检测质量。方法由卫生公益性行业科研专项“风湿免疫病诊疗关键技术临床推广及转化应用研究”项目组(以下称“项目组”)制备自身抗体比对样品(液体血清),向全国175家自愿报名参加抗中性粒细胞胞浆抗体检测的实验室发放比对品。比对品包含抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性或阴性、抗髓过氧化物酶(MPO)抗体阳性或抗蛋白酶3(PR3)抗体阳性,共计1组5支血清。由项目组统一寄送至各实验室。要求各实验室在规定时间内完成检测,并将结果上传至项目组。采用Excel软件对检测结果进行统计分析。结果参加ANCA,抗MPO抗体及抗PR3抗体检测比对工作的实验室数目分别为134家,148家和148家。ANCA,抗MPO抗体及抗PR3抗体比对品检测结果阳性符合率分别为90.8%,98.0%和98.0%,阴性符合率分别为94.4%,96.1%和98.8%。间接免疫荧光法为国内实验室检测ANCA的主要方法,但回报的结果符合率参差不齐,荧光模型回报率尚不理想,仅为77.9%。结论2013年全国实验室检测ANCA比对品的阳性符合率尚不理想,且应用IIF法检测ANCA时荧光模型回报率不高。抗MPO抗体及抗PR3抗体比对结果较为满意。ANCA检测质量仍有待提高。     

2013年全国229家实验室抗核抗体谱结果比对分析

目的调查全国抗核抗体谱(ANAs)的检测现状,以改进和提高其检测水平与质量。方法由卫生公益性行业科研专项"风湿免疫病诊疗关键技术临床推广及转化应用研究"项目组向全国229家自愿报名参加ANAs检测的实验室发放比对品。比对品可检测抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(ds DNA)抗体、抗可提取性核抗原(ENA)抗体,共计一组5支血清。由项目组统一寄送至各实验室。各实验室在规定日期内使用常规方法检测,并将结果上传至项目组比对网站。采用Excel软件对检测结果进行统计及描述性评价。结果参加ANA、抗ds DNA抗体及抗ENA抗体检测的实验室数目分别为217家、219家和223家。ANA、抗ds DNA抗体检测定性结果阳性符合率分别为98.9%和89.5%,阴性符合率分别为97.2%和98.8%。间接免疫荧光法(IIF)是检测ANA的主要方法,核型回报正确率高于89.5%,滴度回报结果在可接收范围内的正确率高于81.8%。抗ds DNA抗体应用免疫印迹法检测结果阴性符合率高于96%,但阳性符合率仅为76%,明显低于IIF法95.4%及ELISA法97.9%。抗ENA抗体检测结果阳性符合率高于94%。结论 2013年全国参与ANAs质评实验室的数量较以往明显增加。比对品的定性结果符合率理想,核型符合率较为理想,滴度和定量结果符合率有待提高。     

EBF1基因多态性与中国汉族人群原发性干燥综合征的相关性

摘要:目的：探讨早期B细胞因子1（EBF1）基因rs3843489单核苷酸多态性（SNP）与中国汉族人群原发性干燥综合征（pSS）的相关性。 方法：用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术对533例pSS患者和该563例健康人EBF1基因的rs3843489位点分型,用ELISA法检测抗SSA、SSB 抗体,同时结合高球蛋白血症的临床资料,分析位点与疾病及其血清学检测指标和临床表型的相关性。 结果：EBF1基因rs3843489位点的等位基因、基因型频率在pSS组与健康对照组间差异无统计学意义(χ²=1.16,1.29,P均＞0.05);在3个遗传模型中,位点在两组间差异仍无统计学意义(χ²=1.20,0.15,0.01,P均＞0.05);rs3843489位点在两组患者抗SSA、SSB抗体和高球蛋白血症中的分布差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论: EBF1基因rs3843489位点多态性可能与中国汉族人群pSS的易感性不相关。     

