铜绿假单胞菌慢性肺部感染模型的建立及评价

目的 建立大鼠铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染模型.方法 健康Sprague-Dawley大鼠分为铜绿假单胞菌感染组与对照组.将铜绿假单胞菌包被的硅胶管(3Fr,直径1.0 mm,长3.0 mm)置入感染组大鼠的一侧主支气管处;对照组置入生理盐水浸泡的无菌硅胶管.接种后28 d处死大鼠,分离肺组织,进行病理学检查和肺组织匀浆菌落计数.结果 硅胶管置入后28 d,感染组肺组织培养出野生型铜绿假单胞菌,匀浆菌落计数超过103cfu/g;大体病理表现为纤维增生、肉芽肿形成,镜下表现为淋巴细胞浸润为主的炎症反应;对照组大鼠肺组织未培养出铜绿假单胞菌,病理上未见明显改变.结论 铜绿假单胞菌包被的硅胶管置入大鼠一侧主支气管,可成功建立慢性肺部感染模型.该方法造价低廉、可操作性较强,易于推广,为PA肺部感染药物治疗提供了依据.     

Flt3L对COPD大鼠铜绿假单胞菌肺炎的防治研究

目的 建立铜绿假单胞菌(PA)肺部感染大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型,研究Flt3L(Fms-like tyrosine kinase-3 ligand )对其炎症反应的防治作用.方法 将50只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机分为对照组(NS组)、PA感染对照组(NPA组)、COPD大鼠组(COPD组)、COPD大鼠PA感染组(CPA组)和COPD大鼠PA感染Flt3L处理组(Flt3L组),每组动物各10只.用烟雾暴露法复制大鼠COPD模型,气管内滴入PA溶液复制肺部PA感染模型.COPD组、CPA组、Flt3L组大鼠分别在第1～60天以烟雾暴露法复制COPD模型,Flt3L组于第61～65天连续给予Flt3L(20g/kg)腹腔注射,每天1次,连续5d,第66天同时建立NPA组、CPA组和Flt3L组模型.24h后计算大鼠死亡率,对支气管肺泡灌洗液(BALF)、肺组织进行细菌学、细胞学、病理学等研究.无菌操作下取出大鼠脏器进行细菌培养、菌落计数及细菌鉴定.结果 Flt3L组大鼠存活率(87.5%)显著高于CPA组(50.0%)(P<0.01),Flt3L组大鼠支气管肺泡灌洗液中淋巴细胞数[(0.41～0.05)×109/L]与CPA组[(0.24～0.04)×109/L]比较显著增加(P<0.01),光镜下观察比较发现Flt3L组大鼠肺组织炎症反应较CPA组明显减轻,脏器细菌培养阳性率CPA组(37.5%)显著高于Flt3L组(12.5%)(P<0.01).结论 Flt3L能够增强COPD大鼠对PA肺部感染的抗病力.     

血液PEA检测在鉴别PA感染与定植中的作用

目的：探讨大鼠血液铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,PA）外毒素（paeruginosa exotoxin A,PEA）检测在PA感染与定植鉴别中的价值。方法：8周龄雄性SD大鼠180只,经地塞米松抑制免疫预处理后,随机分为感染组（气管内注入0.4 ml铜绿假单胞菌混悬液）、定植组（经咽部滴入铜绿假单胞菌混悬液0.2 ml）、对照组（气管内注入0.4 ml生理盐水）。各组按处死时间不同,再分为3 D组、7 D组、11 D组,分别于接种后第3、7、11 d随机抽取各组20只大鼠,心脏采血法处死,无菌取出肺组织并抽取血样。左肺组织匀浆行铜绿假单胞菌培养并计数菌落;右肺组织HE染色,镜下观察肺组织结构;收集血液分别以实时荧光定量PCR法检测PEA DNA及ELISA法检测IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α。结果：定植组、对照组大鼠各时间点肺组织均未见PA菌生长及明显炎症反应,定植组各时间点咽拭子培养见PA菌生长（其菌落计数均＞105 cfu/ml）,感染组大鼠肺组织匀浆各时间点均可见PA菌生长（其菌落计数均＞104 cfu/ml）及明显炎症反应,其中以第3 d最为明显,至第7、11天有所下降。各时间点感染组大鼠血液PEA DNA及IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达均有升高,与定植组及对照组表达差异均有统计学意义（P＜0.05）,各时间点定植组及对照组大鼠血液PEA DNA及IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达差异无统计学意义（P〉0.05）,其中感染组大鼠血液PEA DNA及IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α表达检测以第3 d最为显著。结论：血液PEA DNA检测对鉴别铜绿假单胞菌感染与定植有一定价值,其表达水平高低与大鼠肺组织PA菌菌落计数及肺组织炎症反应程度正相关,推测PEA DNA可能反映肺部感染程度及其预后。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在铜绿假单胞菌慢性肺部感染中的变化及其意义

