特殊部位与特殊类型穿支皮瓣基础研究

随着穿支皮瓣基础研究的不断深入和显微外科技术的逐渐成熟,穿支皮瓣在临床上的运用越来越广泛,实现了以最小的供区损害获得最佳的受区外形与功能,代表目前皮瓣外科的最新进展,是皮瓣外科发展史上又一次飞跃。然而,对一些特殊部位的创面,如何针对每个患者进行“个性化”皮瓣选择,设计特殊类型皮瓣进行修复,仍有待进一步深入研究。本期专题中的几篇基础研究,集中介绍了几个特殊部位、特殊类型的穿支皮瓣。     

嵌合穿支皮瓣的发展与现状

<正>随着显微外科技术的不断发展和成熟,穿支皮瓣在临床上的运用越来越广泛,效果愈加显著,在软组织缺损修复领域的王者地位毋庸置疑~([1-2])。当创伤、感染、肿瘤切除等因素造成伴有肌(腱)及骨等复合组织缺损时,以单一组织结构的穿支皮瓣进行修复难以为继,采用逐渐成熟的嵌合穿支皮瓣技术具有较大的优势。Hallock~([3])和Koshima~([4])为代表的学者对此类皮瓣进行了许多研究并转化临床。为全面了解嵌合穿支皮     

免疫印迹法测定Tp47蛋白与梅毒患者血清的免疫反应性

目的克隆Tp47基因、构建原核表达载体、表达并纯化Tp47蛋白,通过免疫印迹法(Western-Blot)检测其免疫反应活性。方法聚合酶链反应扩增Tp47基因,将Tp47克隆至pGEX-6P-1载体,构建重组表达质粒pGEX-6P1-Tp47,经测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经诱导表达后,用亲和层析方法纯化重组蛋白,鉴定正确后采用Western-Blot检测重组蛋白与梅毒阴性、阳性血清的免疫反应性。结果成功构建pGEX-6P1-Tp47原核表达质粒,表达、纯化后获得了相对分子质量约为71×103的重组蛋白;Western-Blot检测显示其能与梅毒阳性患者血清发生特异性反应,而与梅毒阴性患者血清无交叉反应性。结论成功克隆、表达、纯化Tp47重组蛋白,其与临床各期梅毒患者血清具有较好的免疫反应性,为Tp47重组蛋白用于梅毒早期诊断提供了理论依据。     

反复铜绿假单胞菌感染诱导大鼠慢性阻塞性肺疾病模型探讨

目的 探讨反复铜绿假单胞菌(PA)感染能否诱导大鼠产生慢性阻塞性肺疾病(COPD)的病理生理及病理学改变.方法 将120只Wistar大鼠随机分为铜绿假单胞菌感染组(PA组)和对照组(NS组).PA组通过气管穿刺,多次注入一定剂量铜绿假单胞菌菌液,建立大鼠慢性肺部感染模型,测定大鼠动脉血气,观察肺组织病理改变,测量气管壁厚度和血管壁厚度.结果 自感染第4周开始,PA组大鼠体重较NS组显著减轻(p＜0.05);自第12周开始,PA组大鼠血气PaO2显著低于NS组(0.01 ＜P ＜0.05),而PaCO2明显升高(0.01＜P＜0.05);从第2周开始,PA组大鼠气管壁厚度显著大于NS组(P＜0.05);从第4周开始,PA组大鼠血管壁厚度显著大于NS组(P＜0.05);至第16周,PA组大鼠各级支气管慢性炎症明显,管壁增厚,管腔明显狭窄,有气道重构和肺气肿形成.结论 反复气道感染铜绿假单胞菌可致大鼠产生COPD的病理生理及病理学改变,具有COPD的主要特征,提示该方法可能为COPD大鼠模型的建立提供一条新的途径.     

颈椎前路减压手术解剖标志定位测量及其临床意义

目的　为颈椎前路减压手术在有限显露术野中达到安全、有效减压提供更科学的减压标志。 方法　在15具成人尸体标本上,解剖观测C3~7节段相关解剖数据,以所测量的数据为基础,计算：(1)椎体钩前脚至颈长肌内侧缘的距离/颈长肌内侧缘至正中矢状面的距离(AULD/MLPD); (2)椎体钩前脚至横突孔内侧缘的距离/椎体钩前脚至颈长肌内侧缘的距离(AUTD/AULD); (3)椎体钩前脚至硬膜囊外侧缘的垂直距离/椎体钩后脚至硬膜囊外侧缘的距离(AUDD/PUDD)和(4)椎体钩与神经根最近点和椎体钩前脚的垂直距离/椎体钩前后脚的垂直距离(UNAD/APUD)。 结果　AULD/MLPD在C3的平均值为0.83,在C4的平均值为0.55,在C5的平均值为0.20,在C6的平均值为0.34,在C7的平均值为0.27;AUTD/AULD的平均值为2.71;AUDD/PUDD的平均值为0.28;UNAD/APUD的平均值为0.34。 结论　椎体钩前脚是颈椎体前部恒定的解剖标志,可作为颈椎前路手术的稳定、可靠的骨性减压标志,依据AUDD/PUDD、UNAD/APUD和AUTD/AULD的比值,有助于术中判断硬膜囊、颈神经根和椎动脉的位置。     