自身免疫疾病血清中4种细胞因子检测的临床应用初探

目的本研究旨在系统评价细胞因子在成人斯蒂尔病(AOSD)、大动脉炎(TA)等自身免疫疾病(AID)中的临床应用价值。本研究为一项回顾性的病例对照研究。方法调取北京协和医院检验科2019年1月至2022年8月的834例AID患者常规项目肿瘤坏死因子-α(TNF-α), 白介素6(IL-6), IL-8、IL-10检测数据, 同时检测30名健康对照(HC)血清中细胞因子4项水平。同时将AOSD、TA、系统性红斑狼疮(SLE)、白塞综合征(BS)疾病分为活动亚组和非活动亚组。另对SLE的两个重要的器官受累(肾脏、神经系统)进行亚组分析。统计分析使用GraphPad Prism 9和R 4.2.2软件。组间差异比较使用非参数检验(Kruskal-WallisH检验, Mann-WhitneyU检验), 并使用Dunn法来校正多重检验可能带来的假阳性。结果比较IL-6在各组中的水平, 除了BS组和抗磷脂综合征(APS)组, 其余各个AID组和HC组相比, AID组血清IL-6水平均高于HC组[3.85(2.00, 8.55)pg/ml], 其中 ANCA相关血管炎(AAV)组[3.85(2.00...     

HLA-DPB1及PRTN3基因和ANCA相关性小血管炎的相关性分析

背景 ANCA相关性小血管炎（ANCA-associated vasculitides,AAV）包括肉芽肿性多血管炎（granulomatosis withpolyangiitis,GPA）、显微镜下多血管炎（microscopic polyangitis,MPA）和嗜酸细胞性肉芽肿性多血管炎（eosinophilicgranulomatosis with polyangitis,EGPA）.前期的AAV易感基因研究主要着眼于白种人,鉴于人群异质性及种族差异的存在,故而本研究着眼于探究HLA-DPB1、PRTN3及CD226基因与中国北方汉族人群AAV的相关性.方法 使用Sequenom MassArray质谱阵列技术（Sequenom iPLEX assay,San Diego,CA）对待检者进行基因分型.本研究共纳入了196例AAV患者（GPA 100例,MPA 76例,EGPA 20例）和485名健康对照者.结果 GPA组与健康对照组比较,Rs3117242（HLA-DPB1）的T等位基因频率显著上升（68.0％ vs.50.4％）,差异有统计意义（OR=2.09,95％ CI：1.51～2.88,Pc ＜0.001）,但MPA组、EGPA组与健康对照组比较,差异均无统计学意义（Pc =0.09,Pc =0.94）.针对Rs3117242（HLA-DPB1）位点的基因型频率进行分析,其结果与等位基因频率分析结果类似.与健康对照组比较,无论是AAV组或GPA组或PA组或EGPA组,其他基因的SNP位点的等位基因频率或是基因型频率分布的差异均无统计学意义（Pc＞0.05）.结论 Rs3117242（HLA-DPB1）是中国北方汉族人群GPA的易感位点.这一研究为深入探讨GPA的发病机制提供了新的线索.     