目的 探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 Treg细胞)在铜绿假单胞菌(PA)慢性肺部感染中的变化及意义.方法 60只雄性SD大鼠随机分为PA感染组和空白对照组.将PA包被的硅胶管置人大鼠一侧主支气管建立慢性肺部感染模型,对照组置入无菌硅胶管.28 d后,荧光激活细胞分类(FACS)检测外周血CD4 CD25 Treg细胞数量,ELISA检测血清白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)水平,RT-PCR检测脾脏Foxp3 mRNA表达,肺组织行HE染色观察组织病理学变化.结果 PA感染组Treg/CD4 T淋巴细胞的百分比明显高于对照组[(19.79±6.45)%比(5.15±0.47)%,P＜0.05].PA感染组血清IL-10和TGF-β水平均显著高于对照组[IL-10:(231.52±54.48)pg/mL比(35.43±23.56)pg/mL,P＜0.05;TGF-β:(121.05±7.98)pg/mL比(36.02±8.94)pg/mL,P＜0.05].PA感染组Foxp3 mRNA相对含量较对照组显著升高[(0.80±0.044)比(0.25±0.054),P＜0.05].HE染色见PA感染组肺组织有大量淋巴细胞聚集,纤维增生明显,脓肿形成.结论 CD4 CD25 Treg细胞在PA慢性肺部感染时数量增多、功能增强,对感染慢性化形成有重要影响.     

铜绿假单胞菌密度感应系统对气道黏液高分泌的影响

目的 探讨铜绿假单胞菌(PA)的密度感应系统(QS)在气道黏液高分泌中的作用.方法 60只大鼠随机分为3组(野生型菌株PA01组、QS基因突变型菌株PA01-JP2组和对照组),分别将包被不同亚型PA的硅胶管置人大鼠一侧主支气管,建立慢性肺部感染模型,对照组则用生理盐水浸泡硅胶管.28 d后处死大鼠,取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF)采用AB-PAS染色、ELISA和RT-PCR等方法检测气道内黏蛋白MUC5AC蛋白及mRNA的表达水平,比较野生型菌株PA01和QS突变型菌株PA01-JP2对大鼠气道黏液分泌的影响.结果 PA01组较PA01-JP2组气道黏膜上皮的杯状细胞数目显著增多(P＜0.05),对照组的杯状细胞数目极少.PA01组MUC5ACmRNA表达量较PAO1-JP2组显著增多(P＜0.05),对照组MUC5AC mRNA仅有少量表达.PA01组BALF中MUC5AC蛋白分泌量明显高于PA01-JP2组(P＜0.05).结论 PA的QS重要基因缺损导致气道黏液分泌的能力显著下降.     

