臭茉莉叶总黄酮提取工艺优化及月周期变化研究

目的:采用超声辅助正交试验法优化臭茉莉叶总黄酮的提取工艺,并进一步研究臭茉莉叶中总黄酮1年内每月含量变化趋势,探讨臭茉莉叶最佳采收时间。方法:以提取液中总黄酮含量为指标,选择乙醇浓度(%)、超声时间(min)、料液比、提取温度(℃)等为考察因素,采用正交试验法L9(34)确定臭茉莉叶提取液中总黄酮的最优工艺。结果:臭茉莉叶所含总黄酮最优提取工艺条件:乙醇浓度70%、超声时间60min、料液比1∶25、提取温度50℃。3月份总黄酮/药材量是0.0235mg·g-1为最高。结论:该提取工艺快捷以及操作简便,适用于臭茉莉叶总黄酮的提取。结合总黄酮月周期变化规律,可以确定1年中5月份和7月份为最佳采摘期。     

筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β诱导的兔软骨细胞凋亡的保护作用

目的 观察筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的兔软骨细胞Bcl-2、Bax表达及细胞凋亡的影响,探讨筋骨痹痛汤治疗骨性关节炎的机制。
方法 随机取雄性成年新西兰兔8只分成4组,分别灌服生理盐水、补肝肾中药（骨碎补、续断和淫羊霍）、独活寄生汤和筋骨痹痛汤,制得空白血清和药物血清。分离制备幼兔软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定软骨细胞。取第3代软骨细胞,随机分5组实验：空白组（A组）、模型组（B组）、补肝肾中药对照组（C组）、独活寄生汤对照组（D组）、筋骨痹痛汤组（E组）。A组用含10%空白血清的DMEM培养36h,其余各组均先采用含IL-1β的DMEM诱导培养12h,然后B、C、D、E组分别给予含10%空白血清、10%补肝肾中药药物血清、10%独活寄生汤药物血清、10%筋骨痹痛汤药物血清的DMEM培养24h。实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR)和免疫印迹法检测兔软骨细胞Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡比例。结果 经鉴定分离制备的细胞为软骨细胞。软骨细胞培养24h后,C、D、E组Bcl-2 mRNA和蛋白表达高于B组,D、E组高于C组,E组高于D组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;Bax mRNA和蛋白表达,以及软骨细胞凋亡率,C、D、E组低于B组,D、E组低于C组,E组低于D组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 筋骨痹痛汤药物血清对IL-1β诱导的兔软骨细胞凋亡具有明显保护作用,其机制可能是通过促进Bcl-2表达和抑制Bax表达,调节Bcl-2与Bax的比例来实现。     

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠促进低温保存的大鼠坐骨神经同种异体移植后神经再生

探讨丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(tanshinoneⅡ_Asulfonate)对深低温保存大鼠坐骨神经活性以及同种异体移植后神经再生、功能恢复的保护作用及其可能的作用机制。将SPF级标准雄性SD大鼠坐骨神经片段15 mm,分别在含有不同浓度丹参酮Ⅱ_A磺酸钠(A 0 mg·L~(-1),B 80 mg·L~(-1),C 160 mg·L~(-1),D 480 mg·L~(-1))中低温(-80℃)保存24周,另设有新鲜对照组,通过电镜观察保存后神经超微结构,calcein-AM/PI荧光染色激光共聚焦显微镜观察活细胞、死细胞数量,Western blot法检测Bax,Bcl-2的蛋白表达变化;冻存后神经体外培养7 d,PCR,Western blot法检测NGF,GDNF的mRNA以及蛋白表达水平。用保存24周的SD大鼠坐骨神经,修复对应的Wistar雄性大鼠坐骨神经10 mm缺损(A',B',C',D'组),术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位潜伏期和神经传导速度,甲苯胺蓝染色分析再生有髓神经纤维数目和髓鞘厚度,电镜观察再生神经超微结构。结果显示,大鼠坐骨神经保存24周,与A,B组相比,C,D组脱髓鞘、空泡化程度较弱,活细胞数量较多,Bax表达降低,Bcl-2表达升高;与此同时,保存24周后的坐骨神经NGF,GDNF mRNA及蛋白表达,C,D组均显著高于A,B组。同种异体移植16周后,与A',B'组相比,C',D'组再生有髓神经纤维数量较多,分布广泛、髓鞘较厚,肌肉复合动作电位潜伏期缩短,神经传导速度升高。这表明丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对-80℃长期保存的大鼠坐骨神经具有保护作用,能维持保存后神经的生物活性,促进同种异体移植后受体神经再生,其中以中、高浓度(C,D组)效果更好。     