带皮穿支血管上臂内侧皮神经营养血管皮瓣的应用

Objective To report the application of medial neurocutaneous flap with perforator vessel in upper arm. Methods Based on the perforator vessel of medial deep main blood vessel in upper arm and blood supply of neurocutanous flap, as well as their interrelation with vaseularity of fascia skin, we designned the medial neurocutaneous flap with perforator vessel in upper arm to repair skin defects in shoulder, arm and elbow joint in 5 cases. Results All the flaps survived completely with primary healing. The patients were followed up for 6～12 months. The contour of flaps and the function of shoulder and elbow joint were satisfactory. Condttsion The neurocutaneous flap has a reliable blood supply and easily performed. It is very desirable for repairing skin defect in upper extremity.     

OmpA-VS2为靶基因的非标记实时荧光PCR检测沙眼衣原体感染

目的建立一种以OmpA-VS2为靶基因的非标记实时荧光聚合酶链反应(PCR)方法,以检测沙眼衣原体。方法设计15种型别沙眼衣原体通用引物,对OmpA-VS2进行套式PCR扩增和实时荧光PCR检测,并对其敏感性、特异性进行评价,并用临床标本进行验证。结果15种型别沙眼衣原体均扩增出168bp的目的片段;敏感性为每个反应1个拷贝。特异性分析可见,与10种泌尿生殖道病原体和共生菌均没有交叉反应。临床标本验证的结果显示,该方法与以质粒为靶基因的核酸扩增检测的Amplicor CT/NG方法的检测结果一致。结论该方法具有敏感性高、特异性强、扩增后无需PCR后处理等特点,可望用于临床与防治项目中沙眼衣原体的检测。     

四种细胞系培养沙眼衣原体易感性的比较

目的:比较McCoy、Hela、Vero、HaCat四种细胞培养沙眼衣原体的易感性及药物敏感性试验结果。方法:将5 000和1 000 IFU的衣原体分别接种到McCoy、HeLa、Vero、HaCat细胞中,培养48和72 h,通过碘染色和单克隆荧光抗体染色法,观察衣原体包涵体的数量。比较四种细胞对衣原体的易感性和两种染色方法的敏感性。培养McCoy和HeLa细胞,进行10株衣原体临床株对5种抗生素的药物敏感性试验,观察衣原体的最小抑菌浓度(MIC)。结果:在衣原体感染后48 h和72 h,比较McCoy、HeLa、Vero与HaCat细胞对沙眼衣原体的易感性,差异均具有统计学意义(P0.05)。在相同接种浓度下,碘染色观察McCoy和HeLa细胞中衣原体包涵体数量比HaCat细胞多,Vero细胞中包涵体数量最少;荧光染色时,McCoy和HeLa细胞中衣原体包涵体数量较多,HaCat细胞包涵体数量最少。衣原体感染48 h,碘染和荧光染色计数McCoy、HeLa和HaCat细胞内包涵体数量无明显差异(P0.05),Vero细胞具有明显差异(P0.05)。在McCoy和HeLa细胞中,5种抗生素对衣原体的最小抑菌浓度范围基本相同。结论:沙眼衣原体对McCoy细胞和Hela细胞有较高的易感性,碘染色观察Vero细胞中衣原体包涵体敏感性低,衣原体在McCoy和Hela细胞中的药敏试验结果一致。     

雷奈酸锶治疗人工关节磨损颗粒诱导骨溶解的实验研究

目的研究雷奈酸锶治疗人工关节磨损微粒诱导骨溶解的作用,探讨防治人工关节置换术后假体松动的可能性。方法采用小鼠建立Co—Cr-Mo微粒诱导骨溶解的颅骨模型,分为4组：A组为空白组,B组为颗粒对照组,C组为低剂量治疗组,D组为高剂量治疗组。28d后取出颅骨进行HE染色观察颅骨骨溶解面积,通过EUSA方法检测TNF—α和RANKL的表达,qRT-PCR方法检测RANKL和OPG的表达并分析RANKL／OPG比率变化。结果雷奈酸锶可以明显抑制微粒诱导的骨溶解,对下调TNF-α和RANKL蛋白有确切的疗效,而且这种改变与雷奈酸锶的剂量有关。虽然其对OPG基因转录的抑制作用不太明显,但是对RANKL基因转录和RANKL／OPG基因转录比率的调节与HE染色切片上骨溶解程度相一致。结论雷奈酸锶能够抑制小鼠颅骨骨溶解模型中TNF-α和RANKL的表达,并下调RANKL/OPG基因转录比率,从而抑制了由微粒诱导的骨溶解,为临床预防人工关节置换术后假体松动提供了理论依据。