重型颅脑外伤行气管切开并发院内获得性肺炎临床分析

目的探讨重型颅脑外伤行气管切开后院内获得性肺炎的相关因素.方法采用回顾性方法对49例重型颅脑外伤行气管切开术并发院内获得性肺炎(HAP)患者的临床资料进行分析.结果伤后24 h内气管切开组HAP感染率显著低寸:伤后24 h后气管切开组(P＜0.01);伤后24 h内气管切开组感染控制率显著高于伤后24 h后气管切开组(P＜0.05);感染控制时间也显著短于伤后24 h后气管切开组(P＜0.01);痰培养结果以肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌及大肠埃希菌为主;其次为革兰阳性球菌以金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌为主.结论重型颅脑外伤昏迷患者应及早行气管切开,合理选用抗菌药物,加强全身支持治疗,提高机体抵抗力,能有效地救治重型颅脑外伤并发HAP.     

多重耐药铜绿假单胞菌院内感染的危险因素及药物敏感分析

目的 调查院内铜绿假单胞菌的感染现状及耐药性,分析多重耐药铜绿假单胞菌(MDRP)院内感染产生的危险因素,为临床监测与控制铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PA)感染提供依据.方法 收集该院2004～2007年引发院内感染的PA.采用标准纸片扩散法检测PA对8种药物的敏感性,并将检测出的MDRP与同时期敏感铜绿假单胞菌做为对照,采用病例对照研究方法,单因素(t检验,X2检验)及多因素Lo-gistic回归进行分析.结果 共收集到院内感染PA 101株.其中,多重耐药铜绿假单胞34株,总分离率33.66%,其中ICU和神经科分离率较高分别占25.70%和22.80%,主要标本来源是呼吸道标本,占89.11%.通过对铜绿假单胞菌院内感染单因素分析发现,高龄、曾入住ICU、患有慢性阻塞性肺疾病(COPD)/支气管扩张的基础病、住院时间≥4周、合并2种或2种以上细菌的混合感染、机械通气、以及分离出致病铜绿假单胞菌前两周接受氟喹喏酮、碳青酶烯类抗生素、亚胺培南及美罗培南治疗与MDRP感染有关.多因素Logistic回归分析确定了3项独立危险因素:曾入住ICU、机械通气、分离出MDRP前两周用过亚胺培南/美罗培南.结论 曾入住ICU、机械通气,以及亚胺培南/美罗培南的使用是MDRP感染的危险因素.重视无菌操作技术,控制机械性通气的使用,改善住院病室条件是预防MDRP的重要措施.     

PCT在不同基础疾病发生感染时的应用评价

目的探讨降钙素原(PCT)在肺炎与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的诊断价值,评估在不同基础疾病发生感染时变化及意义。方法将正常组、COPD组注入灭菌生理盐水后进行比较,将正常组、COPD组分别注入铜绿假单胞菌、肺炎链球菌后进行比较,比较大鼠体内注入不同菌液24 h内2组血清PCT的水平。结果正常组血清PCT与COPD组PCT同一时间点两两比较具有统计学意义(P 0.05);肺炎铜绿组PCT与AE铜绿组PCT同一时间点两两比较具有统计学意义(P 0.05);肺炎肺链组血清PCT与AE肺链组PCT同一时间点两两比较具有统计学意义(P 0.05)。结论检测血清PCT水平对于诊断肺炎和慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)有重要的指导意义。有助于区分不同基础疾病发生感染时,PCT水平变化具有差异性且有意义。     

铜绿假单胞菌QS系统缺陷对生物膜形成及大鼠肺部慢性感染的影响

目的研究lasI rhlI基因缺陷对铜绿假单胞菌体外生物膜形成的影响;观察铜绿假单胞菌PAO1野生型及其群体感应系统的lasI rhlI基因缺陷型菌株人工生物膜致病性的差异,了解群感应系统的lasI rhlI基因在铜绿假单胞菌生物膜感染致病过程中的作用。方法采用生理盐水-吸痰管系统进行铜绿假单胞菌体外生物膜的培养,3d后用扫描电子显微镜观察PAO1、PAO1 lasI rhlI形成生物膜的情况。从大鼠支气管内直接予以PA(菌种为铜绿假单胞菌PAO1野生型,PAO1 lasI rhlI基因缺陷型)海藻酸盐微菌粒悬液(1×109CFU/mL)攻击,建立PAO1野生型及QS系统的lasI rhlI基因缺陷型菌株人工生物膜肺部感染动物模型。于感染2周后评估各组大鼠的肺部病理学、细菌学的变化。结果3d后PAO1野生型的生物膜较厚,lasI rhlI基因缺陷型菌株所形成的生物膜结构呈薄膜状,明显薄于PAO1野生型。感染2周后,PAO1野生型组的病理学改变和细菌学改变均显著重于lasI rhlI基因缺陷组(P<0.001)。结论QS系统的lasI和rhlI基因影响铜绿假单胞菌体外形成生物膜的能力,并且在PA肺部感染过程中发挥着重要作用。     