无创呼吸机正压通气治疗呼吸衰竭50例临床观察

目的观察无创呼吸机面／鼻罩正压通气治疗急性呼吸衰竭的临床疗效。方法50例急性呼吸衰竭患者随机分为元创呼吸机正压通气治疗25例（通气组），常规药物治疗25例（常规组）。通气组在常规药物抗呼吸衰竭治疗基础上联用无创呼吸机面／鼻罩正压通气治疗；常规组仅用常规药物（氨茶碱、酚妥拉明、抗生素、强心、利尿）等治疗。结果总有效率通气组为80％，常规组为52％（P〈0．05）。通气组无创通气后PaO：、SaO：均明显升高，PaCO2明显降低，pH明显改善，与常规组治疗后比较，均差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论无创呼吸机正压通气治疗低氧血症起效迅速，疗效确切，对改善CO：潴留有一定疗效。     

我院不同雾化吸入方案治疗支气管哮喘急性发作的疗效比较

目的通过比较我院不同雾化吸入方案治疗支气管哮喘急性发作的疗效,为制定哮喘发作时治疗的最佳方案提供指导意见。方法收集2007年6月-2010年6月符合诊断标准的支气管哮喘急性发作患者162例,随机分为A、B、C3组,各组存基础治疗上＋氧驱雾化（生理盐水5ml＋药物）,A组药物为布地奈德（普米克令舒）2mg＋沙丁胺醇5mg＋沐舒坦15mg;B组药物为地塞米松10mg＋沙丁胺醇5mg＋α-糜蛋白酶4万u;C组药物为布地奈德2mg＋特布他林5mg＋沐舒坦15mg。结果A组显效33例,有效16例,好转3例,无效2例,总有效率为90．7％;B组显效29例,有效19例,好转4例,无效2例,总有效率为88．9％;C组显效34例,有效16例,好转3例,无效1例,总有效率为92．6％,比较差异无显著性（P〉0．05）。三组患者治疗后哮喘均缓解,肺内哮喘鸣音消失。A组哮喘显著缓解时间（2．65±1．1）天,肺内哮鸣音基本消失时间（3．2±1．3）天;B组哮喘显著缓解时间（3．1±1．6）天,肺内哮呜音基本消失时间（3．7±1．7）天;C组哮喘显著缓解时间（2．2±0．9）天,肺内哮鸣音基本消失时间（2．9±1．1）天,三组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论3种用药方案在治疗过程中均取得了较好的临床效果,在今后的治疗过程中可根据患者的禁忌症选择不同的治疗方案,选择合适的药物配合,充分利用各种药物的特点,避开它们的缺陷,以发挥最大的临床疗效。     

内毒素预处理激活大鼠急性脊髓损伤Nrf2蛋白抑制Caspase-3的表达

目的 研究大鼠急性脊髓损伤及经内毒素预处理后损伤脊髓中转录因子Nrf2及凋亡蛋白Caaspase-3的表达.方法SD大鼠132只,随机数字表法分为假手术组、模型组和LPS预处理组.采用改良Allen's打击法制作SD大鼠急性脊髓损伤(acute spinal cord injury,ASCI)模型,在术后1、3、5、7...     