参加美国病理家学会抗磷脂抗体能力验证活动效果分析

目的汇总分析北京协和医院风湿免疫科实验室和全世界参加美国病理家学会(College of American Pathologists,CAP)抗磷脂抗体(antiphospholipid antibodies, aPLs)项目的能力验证(proficiency testing,PT)活动8年的效果,以不断提高监控实验室检测aPLs项目的能力和质量。 方法采用回顾性分析研究。北京协和医院风湿免疫科实验室自2009年1月至2016年12月,每年以邮件方式接收2批,每批3份检测样本,在10 d内采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immununosorbent assay, ELISA)完成抗心磷脂抗体(anticardiolipin,aCL)、抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2- glycoprotein 1,aβ2GP1)检测,并将结果回报CAP。 结果本实验室自2009年1月起至2016年12月止,参加CAP的aPLs项目PT活动16次,共96个检测结果,所有结果均为可接受,总PT成绩为100%。8年期间,全世界参加CAP的aPLs项目PT活动的实验室数量逐年增加,2009年第1次PT与2016年第2次PT相比,参加aCL-IgG PT活动的实验室数量增长了24.55%,参加aCL-IgM PT活动的实验室数量增长了24.53%,参加aCL-IgA PT活动的实验室数量增长了20.13%,参加aβ2GP1-IgG PT活动的实验室数量增长了179.73%,参加aβ2GP1-IgM PT活动的实验室数量增长了197.01%,参加aβ2GP1-IgA PT活动的实验室数量增长了151.16%。检测方法逐渐由单一的ELISA变为多种方法学,包括ELISA法、化学发光法、荧光酶免疫分析法和液态芯片技术。全世界的回报结果显示,高滴度阳性和阴性样本检测结果的一致性较好,均高于90%,而低、中等滴度阳性样本检测结果的一致性较差。 结论本实验室的aPLs项目检测结果达到了CAP的能力验证质量要求。全世界越来越多的实验室重视参与aPLs项目的室间质量评价活动,但弱阳性、中等强度阳性的aPLs样本的检测质量仍有待提高。     

间接免疫荧光试验检测抗核抗体的前带效应分析

目的探讨间接免疫荧光试验(IIFA)检测抗核抗体(ANA)中的前带效应对ANA荧光滴度的影响。方法将880例血清样本以1∶100稀释进行手工检测,筛选ANA荧光滴度≥1∶1 000的样本分别以1∶100、1∶1 000、1∶10 000稀释检测,统计有前带效应(1∶1 000稀释比1∶100稀释荧光亮)的样本数;将前带效应的样本采用欧蒙Sprinter XL全自动荧光加样仪和EUROPattern全自动荧光分析仪检测ANA(1∶100稀释),与手工法检测ANA(1∶100稀释)进行比较,检测前带效应样本的特异性自身抗体,分析其荧光模型、荧光滴度及阳性特异性自身抗体的分布特点。结果有明显前带效应的样本数为34例,占总样本数的3.86%,占高滴度(≥1∶1 000)ANA样本数的29.57%。通过手工法检测或通过Sprinter XL全自动荧光加样仪检测均发现前带效应,其荧光模型及荧光滴度相似,值得注意的是,EUROPattern只能选取图片中间区域判读。在有前带效应的血清样本中,以荧光滴度≥1∶10 000最常见(74.42%)。在荧光模型方面,以斑点型最为多见(46.51%)。在特异性自身抗体的分布方面,以抗核糖核蛋白(RNP)抗体最多见(62.79%),其次为抗双链DNA抗体(51.16%)和抗SSA抗体(51.16%)。结论 IIFA检测高滴度ANA样本在低稀释度时容易产生前带效应,从而导致错误的ANA荧光滴度判断,临床检验实验室应引起重视。     

ETS1基因多态性与原发性干燥综合征的相关性

目的 探讨ETS1基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）与汉族人群原发性干燥综合征（primary sjōgren＇s syndrome,pSS）遗传易感性是否相关.方法 提取261例pSS患者和597例健康对照者的全基因组DNA.使用Sequenom MassArray方法对ETS1基因上2个SNP位点（rs6590330和rs1128334）进行基因分型.分型结果使用PLINK 1.07软件进行统计分析.结果 rs6590330位点G/G、G/A、A/A基因型频率和G、A等位基因频率分布在pSS组和对照组间差异无统计学意义（均P〉0.05）.加性模型、显性模型、隐性模型下的分析显示,两组间差异仍无统计学意义（均P〉0.05）.将pSS患者按照性别及抗SSA和抗SSB抗体产生情况分组,分析仍未发现任何相关性.rs1128334分型成功率过低无法分析.结论 ETS1基因的SNP位点rs6590330与汉族人群pSS患者遗传易感性不相关.