小鼠铜绿假单胞菌慢性肺部感染树突状细胞的功能变化

目的：探讨树突状细胞（DCs）在小鼠铜绿假单胞菌慢性肺部感染中的功能变化。方法：选取54只小鼠,将含有铜绿假单胞菌（PA）的琼脂糖珠经气管灌注小鼠,建立PA慢性感染的动物模型为PA组（30只）。将给予无菌琼脂糖珠灌注气管的小鼠设为对照组（24只）。检测两组小鼠肺泡灌洗液中自介素23（IL-23）的浓度,观察肺组织病理切片及免疫组化CD11c的表达情况,对部分肺匀浆行细菌培养。结果：PA组出现病理改变,肺匀浆培养出PA。对照组病理改变不明显,细菌培养阴性。PA组肺泡灌洗液IL－23的浓度、树突状细胞标志物CD11c的表达均较对照组增多（P〈0．05）,它们在3d达到峰值,7d后仍维持在较高的水平。结论：在小鼠的PA慢性肺部感染中,突树状细胞对宿主的免疫系统起了重要的调节作用,与其分泌的免疫调节因子IL－23有很大的关系。IL－23可能是阻止慢性炎症反廊的一个有效靶标．     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值

目的 探讨降钙素原变化率的测定对细菌性肺炎的评估价值.方法 选取住院治疗的细菌性肺炎患者72例,根据治疗效果分为治疗有效组(有效组)47例和治疗无效组(无效组)25例,对治疗有效组和无效组中的降钙素酶原变化及影响肺炎治疗效果的危险因素进行分析.结果 有效组治疗后3天及治疗后7天的降钙素酶原显著低于无效组的患者(P＜0.05);年龄＞65岁、心功能≥3级、COPD、糖尿病、肺部双侧受累(X线示)、菌血症、感染性休克和3天内降钙素酶原变化率＜30％是影响细菌性肺炎治疗效果的危险因素;感染性休克、肺部双侧受累、3天内降钙素酶原变化率＜30％及心功能≥3级是影响细菌性肺炎治疗效果的独立危险因素.结论 测定降钙素原变化率对细菌性肺炎的疗效评估具有重要临床意义,可在临床推广应用.     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

35例开放性胫腓骨骨干骨折感染原因分析与处理

我科从1972－1997年共收治131例开放性胫腓骨骨干骨折，其中35例并发感染，感染率为26．72％。现对感染发生的原因进行分析，并提出相关的防治措施，以减少此类并发症的发生。1临床资料本组35例中，男24例，女11例；年龄15－62岁，平均34．9岁；左侧14例，右侧ZI例；车祸27例，高处跌伤5例，机器绞伤2例，重物压伤1例；上1／3骨折4例，中1／3骨折4例，下1／3骨折27例；粉碎性骨折27例，斜形骨折5例，横断形骨折3例；伤口面积最小ICmZ，最大50cm2。所有患者均在受伤8小时内行急诊清创术后一期闭合创面，骨折行内固定24例，行外固定11例，损…     

Effects of age in the structure of the bursa of Fabricius of deshi chicken of Bangladesh

The bursa of Fabricius of deshi chicken from prenatal ED15 to postnatal D90 were studied. The growth and development at each stage of the study period were highly significant.