基于生物信息学分析的卵巢癌微小RNA调控网络的初步构建

目的在生物信息学分析基础上初步构建卵巢癌微小RNA(miRNA)及长链非编码RNA(lncRNA)调控网络,探讨miRNA在卵巢癌细胞中的分子调控机制。方法通过miRwalk 2.0及HMDD v2.0精准查询与卵巢癌相关且功能明确的miRNA,根据miRwalk 2.0软件出现频次进行筛选,明确其对应靶基因表达情况。在lncRNA疾病数据库中查询与卵巢癌相关的lncRNA,运用starBase v2.0对所得到的miRNA和lncRNA进行综合分析,筛选出与上述miRNA相互作用的且与卵巢癌相关的lncRNA。通过Cytoscape软件绘制miRNA在卵巢癌中的分子调控网络。结果 hsa-let-7a、hsa-mir-21、hsa-miR-16、hsa-mir-17、hsa-mir-19b、hsa-mir-29a、hsa-mir-92a是介导卵巢癌调控的高频miRNA,成功获取了有关miRNA在卵巢癌中的分子调控网络;初步明确了高频miRNA。lncRNA与miRNA匹配分析发现,lncRNA X(染色体)失活特异性转录物(XIST)作为核心调控因子与高频miRNA相互作用介导卵巢癌基因调控。结论利用生物信息学分析技术成功描绘了一张与卵巢癌相关的miRNA分子调控网络,miRwalk、HMDD、starBase等数据库可有效地用于miRNA与疾病关系的研究。     

血清中微量奎尼丁的固相萃取及荧光分析

用固相萃取-荧光分析法测定了血清中奎尼丁含量，其线性回归方程式为：F=67.57c-3.78，相关系数r=0.9970，还研究了不同实验条件对奎尼丁的固相萃取{SPE}影响。所用方法简便快速，自动化程度高，适用于血清样品分析。     

金属β-内酰胺酶(IMP-1)的表达,纯化和鉴定

目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响.方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到IMP-1的精提物,对纯化产物用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS进行鉴定,同时用Nitrocefin作底物,测定纯化的金属β-内酰胺酶IMP-1的活性.结果:纯化的IMP-1具有较高的活性,能水解大多数抗生素.其米氏常数Km=9.28μmol/L;用MALDI-TOF-MS法测得的分子量为Mr=25111.9.结论:本文建立了金属β-内酰胺酶IMP-1的表达、纯化、鉴定方法,该法可用于其它的金属β-内酰胺酶的表达和纯化.     

反相高效液相色谱法同时测定肝癌相关酪氨酸、缬氨酸对映体

目的：建立柱前衍生反向高效液相色谱荧光检测法同时对肝癌相关L-酪氨酸（L-tyrosine,L-Tyr）、D-酪氨酸（D-tyro－sine,D-Tyr）、L-缬氨酸（L-valine,L-Val）、D-缬氨酸（D-valine,D-Val）进行拆分测定。比较正常人与原发性肝细胞癌（hepato－cellular carcinoma,HCC）（以下简称原发性肝癌）患者血浆中酪氨酸与缬氨酸对映体含量的变化,考察它们与原发性肝癌的关系。方法：柱前衍生化试剂：邻苯二甲醛（O-phthaldialdehyde,OPA）和N-乙酰-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）;色谱柱：菲罗门Gemini C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：20.0 mmol/L 磷酸二氢钠（pH 6.8）-乙腈为流动相的梯度洗脱;荧光检测波长设定：激发波长（λex）为350 nm,发射波长（λem）为450 nm;流速1 ml/min;柱温30 ℃;进样量10 μl。结果：４种物质的回收率在90.74%~106.80%之间,线性关系良好,检出限分别为6.79 pg/ml（L-Tyr）,7.81 pg/ml（D-Tyr）,1.86 pg/ml（L-Val）,1.95 pg/ml（D-Val）。利用该方法,对20名健康志愿者和23名HCC患者的血浆进行测定,统计分析结果表明,L-Tyr明显升高（P=0.011）,L-Val（P=0.019）、D-Val（P=0.006）显著性降低,D-Tyr（P=0.973）无明显变化。结论：该方法准确、灵敏、重复性好,适用于实验室研究与临床检测。     