雷公藤抗排斥反应的分子机制

雷公藤主要用于治疗风湿与类风湿,有祛风湿、活血通络及消肿止痛等作用.现代研究发现,雷公藤的多种提取物具有抗排斥反应作用,可延长异体移植器官的存活时间,抑制受者淋巴细胞浸润,促使浸润的细胞凋亡,防止急性移植物抗宿主病(GVHD)的发生.     

经雷公藤预处理大鼠异体神经移植后早期组织形态及免疫学观察

目的 观察经雷公藤预处理大鼠异体神经移植后髓鞘损伤程度及急性期免疫排斥反应,探讨雷公藤早期免疫抑制作用及合适用药浓度. 方法取60只3月龄雄性SD大鼠制备右侧坐骨神经干缺损模型,随机分为A、B、C、D、E组5组(n=12).取18只3月龄雄性Wistar大鼠,切取双侧坐骨神经干约15 mm,置入含200、400、800 mg/L雷公藤多甙细胞保存液(各浓度组浸泡12条神经),4℃下浸泡24 h,作为A、B、C组神经修复供体,修复神经缺损;另取6只3月龄Wistar大鼠,切取12条新鲜坐骨神经桥接于D组神经缺损处;E组将切下的自体坐骨神经立即行原位缝合.术后不同时间对移植神经行大体、光镜、电镜观察,检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)含量变化及免疫组织化学分析移植物CD4 、CD8 T细胞入侵情况. 结果 术后1周,A、B、C组神经纤维形态及结构较完整,炎性细胞浸润程度较D组轻;术后1、2、4周,A、B、C组组织形态学观察结果 相似,移植神经片段外形及结构清晰,与周围结缔组织粘连均较D组轻;术后48h及1、2、4周,各组均有不同程度髓鞘损伤,各时间点坐骨神经MBP含量B组最接近E组,两组差异无统计学意义(P＞0.05).术后1、4周,A、B、C组CD4 ,CD8 分子的IA值与D组比较,差异均有统计学意义(p＜0.05). 结论 雷公藤能有效降低异体神经移植术后早期急性排斥反应,对髓鞘发挥一定的保护作用.     

雷公藤促细胞凋亡的分子机理概述

雷公藤或其提取物对排斥反应、肿瘤及自身免疫性疾病有较好的治疗作用,能使免疫细胞、肿瘤细胞等多种细胞凋亡。雷公藤或其提取物能通过不同的途径级联激活切冬酶家庭成员,增强促凋亡相关分子表达,同时抑制抗凋亡有关分子表达,启动细胞的凋亡程序,从而发挥抗肿瘤、抗排斥反应的作用。     

电针对膝骨性关节炎家兔模型白介素-1β和肿瘤坏死因子-α的影响

目的:观察电针对膝骨性关节炎家兔模型关节冲洗液中细胞因子白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:将新西兰大白兔40只随机分为空白对照组(A组)、模型对照组(B组)、按摩组(C组)、电针治疗组(D组)。除A组外,将其余3组大白兔左膝关节伸直位石膏固定7周制成骨性关节炎动物模型。造模成功后,A组和B组正常饲养,不处理;C组给予推拿按摩加功能训练;D组取左后肢“内膝眼、外膝眼、阳陵泉、血海、足三里和梁丘”6个穴位电针治疗,电压6V,疏密波形,频率1.6-2Hz,输出强度1-3mA,每天1次,每次电针30min,连续治疗21d。处理前、后分别取各组家兔关节冲洗液,采用放射免疫分析法,测定其中IL-1β和TNF-α的含量。结果:经治疗后,C、D组关节液中IL-1β和TNF-α含量与B组比较明显降低,有显著性差异(P<0.05);C、D组治疗前后自身比较亦有显著性差异(P<0.05)。结论:电针治疗能降低膝骨性关节炎家兔关节液中细胞因子IL-1β和TNF-α的含量,从而发挥对膝骨性关节炎的防治作用。