血液中痕量乙醇代谢物:乙基葡萄糖醛酸苷的气相色谱质谱法测定

目的 建立气相色谱质谱( GC - MS)检测人体血液中乙醇代谢产物乙基葡萄糖醛酸苷(EtG)的方法.方法 1ml乙二胺四乙酸二钠( EDTA - Na2)抗凝全血离心后取上层血浆,采用高氯酸去蛋白,并经氨基固相萃取小柱富集净化,提取物经BSTFA +TMCS(99∶1,v/v)衍生化,采用气相色谱-质谱法检测,总离子和选择离子模式(SIM)同时扫描,内标法定量分析.结果 样品在0.2～4.0 mg/L范围内线性关系良好(0.998 8),检出限为0.17 mg/L,绝对回收率位于75.3％～85.6％之间,相对标准偏差(RSD)为5.6％ ～7.6％.结论 该方法灵敏度高,特异性好,分析结果准确可靠,适用于法医学鉴定和临床检验中EtG的分析测定.     

伏安法测定血清镁、尿镁的研究

本研究了Mg(Ⅱ）--铬黑T配合物的乙二胺-氢氧化钾体系中测定血清Mg(Ⅱ），发现在-0.70V(vs.SCE)处有一灵敏的配位吸附波产生，此波波高与Mg(Ⅱ）浓度呈良好线性关系。用此法测定了血清、尿中Mg(Ⅱ)，且与原子吸收分光光度法对照，二结果较为接近。     

分析化学实验改革探讨

介绍了我系分析化学实验教学现状及存在问题,结合教学对分析化学实验改革进行了探讨,包括通过教学内容的优化,教学方法、成绩评定方法的改革.     

分析化学课程双语教学的探索

分析化学是医学检验本科学生必修的专业基础课,本文结合双语教学的实践经验,探讨了在医学检验本科分析化学课程双语教学中存在的主要问题,并从教材建设、师资培养和课程教学质量控制等方面提出了相应的建议。     

气相色谱-质谱法测定硫化氢中毒血液中的硫化物

【摘　要】目的：建立气相色谱-质谱（Gas chromatograph-mass spectrometry,GC/MS）法检测硫化氢中毒血液中硫化物的方法并用于实际检案分析。方法：血样本中加入苯扎氯铵与四硼酸钠混合溶液,在碱性条件下中毒血液中多种形态的硫化物转化成硫离子,用五氟溴卞（Pentafluorobenzyl bromide,PFBBr）衍生化,1,3,5-三溴苯（1,3,5-tribromobenzene,TBB）作为内标,通过液-液萃取法提取衍生物五氟苄基硫醚（Bis-pentaflu-orobenzyl-disulfide,BPFBD）,采用GC/MS仪检测,选择离子检测扫描（Select－ed ion monitoring,SIM）模式,内标法定量分析。结果：在硫化钠浓度为0.05~10.0 μmol/ml范围的血样本中检测信号与硫化钠浓度有良好线性关系,相关系数为0.997 2,最低检出限为0.007 2 μmol/ml。结论：本文建立的方法灵敏度高,特异性好,简便省时,分析结果准确可靠,适用于法医鉴定和临床检验血液中硫化氢的快速分析。     

研究生《蛋白质组学》样品制备与分离的教学探索

样品制备与分离是蛋白质组学研究中非常关键和复杂的过程。为了提高医学研究生《蛋白质组学》教学中样品制备与分离的课堂教学质量,使其能够更好地掌握样品制备与分离的原则、技术和策略,达到培养和提高其科研能力的目的,根据学校和学生的实际情况,进行教学探索。